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Universidade Estadual de Campinas

1. Flores-Nascimento, Mariane Cristina, 1979-. Identifica??o de prote?nas diferencialmente expressas em pacientes com trombose venosa profunda .

Degree: 2011, Universidade Estadual de Campinas

Resumo: A trombose venosa profunda (TVP) ? uma doen?a multifactorial, e possui uma alta taxa de morbi-mortalidade devido a complica??es como embolia pulmonar e a s?ndrome p?stromb?tica, e cerca de 25 % dos pacientes apresentar?o recorr?ncia em 5 anos. A identifica??o de novos fatores envolvidos na fisiopatologia da TVP pode ser convertida em implica??es de grande import?ncia no manejo destes pacientes, preven??o de recorr?ncia e no desenvolvimento de novas terapias. O interesse em avaliar as plaquetas e as amostras de plasma se deve ao fato de que as fun??es plaquet?rias n?o est?o completamente compreendidas, e aparentemente o papel das plaquetas poderia ir al?m do seu envolvimento na hemostasia. Como o plasma potencialmente fornece uma janela para a observa??o do indiv?duo como um todo, a an?lise prote?mica tanto das plaquetas como do plasma poderia implementar o nosso conhecimento acerca da fisiopatologia da TVP. OBJETIVO: Neste estudo foram analisados os perfis proteicos de plaquetas e amostras de plasma de tr?s pacientes com TVP, que foram comparados com os resultados obtidos a partir de amostras de 1 irm?o e 1 vizinho para cada paciente, a fim de minimizar as interfer?ncias gen?ticas e ambientais. Estes pacientes apresentaram epis?dios espont?neos e recorrentes de TVP proximal e mencionaram um hist?rico familiar de dist?rbios da coagula??o. M?TODOS: as plaquetas necessitaram ser lavadas e lisadas, e as amostras de plasmas tiveram a albumina depletada antes de as prote?nas serem alquiladas, reduzidas, precipitadas com acetona e hidrolisadas com tripsina. Os pept?deos das plaquetas e das amostras de plasma foram fracionados por cromatografia de fase reversa e troca cati?nica, respectivamente. Depois disto, os pept?deos plaquet?rios foram direcionados ao espectr?metro de massas LTQOrbitrap e a busca das prote?nas foi realizadas atrav?s do Sorcerer/Sequest. Os pept?deos plasm?ticos foram encaminhados ao espectr?metro de massas ESI Q-TOF Premier e as prote?nas foram analisadas pelo Mascot. RESULTADOS: Cinco prote?nas estiveram presentes apenas nas plaquetas dos pacientes, estando ausentes em todos os controles: a prote?na ligante da Apolipoprote?na A1, a sub-unidade ?1 do Coat?mero, a Desidrogenase 11-17-? do Estradiol, a Leucotrieno A-4 Hidrolase e a Sorbitol Desidrogenase. Al?m disso, verificou-se que outras prote?nas estiveram diferencialmente expressas em amostras de plasma pacientes e controles: a protease C4-A, o inibidor C1 da Inter-?-Tripsina, o inibidor H1 de cadeia pesada, a prote?na Amil?ide S?rica A, a glicoprote?na ?-2-HS, a isoforma 2 da inter- ?-tripsina, a apolipoprote?na A-IV e o inibidor de cadeia pesada H4. CONCLUS?ES: A avalia??o de plaquetas e amostras de plasma de pacientes com TVP espont?nea permitiu a identifica??o de prote?nas diferencialmente expressas quando comparados a irm?os e vizinhos, que podem desempenhar importantes pap?is na fisiopatologia da doen?a por se relacionarem a processos inflamat?rios, imunes e no de transporte de lip?deos; Abstract: Deep venous thrombosis (DVT) is… Advisors/Committee Members: Annichino-Bizzacchi, Joyce Maria, 1957- (advisor), Carvalho, Maria das Gra?as (committee member), Tavassi, Ana Marisa Chudzinski (committee member), Velloso, Licio Augusto (committee member), Traina, Fabiola (committee member).

Subjects/Keywords: Plasma sangu?neo; Plaquetas (Sangue); Prote?mica; Trombose venosa

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APA (6th Edition):

Flores-Nascimento, Mariane Cristina, 1. (2011). Identifica??o de prote?nas diferencialmente expressas em pacientes com trombose venosa profunda . (Thesis). Universidade Estadual de Campinas. Retrieved from http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/310154

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Chicago Manual of Style (16th Edition):

Flores-Nascimento, Mariane Cristina, 1979-. “Identifica??o de prote?nas diferencialmente expressas em pacientes com trombose venosa profunda .” 2011. Thesis, Universidade Estadual de Campinas. Accessed October 14, 2019. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/310154.

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MLA Handbook (7th Edition):

Flores-Nascimento, Mariane Cristina, 1979-. “Identifica??o de prote?nas diferencialmente expressas em pacientes com trombose venosa profunda .” 2011. Web. 14 Oct 2019.

Vancouver:

Flores-Nascimento, Mariane Cristina 1. Identifica??o de prote?nas diferencialmente expressas em pacientes com trombose venosa profunda . [Internet] [Thesis]. Universidade Estadual de Campinas; 2011. [cited 2019 Oct 14]. Available from: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/310154.

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Council of Science Editors:

Flores-Nascimento, Mariane Cristina 1. Identifica??o de prote?nas diferencialmente expressas em pacientes com trombose venosa profunda . [Thesis]. Universidade Estadual de Campinas; 2011. Available from: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/310154

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2. Oliveira, Adriana Raquel Duarte. Influ�ncia de compostos de origem natural em microrganismos de origem alimentar e cl�nica.

Degree: 2016, RCAAP

O uso indiscriminado dos agentes antimicrobianos, nomeadamente antibi�ticos e biocidas, levou ao desenvolvimento de resist�ncias em bact�rias de origem alimentar e hospitalar. Estas resist�ncias representam uma amea�a � sa�de p�blica, pois reduzem a efic�cia dos mesmos compostos, aumentando desta forma a mortalidade e a morbidade. Assim, torna-se fundamental o estudo de novos compostos antimicrobianos no controlo do crescimento e dissemina��o dos mesmos agentes patog�nicos. Os compostos de origem natural t�m sido apresentados como alternativas promissoras aos agentes antimicrobianos atualmente utilizados, n�o s� como poss�veis conservantes alimentares, mas tamb�m como adjuvantes do processo de desinfe��o de superf�cies. Em alguns casos, a exposi��o das bact�rias a concentra��es subinibit�rias dos compostos naturais pode levar a adapta��o aos mesmos e ao desenvolvimento de resist�ncias hom�logas e/ou cruzadas a outros agentes. Neste trabalho, foi avaliada a influ�ncia de concentra��es subinibit�rias de resveratrol sobre bact�rias problem�ticas, Listeria monocytogenes e Staphylococcus aureus relativamente ao desenvolvimento de resist�ncia hom�loga e cruzada a antibi�ticos, habitualmente utilizados no tratamento de infe��es causadas por estas bact�rias, e a um desinfetante frequentemente utilizado no sector alimentar. Foi ainda avaliado, se as mesmas concentra��es de resveratrol poderiam levar a uma prote��o celular contra condi��es adversas, nomeadamente stress �cido e t�rmico. Os resultados sugeriram, de um modo geral, que o resveratrol n�o levou ao desenvolvimento de resist�ncia hom�loga nem cruzada, evidenciado, no entanto, um aumento da toler�ncia ao stress t�rmico e �cido em L. monocytogenes, mas para S. aureus este comportamento n�o foi muito evidente. Estes resultados apoiam a possibilidade da utiliza��o do resveratrol como conservante alimentar. Por outro lado, a desinfe��o representa um processo fundamental no controlo e dissemina��o dos microrganismos, sendo tamb�m relevante encontrar novas alternativas para colmatar a falta de antimicrobianos eficazes na elimina��o de bact�rias problem�ticas na pr�tica cl�nica. Assim, no presente trabalho foi tamb�m avaliado o potencial sin�rgico do linalool, composto maiorit�rio do �leo essencial de coentros, em combina��o com desinfetantes habitualmente utilizados em ambiente hospitalar, sobre Acinetobacter baumannii e S. aureus. Em A. baumannii, foi observado que o linalool em combina��o com o cloreto de benzalc�nio ou a clorohexidina digluconato tem um efeito sin�rgico, e em combina��o com o �cido perac�tico ou o hipoclorito de s�dio tem um efeito aditivo. No caso do S. aureus evidenciou-se um efeito aditivo para todas as intera��es. Assim, o linalool apresenta potencial em futuras combina��es com desinfetantes.

The indiscriminate use of antimicrobials, namely antibiotics and biocides, has led to the development of resistance in foodborne and hospital pathogens. This resistance represents a serious threat to public health, because it reduces the overall effectiveness…

Advisors/Committee Members: Domingues, Fernanda da Concei��o, Ferreira, Susana.

Subjects/Keywords: Acinetobacter Baumannii; Adapta��o; Linalool; Listeria Monocytogenes; Prote��o Celular; Resveratrol; Sinergismo; Staphylococcus Aureus; Dom�nio/�rea Cient�fica::Engenharia e Tecnologia::Engenharia Qu�mica

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APA (6th Edition):

Oliveira, A. R. D. (2016). Influ�ncia de compostos de origem natural em microrganismos de origem alimentar e cl�nica. (Thesis). RCAAP. Retrieved from https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/5804

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Chicago Manual of Style (16th Edition):

Oliveira, Adriana Raquel Duarte. “Influ�ncia de compostos de origem natural em microrganismos de origem alimentar e cl�nica.” 2016. Thesis, RCAAP. Accessed October 14, 2019. https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/5804.

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MLA Handbook (7th Edition):

Oliveira, Adriana Raquel Duarte. “Influ�ncia de compostos de origem natural em microrganismos de origem alimentar e cl�nica.” 2016. Web. 14 Oct 2019.

Vancouver:

Oliveira ARD. Influ�ncia de compostos de origem natural em microrganismos de origem alimentar e cl�nica. [Internet] [Thesis]. RCAAP; 2016. [cited 2019 Oct 14]. Available from: https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/5804.

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Council of Science Editors:

Oliveira ARD. Influ�ncia de compostos de origem natural em microrganismos de origem alimentar e cl�nica. [Thesis]. RCAAP; 2016. Available from: https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/5804

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3. Pais, Jo�o Pedro Vicente. Biosynthesis and isolation of STEAP1 protein from Escherichia coli cells lysates.

Degree: 2016, RCAAP

Prostate cancer is one of the most frequent cancers diagnosed in last years, around the world, and the most common in Europe, mainly in northern and western Europe, where affects more than 200 men in 100.000. In Portugal, the Urology National Association refers to this type of cancer as the most common in adult men but also refers that a precocious detection, increase the treatment success rate to 85%. It is the second cause of death by cancer, and is the most frequent in men over 50 years. The therapies used nowadays are inefficient and limited and do not provide the efficient treatment of this disease. So, new approaches must be assessed and new therapies must be developed to increase the rate of cure. In order to achieve this goal, new molecules arise with a potential role in prostate cancer pathogenesis. The six transmembrane epithelial antigen of the prostate 1 (STEAP1) was found overexpressed in cancer tissues, namely, in prostate cancer cases. The location of this proteins in cell membrane and the six transmembrane domains suggests a role in cell-cell communication, mediating the transport of ions and small molecules. Additionally, its overexpression in cancer cell lines, associated with its topology, makes this protein a promising therapeutic target for immunotherapy. Thus, structural and interaction studies are required, and to achieve that, large amount of highly purified proteins are required. Therefore, the main goal of this work is to develop a laboratorial platform for the STEAP1 protein biosynthesis, solubilization and purification. The obtained results showed that the use of SOB medium, with IPTG at 1.25 mM as inducer after 5h of fermentation and using DMSO at 1.5% (v/v) are the ideal conditions for the biosynthesis of recombinant STEAP1 protein, in small scale. Moreover, applying lactose as inducer may influence the compartmentalization of the target membrane protein and promote its solubility. Concerning the IMAC purification step, a nickel and a cobalt charged columns were used, with different imidazole concentrations in binding step, in order to promote the compete retention of the target biomolecule. Although, several host proteins from E.coli elute along the STEAP1 protein, being necessary additional optimizations in order to obtain a purified STEAP1 sample.

O cancro da pr�stata � um dos cancros mais frequentemente diagnosticado nos �ltimos anos em todo o mundo e o mais comum na Europa, principalmente na regi�o norte e ocidental, onde afeta mais de duzentos homens por 100.000. Em Portugal, a Associa��o Nacional de Urologia refere-se a este tipo de cancro como o mais comum em homens adultos, mas tamb�m refere que uma dete��o precoce incrementa a taxa de sucesso no tratamento poderia atingir 85%. � a segunda causa de morte por cancro e � mais frequente em homens com mais de cinquenta anos. As terapias usadas atualmente s�o ineficientes e limitadas e n�o permitem o correto tratamento eficaz desta doen�a. Assim, novas abordagens ter devem ser avaliadas e novas terapias devem ser desenvolvidas de…

Advisors/Committee Members: Baptista, Cl�udio Jorge Maia, Passarinha, Luis Ant�nio Paulino.

Subjects/Keywords: Bioss�ntese; Cancro da Pr�stata; Escherichia Coli; Imac.; Prote�nas Membranares; Steap1; Dom�nio/�rea Cient�fica::Engenharia e Tecnologia::Engenharia Qu�mica

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APA (6th Edition):

Pais, J. P. V. (2016). Biosynthesis and isolation of STEAP1 protein from Escherichia coli cells lysates. (Thesis). RCAAP. Retrieved from https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/5806

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Chicago Manual of Style (16th Edition):

Pais, Jo�o Pedro Vicente. “Biosynthesis and isolation of STEAP1 protein from Escherichia coli cells lysates.” 2016. Thesis, RCAAP. Accessed October 14, 2019. https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/5806.

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MLA Handbook (7th Edition):

Pais, Jo�o Pedro Vicente. “Biosynthesis and isolation of STEAP1 protein from Escherichia coli cells lysates.” 2016. Web. 14 Oct 2019.

Vancouver:

Pais JPV. Biosynthesis and isolation of STEAP1 protein from Escherichia coli cells lysates. [Internet] [Thesis]. RCAAP; 2016. [cited 2019 Oct 14]. Available from: https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/5806.

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Council of Science Editors:

Pais JPV. Biosynthesis and isolation of STEAP1 protein from Escherichia coli cells lysates. [Thesis]. RCAAP; 2016. Available from: https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/5806

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