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A observação de algumas qualidades das tuberculinas de uso animal, produzidas no país, em número de quatro amostras, é feito através de testes microbiológicos, inoculações experimentais, titulação bioquímica e biológica das amostras encontradas. São analisados aspectos da origem, apresentação, tipo e destino, emprego de estabilizadores e preservativos, esterilidade específica e secundária, toxicidade, títulos bioquímicos e biológicos, bem como perda de potência. Foram constatados problemas na padronização bioquímica e biológica, bem como acentuada perda de potência de amostras. Evidencia-se a necessidade de uniformização do produto dentro dos padrões internacionais, tornando viáveis observações epidemiológicas concretas e eficiente controle da tuberculose no país.

Qualities of four tuberculin samples, for animal use, produced and/or employed in Brazil, are estudied trough microbiological tests, experimental inoculations, biochemical and biological titration. They are analysed on aspects of origin, presentation, type and destination, presence of preservatives and stabilizants, specific and secondary sterility. toxicity, biochemical and biological titers and loss of potency. Problems were observed in the biochemical and biological standardization aspects, as well as marked loss of potency in sample. The uniformization necessity of the product, in international standard values, is recognized for better viability of epidemiological studies and efficiency of control measures of turberculosis, in our country.

Advisors/Committee Members: Jose Britto Figueiredo, Jose Britto Figueiredo, Osmane Hipolito, Ronaldo Reis.

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O crescimento da caprinocultura no Brasil e a necessidade de controle sanitário dessas criações justificam o estudo de avaliação do teste tuberculinico na espécie caprina. Utilizando os parâmetros de Silva et al. (2006) foram avaliados 600 caprinos procedentes dos Estados de Minas Gerais, Paraná, Pernambuco, Paraíba e São Paulo. Baseados nos valores do Teste Cervical Comparativo (TCC) 60 animais foram selecionados e submetidos a exame clínico, eutanásia e colheita de material para exames microbiológicos, histopatológicos e moleculares. Dos 36 caprinos positivos, 27 (72%) resultaram em isolamento de micobactérias tipificadas como sendo do complexo M. tuberculosis. Foram identificados focos de tuberculose em caprinos nos Estados de São Paulo, Minas Gerais e Paraíba. Além do isolamento de micobactérias do complexo M. tuberculosis, foram identificados em alguns animais outras bactérias como M. kansasii, M. flavescens, M. avium, complexo M. florentinum M. lentiflavum M. simiae, Corynebacterium pseudotuberculosis e C. bovis. Em um caso houve o isolamento de C. bovis concomitante com micobactéria do complexo M. tuberculosis. As lesões macroscópicas e histopatológicas não diferenciaram a infecção provocada por C. bovis. ou por micobactéria do complexo M. tuberculosis. Os resultados bacteriológicos, histopatológicos e de identificação genética validam a utilização do padrão de interpretação de Silva et al. (2006) no TCC para o diagnóstico da tuberculose em caprinos.

The development of farming goats in Brazil, and the need of sanitary control of these flocks, justify the study of tuberculin test evaluation in goats. Using cut-off points established by Silva et al. (2006), 600 goats from Minas Gerais, Paraná, Pernambuco, Paraíba and São Paulo states were evaluated. According to Comparative Cervical Test values, 60 goats were selected, and submitted to clinical exams, euthanized and materials collected for microbiologycal, histopathologycal and genetic typing. Out of the 36 positive goats, 27 (72%) had isolation of micobacteria classified like Mycobaterium tuberculosis complex. Focus of tuberculosis were identified in São Paulo, Minas Gerais and Paraíba states. Besides isolation of the M. tuberculosis complex micobacteria, other bacterias like M. kansasii, M. flavescens, M. avium, M. florentinum lentiflavum simiae complex, Corynebacterium pseudotuberculosis and C. bovis were identified in some animals. In one case, isolation of C. bovis occurred together with micobacteria of the M. tuberculosis complex. The macroscopic and histopathological lesions did not discriminate infection for C. bovis or of the M. tuberculosis complex micobateria. The bacteriological, histopathological and genetic typing results validate the use of cut-off points established by Silva et al. (2006), in the Cervical Comparative Test for diagnosis of tuberculosis in goats.

Advisors/Committee Members: Pinheiro, Sonia Regina.

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El objetivo de este trabajo fue establecer un protocolo de aplicaciones de PPD Aviar que permita el diagnóstico temprano de la paratuberculosis bovina. Con este propósito se estudiaron animales de dos rodeos lecheros con una prevalencia real de 30% y 7%, y de un rodeo de cría negativo. No se encontraron diferencias significativas, con la prueba de ROC (P=0,14) entre la aplicación intradérmica en la tabla del cuello (TC) y el pliegue anocaudal interno (PACI), aunque la TC detectó mayor número de reactantes. Al analizar el uso de distintas concentraciones de PPD Aviar (0,5 mg/mL y 2 mg/mL) con la prueba de diferencia de medias Bayesianas se encontraron diferencias en el tamaño de los pliegues cutáneos, especialmente al aplicar 2 mg/mL (P=0,0031); sin embargo, con la prueba de ROC no existieron diferencias significativas (P=0,931) con un AUC de 0,718 y 0,719 para cada concentración. Además, con el análisis Bayesiano de modelos latentes, se definió al punto de corte óptimo de la prueba con una diferencia en los pliegues cutáneos > 0 mm. La prueba de ROC determinó una sensibilidad del 69% y una especificidad del 86,2%. Con estadística Bayesiana se calculó un VPP de 42,5%, un VPN de 91,6%, un LR+ de 3,3 y el LR- de 0,4. Con ROCRegression se estableció que es recomendable realizar entre 3 y 5 aplicaciones de tuberculina aviar, con un intervalo de tiempo entre aplicaciones no mayor a 3 meses para detectar al mayor número de enfermos con infección silente y subclínica. Algunos animales infectados presentaron periodos de inmunidad celular y humoral superpuestos con la liberación de Map detectables al cultivo. Se observó en pocos casos, que las PFA, después de la aplicación intradérmica de la PPD aviar, poseían niveles de concentración levemente elevados, pero de corta duración.

Facultad de Ciencias Veterinarias

Advisors/Committee Members: Travería, Gabriel Eduardo, Bernardelli, Amelia, Giacoboni, Gabriela, Samartino, Luis.

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O objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência da tuberculose em um plantel bovino pelo teste cervical comparativo (TCC), e analisar a eficiência de exames complementares na confirmação da infecção. O estudo foi realizado em um rebanho de exploração leiteira no município de Perdizes MG. Realizou-se a tuberculinização em 164 bovinos, sendo que destes 40 foram encaminhados ao abate sanitário. A inspeção macroscópica post mortem das carcaças foi acompanhada de colheita de amostras de muco nasal, sangue e tecido (fígado, pulmão e linfonodo mediastínico) para os exames de PCR, ELISA e histopatológico com colorações de Hematoxilina-Eosina (HE) e Ziehl-Neelsen (ZN) respectivamente. Dos 164 bovinos avaliados pelo TCC, 41 (25%) foram positivos, 29 (17,68%) inconclusivos e 94 (57,32%) negativos. Dos 40 bovinos encaminhados para abate, 22 (55%) carcaças apresentaram algum tipo de lesão macroscópica sugestiva de tuberculose, sendo 14 (35%) nos linfonodos mediastínicos, sete (17,5%) no fígado e seis (15%) no pulmão. Nos achados histopatológicos visualizados em HE 13 (32,5%) carcaças apresentaram alterações histológicas, sendo seis (15%) nos linfonodos mediastínicos, cinco (12,5%) no fígado e três (7,5%) no pulmão. Não foi observada a presença de bacilos álcool-ácido resistentes em nenhuma das amostras avaliadas. O ensaio sorológico de ELISA/IDEXX identificou um (2,5%) animal reagente, e o teste de PCR detectou DNA de M. bovis em uma (2,5%) amostra. Por ser um rebanho leiteiro, a ocorrência da tuberculose pode representar um risco zoonótico. O TCC já deveria ser um exame de rotina obrigatório em toda propriedade que comercializa leite ou carne, pois reconhece infecções recentes, muitas vezes não detectadas em exames complementares.

The aim of this study was to evaluate the incidence of tuberculosis in a cattle herd by the cervical comparative intradermal tuberculin test (ITT), and analyze the efficiency of complementary diagnostic methods in confirming the infection. The study was conducted on a breeding dairy farm in the city of Perdizes MG. Tuberculin test was performed in 164 cattle, of which 40 were positive and slaughtered. The macroscopic post mortem inspection of carcasses was followed by the collection of nasal swabs, blood and tissue samples (liver, lung and mediastinal lymph node) for PCR tests, ELISA and histopatology with Hematoxylin-Eosin (HE) and Ziehl-Neelsen (ZN) respectively. Of the 164 cattle analysed by ITT, 41 (25%) were positive, 29 (17.68%) inconclusive and 94 (57.32%) negative. Of the 40 cattle slaughtered, 22 (55%) carcasses had macroscopic lesions suggestive of tuberculosis, 14 (35%) in the mediastinal lymph nodes, seven (17.5%) in the liver and six (15%) in the lung. The histopathology HE identified 13 (32.5%) carcasses with histological changes, six (15%) in the mediastinal lymph nodes, five (12.5%) in the liver and three (7.5%) in the lung. At ZN, the presence of acid-fast bacilli was not detected in any of samples tested. The ELISA/IDEXX identified one (2.5%) animal reagent, and the PCR test…

Advisors/Committee Members: Anna Monteiro Correia Lima Ribeiro, Alessandra Aparecida Medeiros, Eliana Roxo.

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A inexistência de padrões nacionais para a realização e interpretação da prova de tuberculina em ovinos motivou o presente trabalho, pois apesar da tuberculose não estar incluída em Plano Nacional de Controle e Erradicação em pequenos ruminantes, estabelece a legislação vigente que é obrigatório o sacrifício de animais com essa zoonose, sendo o diagnóstico firmado nesses animais principalmente através do alergoteste tuberculínico. Assim, esta pesquisa visou além de avaliar reações clínicas provocadas pela resposta imuno-alérgica intradérmica à tuberculina, estabelecer valores de referência para a interpretação da reação em ovinos experimentalmente inoculados com antígenos de cepas padrões de Mycobacterium bovis e Mycobacterium avium. Utilizou-se 30 ovinos, clinicamente sadios, negativos à prova de tuberculina cervical comparativa (TCC), segundo critérios estabelecidos pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) através do Plano Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) em bovinos e bubalinos, distribuídos por três grupos de 10 animais cada, a saber: A - sensibilizados com M. avium; B - sensibilizados com M. bovis e C (Controle) - que receberam injeção de solução fisiológica. Os ovinos foram monitorados através de exames físicos e complementares semanais. Após 45 dias da sensibilização, realizou-se a prova de TCC com reação medida pela variação da espessura da pele com cutímetro de mola, nos seguintes momentos: antes da aplicação das tuberculinas (PPDs); 12h, 24h, 48h, 72h e 96h após a aplicação das mesmas. Em relação à reação ao PPD bovino, no teste cervical simples, lido às 72 horas (± 6 horas) pós-tuberculinização (p. t.), considerou-se uma reação como positiva, quando o aumento da espessura da pele foi igual ou maior que 2,49 mm; como inconclusiva, com as medidas de aumento entre 1,00 e 2,48 mm, e como reação negativa, aumentos da espessura da pele inferiores a 1,00 mm, sendo estes valores propostos como padrão para o teste intradérmico simples na região cervical. A análise dos resultados da leitura do teste cervical comparativo, realizada às 72 horas (± 6 horas) p. t., permitiu concluir-se que o animal poderá ser considerado com resposta: positiva, quando a reação ao PPD bovino superar aquela ao aviário em pelo menos 2,00 mm; inconclusiva, quando a reação ao PPD bovino for maior que aquela ao aviário, com diferença entre 1,00 e 1,99 mm, e negativa quando a reação bovina for menor que a aviária ou > em até 0,99 mm. Na avaliação histológica das respostas tuberculínicas homólogas, 96 horas após a injeção do PPD, constatou-se a presença de moderado a intenso infiltrado inflamatória, constituído, preferencialmente, por células mononucleares.

The inexistence of national patterns for the realization and interpretation of tuberculin test in sheep motivated this research. Although tuberculosis is not included in the National Plan for the Control and Eradication in small ruminants, the current legislation has made it mandatory the sacrifice of animals with…

Advisors/Committee Members: Benesi, Fernando José.

▼ O diagnóstico presuntivo da tuberculose bovina é baseado na análise da resposta imune celular a antígenos micobacterianos. Procedeu-se a simulação experimental de infec?o por Mycobacterium bovis e Mycobacterium avium em bovinos a fim de acompanhar a resposta imune, a partir do teste cervical comparativo e da evolução da produção específica de interferon-gama, além de identificar a interferencia de reações inespecíficas por M. Avium nos resultados dos testes. Verificou-se que os animais experimentais desencadearam resposta de hipersensibilidade tardia contra os bacilos inativados, e que ambos os testes diagnósticos da tuberculose bovina foram eficientes na identificação dos animais sensibilizados com M. bovis e na discriminação das reações geradas pela inoculação dos bovinos com M. avium. Com o objetivo de rastrear a infeção por Mycobacterium bovis em bovinos de corte de diferentes procedencias do Estado de Mato Grosso do Sul, procedeu-se à investigação retrógrada em rebanhos considerados focos segundo inspeção sanitária após abate em cinco matadouros-frigoríficos. As lesões sugestivas de tuberculose foram responsáveis por 63 condenações em 483.047 bovinos abatidos (0,013%). As lesões macroscópicas distribuíram-se nas regiões do tórax (49,21%), da carcaça (33,33%), da cabeça (11,11%) e do abdome (6,35%). O diagnóstico histopatológico demonstrou que 74,6% das lesões tratavam-se de granulomas. As carcaças condenadas por tuberculose foram provenientes de 45 propriedades, das quais tres disponibilizaram 865 bovinos para a realização da investigação por meio do teste cervical comparativo (TCC), que não identificou animais reagentes. A não identificação de animais reagentes ao TCC durante a investigação dos focos pode refletir a baixa prevalencia de tuberculose bovina em rebanhos de corte. Advisors/Committee Members: Osório, Ana Luiza Alves Rosa (advisor).

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Dados referentes à tuberculose caprina no Brasil e sua importância em saúde pública são escassos. Diante disso, este trabalho teve por objetivos investigar a ocorrência e pesquisar aspectos epidemiológicos da tuberculose em rebanhos leiteiros caprinos na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, MG. Foram tuberculinizados 233 caprinos provenientes de sete propriedades leiteiras, utilizando-se o teste cervical comparativo, tomando-se como referência os procedimentos e critérios de interpretação de resultados padronizados para esta espécie. Dos animais submetidos ao teste, 1,29% (3/233) reagiram positivamente, 2,14% (5/233) apresentaram reações inconclusivas e 96,57% (225/233) não reagiram. Todos os caprinos positivos e um com resposta inconclusiva foram submetidos à necropsia. Amostras de linfonodos, fígado, pulmão e rim que apresentaram alterações foram colhidos para exame histopatológico (Hematoxilina-Eosina). Material proveniente de abscessos e fragmentos de linfonodos foi submetido à cultura em meio de Stonebrink e Petragnani. Um inquérito epidemiológico foi procedido para análise dos fatores relacionados à ocorrência de tuberculose nas propriedades. Não foram encontradas lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose nos animais necropsiados, nem alterações histopatológicas. Também não houve crescimento de micobactérias na cultura. A taxa de reatividade à tuberculina dos caprinos foi de 1,29 %. Por se tratar de rebanhos leiteiros, a ocorrência de tuberculose pode representar risco zoonótico na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, MG. A interpretação dos registros epidemiológicos, associada aos resultados da tuberculinização constatou reagentes positivos somente na propriedade onde se utilizou leite bovino in natura para alimentar cabritos recém nascidos, porém a ocorrência da tuberculose não pode ser confirmada nesses caprinos.

Data on caprine tuberculosis in Brazil and its importance for public health are scarce. Therefore, the purpose of this study was to investigate the occurrence and examine epidemiological aspects of tuberculosis in dairy goat herds in the Triângulo Mineiro and Alto Paranaíba mesoregion in the state of Minas Gerais, Brazil. Two hundred and thirty-three goats from seven dairy farms were tuberculinized using the comparative cervical tuberculin test, taking as reference the procedures and interpretation criteria of standard results for this species. Of the animals subjected to the test, 1.29% (3/233) reacted positively, 2.14% (5/233) showed inconclusive reactions, and 96.57% (225/233) showed no reaction. All the goats that tested positive and one showing an inconclusive response were necropsied. Samples of lymph nodes, liver, lung and kidney presenting alterations were collected for a histopathological examination (hematoxylin-eosin). Material removed from abscesses and lymph node fragments were cultured in Stonebrink and Petragnani culture media. An epidemiological inquiry was carried out to analyze risk factors on the farms. The necropsied animals did not exhibit…

Advisors/Committee Members: Frederico Ozanam Carneiro e Silva, Paulo Roberto de Oliveira, Flávia Maria Esteves Machado, Eliana Roxo, Anna Monteiro Correia Lima.

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A tuberculose é uma doença infectocontagiosa predominantemente causada pelo bacilo Mycobacterium tuberculosis, também conhecido por bacilo de Koch. Após a inalação desta micobactéria, os indivíduos podem desenvolver doença, ou por outro lado, permanecer infetados, com uma forma latente de infeção. Os indivíduos com infeção tuberculose latente são assintomáticos, porém encontram-se em risco de desenvolver doença ativa no futuro. O envolvimento pulmonar é o mais frequente, contudo, o bacilo da tuberculose pode atingir qualquer órgão ou sistema do organismo. Conhecida por muitos como “a grande simuladora”, a tuberculose carrega frequentemente uma elevada dificuldade diagnóstica, pelas múltiplas apresentações que pode ter. Esta é capaz de simular um número considerável de patologias que cursam com atingimento inespecífico e progressivo do estado geral. Apesar de poder ser prevenida e curada mediante diagnóstico e tratamento adequados e atempados, a tuberculose pode evoluir desfavoravelmente com consequências devastadoras. A descoberta do seu agente etiológico remonta ao ano de 1882, por Robert Koch. No entanto, apesar dos avanços do conhecimento desde essa época, bem como do advento da antibioterapia, a tuberculose continua a constituir um problema de saúde atual, com grande impacto a nível mundial. No decorrer dos anos noventa do século passado, foi mesmo considerada pela Organização Mundial de Saúde como uma emergência global, e atualmente o combate desta infeção continua a ser parte integrante da agenda da comunidade nacional e internacional. Verifica-se nos dias que correm, um significativo desconhecimento sobre esta infeção bem como a frequente associação da mesma a um passado remoto, estando muitas vezes na origem de estigma por parte da sociedade. Atendendo à realidade da tuberculose, propõe-se com a presente dissertação desmistificar e esclarecer algumas questões relativas a esta doença infeciosa tão atual. Para a sua elaboração, foi efetuada uma revisão bibliográfica do tema, com recolha de informação em sites de organizações e instituições da área em questão, e consulta de artigos científicos. O trabalho incorpora uma contextualização epidemiológica da tuberculose a nível nacional e internacional, uma visão sobre a transmissão e fisiopatologia da infeção, bem como os aspetos fundamentais a conhecer sobre a tuberculose pulmonar e a forma latente da infeção. É abordado sucintamente a apresentação da tuberculose pulmonar e o modo como se processa o seu o diagnóstico e tratamento. Relativamente à infeção latente por tuberculose, esta recebe um especial destaque, pelo facto de representar um dos reservatórios “ocultos” mais significativos de doença ativa no futuro e contágio, sendo abordadas, entre outras questões, as particularidades do seu rastreio.

Tuberculosis is a contagious infectious disease mainly caused by the bacillus Mycobacterium tuberculosis, also konwn as Koch’s bacillus. After inhalation of this mycobacterium, individuals may develop the disease, or otherwise remain infected with a latent form of…

Advisors/Committee Members: Monteiro, Andreia, Rodrigues, Bárbara Gonçalves.