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1. Mota, Daniele Sousa; http://lattes.cnpq.br/6450592239077241. Produ??o e purifica??o da prote?na Cas13a de Leptotrichia wadeii e an?lise de sua aplicabilidade para detec??o de Plasmodium vivax e v?rus Zika.

Degree: 2020, Universidade Federal do Amazonas

As doen?as infecciosas continuam sendo um grande problema de sa?de no mundo, fazendo parte de maneira significativa dos dados de morbimortalidade. O reconhecimento precoce destas enfermidades, atrav?s do uso de testes para diagn?stico r?pidos e precisos, agilizam o tratamento do paciente, permitindo assim um melhor atendimento cl?nico. A mal?ria e a febre do v?rus Zika (ZIKV) s?o doen?as infecciosas t?picas das regi?es tropicais do mundo, como a Amaz?nia brasileira. As ferramentas tradicionais para identifica??o dessas doen?as possuem desvantagens que limitam a detec??o, como baixa especificidade e sensibilidade. Logo, a busca de novos m?todos capazes de superar estas dificuldades vem sendo almejada por muitos grupos de pesquisa p?blicos e privados. Neste campo, o sistema CRISPR-Cas vem ganhando destaque nos ?ltimos 5 anos, contribuindo para importantes avan?os no desenvolvimento de t?cnicas para detec??o precisa de alvos moleculares. O objetivo geral deste trabalho foi realizar a express?o e purifica??o da prote?na do sistema CRISPR-Cas13a, chamada LwCas13a, assim como validar sua atividade enzim?tica aplicando ferramentas para o diagn?stico de mal?ria causada por Plasmodium vivax e para Zika v?rus. Como resultados, obtivemos com sucesso a express?o e purifica??o da prote?na recombinante LwCas13a, produ??o de CRISPR RNA (crRNA) e de RNA alvo sint?tico (ssRNA) espec?ficos para Plasmodium vivax e ZIKV. Quais observamos reatividade da enzima LwCas31a com uma eleva??o da intensidade de fluoresc?ncia ? medida que se aumentava as concentra??es de ssRNA no sistema. Uma rela??o inversamente proporcional foi observada quando dsDNA foi utilizado. As amostras cl?nicas de pacientes infectados com ZIKV apresentaram reatividade positiva utilizando o m?todo descrito. N?o foram obtidos resultados satisfat?rios para o diagn?stico de mal?ria por P. vivax utilizando as ferramentas produzidas. Trabalhos futuros ser?o aplicadas as ferramentas produzidas a um N amostral maior de pacientes infectados por ZIKV e novos alvos moleculares que permitam a detec??o eficiente Plasmodium vivax utilizando o sistema CRISPR-Cas13a.

Infectious diseases remain a major health problem in the world, making a significant part of the morbidity and mortality data. The early recognition of these diseases, through the use of rapid and accurate diagnostic tests, speeds up the treatment of the patient, thus allowing for better clinical care. Malaria and Zika virus fever (ZIKV) are infectious diseases typical of tropical regions of the world, such as the Brazilian Amazon. Traditional tools for identifying these diseases have disadvantages that limit detection, such as low specificity and sensitivity. Therefore, the search for new methods capable of overcoming these difficulties has been pursued by many public and private research groups. In this field, the CRISPR-Cas system has been gaining prominence in the last 5 years, contributing to important advances in the development of techniques for the accurate detection of molecular targets. The general objective…

Advisors/Committee Members: Mari?ba, Luis Andr? Morais, http://lattes.cnpq.br/4784959431673419, Costa, Allyson Guimar?es, http://lattes.cnpq.br/7531662673281014, Tarrag?, Andr?a Monteiro, http://lattes.cnpq.br/4644326589690231.

Subjects/Keywords: Mal?ria; Plasmodium vivax; Sistema CRISPR-Cas13a; V?rus Zika; Purifica??o da prote?na recombinante; CIENCIAS BIOL?GICAS; Crispr; Cas13a; Plasmodium vivax; V?rus Zika; Diagn?stico

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APA (6th Edition):

Mota, D. S. h. c. b. (2020). Produ??o e purifica??o da prote?na Cas13a de Leptotrichia wadeii e an?lise de sua aplicabilidade para detec??o de Plasmodium vivax e v?rus Zika. (Masters Thesis). Universidade Federal do Amazonas. Retrieved from https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7705

Chicago Manual of Style (16th Edition):

Mota, Daniele Sousa; http://lattes cnpq br/6450592239077241. “Produ??o e purifica??o da prote?na Cas13a de Leptotrichia wadeii e an?lise de sua aplicabilidade para detec??o de Plasmodium vivax e v?rus Zika.” 2020. Masters Thesis, Universidade Federal do Amazonas. Accessed July 08, 2020. https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7705.

MLA Handbook (7th Edition):

Mota, Daniele Sousa; http://lattes cnpq br/6450592239077241. “Produ??o e purifica??o da prote?na Cas13a de Leptotrichia wadeii e an?lise de sua aplicabilidade para detec??o de Plasmodium vivax e v?rus Zika.” 2020. Web. 08 Jul 2020.

Vancouver:

Mota DShcb. Produ??o e purifica??o da prote?na Cas13a de Leptotrichia wadeii e an?lise de sua aplicabilidade para detec??o de Plasmodium vivax e v?rus Zika. [Internet] [Masters thesis]. Universidade Federal do Amazonas; 2020. [cited 2020 Jul 08]. Available from: https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7705.

Council of Science Editors:

Mota DShcb. Produ??o e purifica??o da prote?na Cas13a de Leptotrichia wadeii e an?lise de sua aplicabilidade para detec??o de Plasmodium vivax e v?rus Zika. [Masters Thesis]. Universidade Federal do Amazonas; 2020. Available from: https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7705

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