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Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-07Bitstream added on 2014-08-13T18:01:12Z : No. of bitstreams: 1 000735368_20151001.pdf: 255424 bytes, checksum: 80f4b36d3292e89d01ab069df6f8c857 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-10-01T13:00:53Z: 000735368_20151001.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-01T13:01:37Z : No. of bitstreams: 1 000735368.pdf: 1530513 bytes, checksum: 5a441b8954592db5004cbab5c7437548 (MD5)

Neste estudo foi avaliada a cinética de expressão, a localização do EMMPRIN e a correlação de sua expressão com a expressão das MMPs -1, -2 e -9 e com a perda óssea alveolar, durante o desenvolvimento da lesão periapical experimentalmente induzida em camundongos. Foram utilizados 40 camundongos wild-type (WT) da linhagem C57BL/6. As lesões periapicais foram induzidas nos 1os molares inferiores e após os períodos experimentais de 7, 14, 21 e 42 dias, os animais foram mortos e as mandíbulas foram removidas. Como controles foram usados 1os molares hígidos. A mensuração das lesões periapicais foi efetuada em microtomografia computadorizada. A expressão do RNA mensageiro (mRNA) do EMMPRIN, MMPs -1, -2, e -9 foi determinada por meio de RT-PCR em tempo real. A presença, a localização e a expressão do EMMPRIN e das MMPs nas lesões periapicais foram avaliadas por imunohistoquímica. Os dados foram analisados por meio dos testes ANOVA, Bonferroni e correlação de Spearman com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram que a área da lesão periapical aumentou significativamente dos 7 para os 14 dias (83%) e a partir de então houve estabilização. No grupo controle, o EMMPRIN foi expresso fortemente nas células da camada odontoblástica da polpa dentária. Nos períodos de 7, 14, 21 e 42 dias, foram observadas imunomarcações intensas para o EMMPRIN, MMPs -1, -2 e -9 na região adjacente ao forame apical, onde havia infiltrado inflamatório denso e ocasionalmente em outras regiões da lesão periapical. O EMMPRIN, MMP-1, -2 e -9 apresentaram forte expressão em células inflamatórias mononucleares e polimorfonucleares e marcação discreta em fibroblastos. A imunoexpressão do EMMPRIN na região periapical foi maior nos períodos de 7, 14, 21 e 42 dias comparado ao controle. A expressão do gene EMMPRIN apresentou-se maior no grupo controle em relação aos 7, 14, 21 e 42 dias...

This study evaluated the kinetics of expression and location of EMMPRIN and the correlation of its expression with expression of MMPs -1, -2 and -9 and with alveolar bone loss during the development of experimentally induced periapical lesions in mice. A total of 40 C57BL/6 wild-type mice (WT) were used. The periapical lesions were induced in first lower molars. After 7, 14, 21 and 42 days, the animals were killed and the mandibles were removed. Mice without pulp exposure served as controls. Measurement of periapical lesions was performed in micro-computed tomography. mRNA levels of EMMPRIN, MMPs-1, -2, and -9 were detected by real time RT-PCR. Presence, localization, and expression of…

Advisors/Committee Members: Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faria, Gisele [UNESP].

▼ As Metaloproteinases de Matriz (MMPs) são enzimas proteolíticas conhecidas por seu papel crítico na metástase, apoptose, proliferação e angiogênese de tumores malignos. Particularmente, MMP2 e MMP9 foram correlacionadas com a invasão celular e progressão tumoral em vários tipos de câncer, como pulmão, mama, cervical e ovário. No entanto, dados sobre a influência das MMPs em tumores não sólidos ainda são escassos. A Leucemia mieloide aguda (LMA) é uma doença de caráter multifatorial e de grande heterogeneidade clínica e biológica; devido a isso existe uma busca crescente por marcadores que ajudem no refinamento do prognóstico dos pacientes. Nesse estudo, investigamos dois polimorfismos de base única no gene MMP em pacientes com LMA, associando estes achados às características laboratoriais, sobrevida global (SG), sobrevida livre de doença (SLD) e taxa de remissão completa (RC). 88 pacientes adultos diagnosticados com LMA foram incluídos em nosso estudo; destes todos foram genotipados para o polimorfismo MMP2 C>T (rs243865) e 85 foram genotipados para o polimorfismo MMP9 A>G (rs17576). As frequências observadas para o MMP2 foram: 67% C/C, 29,5% C/T e 3,4% T/T; para o MMP9 as frequências foram 37,5% A/A, 47,7% A/G e 11,4% G/G. O polimorfismo do gene MMP9 mostrou diferença estatística (p= 0,039) na sobrevida livre de doença quando comparamos pacientes heterozigotos A/G e homozigotos variantes G/G aos pacientes homozigotos selvagens A/A, indicando que esses pacientes tem pior prognóstico. Para o polimorfismo do gene MMP2, o alelo homozigoto selvagem C/C pode estar associado ao desenvolvimento da LMA em indivíduos mais jovens (p=0,030). Nas demais variáveis analisadas, os polimorfismos estudados não parecem ter relevância na LMA. Advisors/Committee Members: SILVA NETO, Jacinto da Costa (advisor), ARAUJO, Antonio Roberto Lucena de (advisor), http://lattes.cnpq.br/6131084470861010 (advisor), http://lattes.cnpq.br/9519574368895128 (advisor).

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Astrocitomas malignos (AM) têm evolução devastadora. Cirurgia para retirada supra total ou completa é central no tratamento. O uso transoperatório da fluoresceína serve para aumentar a ressecção, criando um tom amarelo na neoplasia diferente do cérebro normal. Quebra da barreira hematoencefálica pode ser a causa da permanência desse corante no tumor, e alguns marcadores de invasividade e neoangiogênese, como as Metaloproteinases 2 e 9 (MMP-2 e 9), podem influenciar na efetividade da fluoresceína, características radiológicas e grau tumoral. Neste ensaio clínico buscou-se entender características radiológicas, moleculares e de coramento da fluoresceína nas cirurgias de AM. O uso da fluoresceína foi randomizado e as amostras de tecidos foram retiradas em quatro momentos da cirurgia (acopladas a uma fotografia): após a durotomia, ao encontrar a pseudocápsula, na retirada do core e após ressecção. Análise radiológica e histológica duplo cega foi feita e avaliação visual da imunohistoquímica (IHQ) para MMP-2 e 9. O coramento por fluoresceína foi medido com ImageJ e escala visual. Grau de ressecção avaliado pela comparação das ressonâncias/tomografias. 73 pacientes foram incluídos, mas 31 ficaram para análise. O volume médio dos tumores foi 36,31 cm e a média de necrose foi de 36,25%. 16 tumores eram em área eloquente/próxima. Houve 22 casos de AM de alto e baixo graus, 2 casos de metástase, 2 malignos inconclusivos (MI) 6 de gliose/benigno ou tecido normal e 1 astrocitoma grau I. 17 das 21 amostras da substância branca edemaciada, retiradas após o tumor, eram de AM, incluindo 8 graus IV. IHQ para MMP-2 e 9 nas áreas A1 (n=11) apresentaram na maioria intensidade fraca ou nula, com forte ou moderada quando as histologias foram graus III e MI. Nas lâminas com tumor grau IV (n=16) predominou o coramento forte para MMP-2 e fraco ou nulo para MMP-9. O gadolínio foi mais forte na área de pseudocápsula e a fluoresceína na pseudocápsula e core. Houve correlação entre o contraste na RM e o coramento pela fluoresceína, que também correspondeu às áreas de maior atividade das MMPs-2 e 9 e ao maior grau de malignidade. Um aplicativo de imagem pode complementar a utilidade da Fluoresceína.

Malignant astrocitomas (MA) have devastating evolution. Supra total or complete removal is key in the treatment. Transoperative fluorescein is used to increase degree of removal, creating in the tumour a different intensity of yellow from normal brain. Disruption of blood-brain barrier is believed to be the cause of the stain permanence in the tumour, and some markers of invasiveness and neoangiogenesis, such as MMP-2 and MMP-9, may be implicated in the effectiveness of fluorescein and in lesions aggressiveness radiologic features. In this trial, an effort was made to understand radiologic, molecular characteristics of MA and fluorescein behaviour during surgeries. Fluorescein use was randomized and tissue samples were collected in four surgery times (connected to a Picture): after durotomy, when dissected pseudocapsule, during core removal and…

Advisors/Committee Members: http://lattes.cnpq.br/6131084470861010, SILVA NETO, Jacinto da Costa, FREITAS, Manuela Figueiroa Lyra de.

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Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-25Bitstream added on 2015-04-09T12:48:09Z : No. of bitstreams: 1 000814074.pdf: 683274 bytes, checksum: 7aed95862bef3ef98072762605457374 (MD5)

A doxorrubicina é um quimioterápico bastante utilizado em pacientes oncológicos e sua cardiotoxicidade está relacionada com vários mecanismos celulares, incluindo necrose e apoptose. Estudos têm aventado a participação das metaloproteinases da matriz e seus inibidores na cardiotoxicidade induzida pela doxorrubicina. Assim, esta pesquisa teve como objetivo avaliar as atividades plasmática e miocárdica das metaloproteinases da matriz 2 e 9 em coelhos com cardiomiopatia por doxorrubicina, correlacionando-as com o remodelamento cardíaco que acompanha tal enfermidade. Os animais foram divididos em dois grupos: controle (n=10) e doxorrubicina (n=15). As atividades plasmática e miocárdica foram analisadas através do método de zimografia. Foram evidenciadas apenas as formas inativas das MMPs (pro-MMP) nas amostras sanguíneas analisadas. A pro-MMP-2 foi documentada no plasma dos animais controle e daqueles com cardiomiopatia por doxorrubicina em todos os momentos de avaliação. Já a pro-MMP-9 foi encontrada em algumas amostras dos grupos controle e enfermo, principalmente nos momentos de valiação T30 e T45, porém em fraca marcação. Houve diferença significativa na atividade das pro-MMPs-2 e 9 ao longo dos tempos de estudo. Os testes de correlação entre as pro-MMPs plasmática e os parâmetros ecocardiográficos evidenciaram resultados significativos. Em T0 verificou-se correlação entre A’lat e pro-MMP-2; em T15 documentaram-se correlações entre a pro-MMP-2 e os parâmetros PPE e TEI; já em T30 constatou-se correlação entre pro-MMP-9 e PLVE%; em T45, finalmente, foram observadas correlações entre pro-MMP-2 e os parâmetros DIVEs, DIVEd, SIVs e Emitral/E’sep, assim como entre pro-MMP-9 e TEVE. No miocárdio evidenciou-se apenas a pro-MMP-2. A atividade plasmática das MMPs, em especial a pro-MMP 2, pôde ser relacionada às alterações morfofuncionais da cardiomiopatia induzida, sendo que não houve correlação ...

Doxorubicin is a chemotherapy agent frequently used in oncology patients. Its cardiotoxicity is related to several cellular mechanisms, including necrosis and apoptosis. Some studies have ascribed a role to matrix metalloproteinases and their inhibitors in the cardiotoxicity induced by doxorubicin. Therefore, this research was aimed at evaluating the plasma and myocardial activities of matrix metalloproteinases 2 and 9 in rabbits with doxorubicin-induced cardiomyopathy, searching for a correlation between them and the cardiac remodeling attributable to such disease. The animals were assigned into two groups: control (n=10) and doxorubicin (n=15). The plasmatic and myocardial activities were analyzed through the method of zymography. Only the inactive MMPs (pro-MMP) have been identified in the blood samples. The plasma pro-MMP-2 was documented in both control and doxurubicin…

Advisors/Committee Members: Universidade Estadual Paulista (UNESP), Sousa, Marlos Gonçalves [UNESP].

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Made available in DSpace on 2016-04-01T17:54:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-11-06. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:00:44Z : No. of bitstreams: 1 000860307.pdf: 2478279 bytes, checksum: 671696c5fa16ba127a3f46167c9360a0 (MD5)

A ovinocultura de corte está em constante ascensão no Brasil e tal fato leva ao aumento do número de animais confinados, visando maior ganho de peso em curto período de tempo. Tal situação predispõe os ovinos a desordens como acidose láctica ruminal aguda (ALRA) e, consequentemente, laminite aguda, as quais geram problemas econômicos pelos custos do tratamento, menor produtividade do rebanho e descarte de animais. Dez ovelhas adultas foram induzidas à ALRA através da administração oral de sacarose; posteriormente foram avaliadas quando ao exame físico além das análises hemogasométricas arteriais, hematológicas, avaliação da glicose e lactato plasmáticos, proteinograma sérico e zimografia para detecção das metaloproteinases 2 e 9. Todos os animais tiveram sinais clínicos de ALRA, a frequência respiratória permaneceu elevada até às 36 horas, retornando à normalidade com 48 horas. Cinco animais apresentam sinais clínicos característicos de laminite aguda, porém não foi necessária a realização de tratamento clínico. Os valores da contagem de hemácias, volume globular, hemoglobina, leucócitos totais e neutrófilos bastonetes e segmentados elevaram-se nas 24 horas. Os teores de glicose aumentaram até as 8 horas pelo aumento da síntese dos ácidos graxos voláteis e posterior absorção sanguínea; o lactato apresentou aumento até as 24 horas, com posterior diminuição dos valores. A partir de 4 horas ocorreu elevação do pH, bicarbonato e excesso de base. Após 12 horas, os animais apresentaram acidose metabólica. Com 28 horas houve normalização dos parâmetros hemogasimétricos, sem necessidade de tratamento. No proteinograma sérico foram identificadas 13 proteínas: imunoglobulinas A (IgA) e G (IgG), ceruloplasmina (Cp), transferrina (Tf), albumina (Ab), 1-antitripsina ( 1AT), haptoglobina (Hp), 1-glicoproteína ácida ( 1GA), 95 (PPM95), 46 (PPM46), 36 (PPM36) e 31 (PMM31) kDa proteínas de...

The sheep meet industry is constantly rising in Brazil and this fact leads to an increase on the number of confined animals, looking for greater weight gain in short period of time. This situation predisposes to disorders such as acute lactic ruminal acidosis (ARLA) and, consequently, acute laminitis, which causes economic problems by the treatment costs, reduced productivity and disposal of animals. Ten adult sheep were induced to ALRA by oral administration of sucrose; were further evaluated to physical examination, arterial blood gas analysis, hematological parameters, glucose and lactate plasma, serum protein profile and zymography for detection of metalloproteinases 2 and 9. All animals had clinical signs of ARLA, the respiratory rate remained high up to 36 hours, returning to normal in 48 hours. Five animals showed typical clinical signs of acute laminitis, however clinical…

Advisors/Committee Members: Universidade Estadual Paulista (UNESP), Marques, Luiz Carlos [UNESP].

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Submitted by denise santos ([email protected]) on 2012-11-01T14:12:20Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_fnnfurtado.pdf: 3539375 bytes, checksum: 6fa044d4558e54c9cf489e3b99de3a10 (MD5)

Approved for entry into archive by Erika Fernandes([email protected]) on 2012-11-06T13:53:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_fnnfurtado.pdf: 3539375 bytes, checksum: 6fa044d4558e54c9cf489e3b99de3a10 (MD5)

Made available in DSpace on 2012-11-06T13:53:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_fnnfurtado.pdf: 3539375 bytes, checksum: 6fa044d4558e54c9cf489e3b99de3a10 (MD5) Previous issue date: 2012

The colorectal cancer (RCC) is highly prevalent in richer and industrialized countries. The matrix metalloproteinases (MMPs) are regarded as important for facilitating tumor invasion and spread in various cancers, including colorectal. Tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs) are the major physiological inhibitors of MMPs. The expression of metalloproteinase-2 (MMP-2), metalloproteinase 14 (MMP-14) and tissue inhibitor of metalloproteinases-2 ( TIMP-2) in colorectal cancer was assessed. CD68 immunostaininig was utilized to the characterization of mononuclear cells nature. Paraffin-embedded tissues from patients undergoing colectomy for colorectal cancer in the period 2004 to 2010, were selected from the files of the Department of Pathology and Forensic Medicine (DPML), Medical School , Federal University of Ceará (UFC). Tissue microarrays were performed and slides were obtained for immunohistochemical detection of the expression of MMP-2, MMP-14 and TIMP-2 and the tissue samples analyzed. The following scores were applied: 0 = no immunostaining or rare labeled cells (<5%), 1 = slight marking the majority (> 50%) of tumor cells or stromal mononuclear cells, or moderate marking in a minority of cells (<50%) 2 = moderate labeling in the majority (> 50%) of tumor or mononuclear cells or intense marking in the minority of cells (<50%) and 3 = intense labeling in the majority (> 50%) of tumor cells or mononuclear cells. In this study, the relationship between increased expression of MMP-14 in mononuclear primary tumor cells and cases without lymph node metastases (MMP-14, 2 and 3/N0 scores: 23/26 = 88%; N1-N3: 14/21 = 67%, p = 0.0353) was stablished . However, no significant relationship was found between the immunohistochemical expression of MMP-14, MMP-2 and TIMP-2 in primary tumors in cancer cells and mononuclear cells and other clinico-pathological parameters. The expression of MMP-2 were negative in the neoplastic cells both in primary tumors (47/47 = 100%) and in metastatic ones (12/12 = 100%). The immunoreactivity of MMP-14 in neoplastic cells in primary tumors was positive (50/50 = 100%) and in all cases except one of metastatic carcinoma (7/8 = 88%). In mononuclear cells, most of them characterized as macrophages (CD68 stained), MMP-14 positive expression also predominated markedly, both in primary tumors (46/47 = 98%) and in metastatic carcinomas (9/10 = 90%). TIMP-2 expression in neoplastic cells of…

Advisors/Committee Members: Almeida, Paulo Roberto Carvalho de.

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ARAÚJO, Antônio Roberto Lucena de, também é conhecido em citações bibliográficas por: LUCENA-ARAUJO, Antonio Roberto.

CAPES

Neoplasias mieloproliferativas (NMP) cromossomo Filadelfia (Ph) negativo englobam principalmente Policitemia Vera (PV), Trombocitemia Essencial (TE) e Mielofibrose (MF). Estas são malignidades hematológicas que surgem da proliferação clonal de células tronco neoplásicas na medula óssea e que compartilham de características fisiopatológicas e clínicas comuns. As metaloproteinases de matriz, por sua vez, são enzimas proteolíticas capazes de remodelar a matriz extracelular (MEC) ativando citocinas e fatores de crescimento que atuam em vias de sinalização tanto na homeostase como na carcinogênese. Com o objetivo de avaliar o papel das metaloproteinases nas NMP, foram investigados dois polimorfismos de base única nos genes MMP2 e MMP9 e suas possíveis associações com as características clínicas das doenças. O estudo foi do tipo análise exploratória. Foram analisados 293 pacientes, sendo 75 de PV, 165 de TE e 53 de MF. As genotipagens dos polimorfismos rs243865(C>T) e rs17576(A>G) foram realizadas por meio da técnica de PCR em tempo real utilizando sondas TaqMan. Empregando-se o modelo genético de herança dominante, nos homozigotos ancestrais (CC), foram encontradas associações significantes do polimorfismo rs243865, do gene MMP2, com maior frequência de sangria (p=0,041) em pacientes de PV e com hiperplaquetose (p=0,012) em pacientes de TE. O polimorfismo rs17576, do gene MMP9, tambémse mostrou associado a achados clínicos relevantes como prurido (p=0,002) em PV e a maior frequência de necessidade transfusional (p=0,019) em pacientes de MF, ambos para o genótipo AG, utilizando-se do modelo codominante. Nossos resultados revelaram associações significativas entre polimorfismos nos genes MMP2 e MMP9 com manifestações clínicas de pacientes com NMP podendo ser uma ferramenta útil no manejo destes pacientes.

Philadelphia (Ph) negative myeloproliferative neoplasms (MPN) mainly comprise Polycythemia Vera (PV), Essential Thrombocythemia (TE) and Myelofibrosis (MF). These are haematological malignancies that arise from the clonal proliferation of neoplastic stem cells in the bone marrow and share common pathophysiological and clinical features. Matrix metalloproteinases, in turn, are proteolytic enzymes capable of remodeling extracellular matrix (ECM) activating cytokines and growth factors that act on signaling pathways in both homeostasis and carcinogenesis. In order to evaluate the role of metalloproteinases in MPN, two single base polymorphisms in the MMP2 and MMP9 genes and their possible associations with the clinical characteristics of the diseases were investigated. The study was exploratory analysis. There were analyzed 293 patients, 75 from PV, 165 from TE and 53 from MF. Genotyping of the rs243865(C>T) and rs17576 (A>G) polymorphisms was performed by real-time PCR using TaqMan probes. Using the dominant inheritance genetic model in ancestral homozygotes (CC), significant associations of…

Advisors/Committee Members: http://lattes.cnpq.br/6131084470861010, http://lattes.cnpq.br/9519574368895128, SILVA NETO, Jacinto da Costa, ARAÚJO, Antônio Roberto Lucena de.

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Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-20Bitstream added on 2015-04-09T12:47:47Z : No. of bitstreams: 1 000814346.pdf: 1337951 bytes, checksum: 9ed960afb83960e3296a726e4541f251 (MD5)

A literatura cita que 1 a 5% dos casos de tumor venéreo transmissível (TVT) primário são metastáticos. Sendo assim, é importante estudar os mecanismos que colaborem para a invasão metastática assim como para sua implantação. Dentre estes mecanismos as metaloproteinases (MMP-2 e MMP-9) e seus inibidores (TIMP-1 e TIMP-2), assim como o ATM, COX-2, VEGF e CDH-1 podem explicar a implantação tumoral no sítio primário e a ocorrência da invasão metastática do TVT no cão. O objetivo do presente trabalho é avaliar a expressão gênica dos marcadores acima e correlacionar a sua expressão com o poder de implantação e invasão metastática no TVT. Para este estudo foram avaliadas 32 amostras tumorais, que foram congeladas e delas extraídos RNAm. Utilizou-se o método de qRT-PCR para todos os transcritos. Os resultados foram comparados com sangue periférico de 10 cães saudáveis (grupo controle) com o teste de Mann Whitney. A expressão gênica de MMP-2 e TIMP-1 foi significativamente maior do que o grupo controle (p < 0,001; p = 0,037; respetivamente). A expressão dos transcritos dos genes MMP-9 e TIMP-2 não apresentou diferença estatística entre o TVT e grupo controle (p = 0,535; p = 0, 906; respetivamente). A avaliação de expressão de transcritos do ATMapresentou aumento significativo (p < 0,0001) de sua expressão no tecido tumoral (TVT) quando comparado com o grupo controle, enquanto a expressão dos transcritos do gene TP53 não apresentou diferença estatística entre os grupos (p = 0,26). Na avaliação da COX-2, VEGF, CDH-1 foi verificado aumento significativo (p < 0,0001; p < 0,0001; p = 0,04, respectivamente) da expressão de transcritos dos genes no tecido tumoral (TVT) em relação ao grupo controle. A super-expressão de MMP-2 e o TIMP-1 pode explicar a capacidade de implantação das células tumorais assim como a maior expressão de VEGF e COX-2 pode explicar o crescimento rápido local do tumor e ...

The literature reports that 1-5% of cases of primary trasmissible venereal tumor (TVT) are metastatic. Thus, it is interesting to study the mechanisms that collaborate to the metastatic invasion and implantation of TVT. Among these mechanisms, the metalloproetinases (MMP-2 and MMP-9) and their inhibitors (TIMP-1 and TIMP-2), as well as ATM, COX-2, VEGF and CDH-1 may explain the tumoral implantation in the primary site and metastatic invasion of TVT in dogs. The objectives of this study are to evaluate the gene expression of these markers and to correlate their expression with the high ability of deployment and metastatic invasion of TVT. For this study, 32 tumor samples were frozen and their mRNA were extract using the qRT-PCR method for all transcripts. The results were compared with peripheral blood of 10 healthy dogs (control group) using the Mann Whitney test. The expression of MMP-2…

Advisors/Committee Members: Universidade Estadual Paulista (UNESP), Amorim, Renée Laufer [UNESP], Nardi, Andrigo Barboza De [UNESP], Costa, Mirela Tinucci [UNESP].

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Submitted by CAROL CRISTINA VAGULA DE ALMEIDA SILVA ([email protected]) on 2020-02-14T13:35:57Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Carol - Versão final repositório.pdf: 1227617 bytes, checksum: 7bee1715f785aaf33693cf2fe57e26a8 (MD5) Dissertação Carol - Versão final repositório.pdf: 1227617 bytes, checksum: 7bee1715f785aaf33693cf2fe57e26a8 (MD5)

Approved for entry into archive by ROSEMEIRE APARECIDA VICENTE null ([email protected]) on 2020-02-14T20:18:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_ccva_me_bot.pdf: 1227617 bytes, checksum: 7bee1715f785aaf33693cf2fe57e26a8 (MD5)

Made available in DSpace on 2020-02-14T20:18:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_ccva_me_bot.pdf: 1227617 bytes, checksum: 7bee1715f785aaf33693cf2fe57e26a8 (MD5) Previous issue date: 2019-12-17

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

A obesidade é uma doença metabóliconutricional comum em países industrializados, com impacto financeiro na saúde pública. A interface entre hiperadiposidade e inflamação é bem conhecida. Evidências mostram que mediadores inflamatórios e metaloproteinase-2 estão relacionados ao remodelamento cardíaco. Várias estratégias terapêuticas têm sido testadas, como o uso de compostos bioativos. Nenhum estudo abordou o efeito do licopeno sobre o remodelamento cardíaco induzido associado a obesidade. Objetivo: O objetivo geral do presente estudo foi verificar o efeito da suplementação com licopeno sobre o remodelamento cardíaco em ratos com obesidade induzida por dieta hipercalórica com alto teor de carboidrato. Metodologia: Ratos Wistar machos, 200g (n=40), foram randomizados em dois grupos com diferentes tratamentos dietéticos ad libitum: dieta padrão (C, n=20) ou dieta obesogênica (CHO, n=20) por 20 semanas.O grupo C recebeu dieta padrão + água. Com o objetivo de induzir obesida-de1, o grupo CHO recebeu dieta com alto teor de carboidrato simples e gordura + água acrescida de sacarose 25% (total de carboidratos: 78%, total de gordura: 16,54%). Após a 20ª semana, foi iniciada a suplementação com licopeno (10mg/kg de peso/dia) ou veículo (óleo de milho) por 10 semanas via gavage. Assim, após a 20ª semana, os grupos foram subdivididos da seguinte maneira: grupo Controle (C, n=10); Controle+licopeno (C + Ly, n=10); Carboidrato (CHO, n=10) e Carboidrato+licopeno (CHO + Ly, n=10). Na 20ª e 30ª semana, os animais foram submetidos à aferição da pressão arterial sistólica (PAS) e avaliação ecocardiográfica morfológica e funcional. Ao final do experimento (30ª semana), os animais foram eutanasiados sob profunda anestesia (tiopental 120 mg/kg de m.c. via IP) e decaptados para obtenção de amostras de sangue e de coração. Foram estudados também: índice de adiposidade; ingestão calórica, ingestão total de ração, ingestão de líquidos, ganho de peso, eficiência alimentar, resistência à insulina, marcadores bioquímicos, citocinas inflamatórias no coração e no tecido adiposo, atividade de metaloproteinase-2, biodisponibilidade do licopeno no coração, avaliação ecocardiográfica. Resultados: Na 20ª…

Advisors/Committee Members: Universidade Estadual Paulista (UNESP), Ferreira, Ana Lúcia dos Anjos [UNESP].

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Orientadores: Heitor Moreno Junior, Vanessa Fontana

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2018-08-31T09:59:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sabbatini_AndreaRodrigues_D.pdf: 2130679 bytes, checksum: 3035591887a6fe4083965e3300f6a3f6 (MD5) Previous issue date: 2016

Resumo: Introdução: A falta de controle da pressão arterial (PA) (? 140/90 mmHg) - mesmo com o uso de três ou mais anti-hipertensivos de diferentes classes - define o grupo de hipertensos resistentes (HAR), um grupo com alto risco cardiovascular (CV) e alta incidência de lesões de órgãos-alvo (LOA). Estudos sugerem o envolvimento da metaloproteinase 2 (MMP-2) na hipertensão e no remodelamento CV associado a LOA. A hipertensão é uma condição multifatorial na qual fatores genéticos podem ter uma grande contribuição para o desenvolvimento da doença. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) da MMP-2 foram associados a alterações cardiovasculares, contudo poucos estudos avaliaram o impacto dos polimorfismos da MMP-2 em condições clínicas e sua influência na HAR. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar os níveis de MMP-2 e de seu inibidor TIMP-2 (tissue inhibitor of metalloproteinase-2) nos grupos de pacientes hipertensos leve-moderados (LM) e pacientes hipertensos resistentes (HAR), assim como analisar a associação das MMP-2 e TIMP-2 com lesões de órgão alvo como rigidez arterial e hipertrofia cardíaca. Também avaliamos a frequência dos SNPs da MMP-2 (-1575G/A, rs243866; -1306C/T, rs243865; e -735C/T, rs2285053) nesses grupos e analisamos a associação destes três polimorfismos no grupo com HAR. Por fim, identificamos quais polimorfismos da MMP-2 podem estar relacionados à rigidez arterial e à hipertrofia cardíaca na população com HAR. Métodos: Cento e dezenove pacientes HAR e cento e trinta e seis hipertensos LM foram incluídos e submetidos a análises clínicas e laboratoriais. Os genótipos foram determinados por meio do teste de discriminação alélica utilizando técnica de real time polymerase chain reaction (RT-PCR). Características clínicas e laboratoriais foram comparadas de acordo com os genótipos / haplótipos dos SNPs (rs243865, rs243866 e rs2285053). As lesões de ógão-alvo cardíaca e vascular foram categorizadas respectivamente pelo Índice de Massa Ventricular Esquerda (IMVE) (mulheres>95g/m2 e os homens>115g/m2) e rigidez arterial (VOP>10m/s). Resultados: Não foram observadas diferenças estatísticas nos níveis de MMP-2 entre os grupos NT, LM e HAR. Por outro lado, níveis aumentados de TIMP-2 foram detectados no grupo HAR quando comparados com os grupos LM e NT (90,0 (76,1-107,3) vs. 70,1 (57,7-88,3) vs. 54,7 (40,9-58,1) ng/ml, p <0,01) , respectivamente. Além disso, a razão MMP-2 /TIMP-2 mostrou-se diminuída no grupo de HAR comparada com LM e NT (2,7 (1,9-3,4) vs. 3,3 (2,6-4,2) vs. 4,9 (4,5-5,3), p <0,01) , respectivamente. Não foram encontradas associações entre rigidez arterial e hipertrofia cardíaca com os níveis de MMP-2 e TIMP-2, nem com a razão MMP-2 / TIMP-2 em…

Advisors/Committee Members: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Moreno Junior, Heitor, 1958-, Lacchini, Riccardo, Anhê, Gabriel Forato, Sonati, Maria de Fátima, Irigoyen, Maria Claudia Costa.

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Introdução: O Carcinoma Urotelial de Bexiga (CUB) é o segundo tumor urológico mais prevalente no Brasil. Devido ao elevado custo médico no processo que envolve seu diagnóstico, tratamento e seguimento, o CUB é um dos tipos de tumores mais caros para os sistemas de saúde. Embora existam fatores prognósticos definidos, como o estadiamento patológico, a diferenciação histológica e a presença de invasão angiolinfática (IAL), os mesmos demonstram-se insuficientes para uma acurada definição de comportamento da doença. Com a evolução da pesquisa molecular um grande número de potenciais novos marcadores de agressividade tem surgido. As Metaloproteinases da matriz (MMP) sao proteínas teciduais, pertencentes à família das endoproteinases, que degradam vários componentes da matriz extracelular. A expressão de diversas MMPs, especialmente MMP-2 e MMP-9 (gelatinases), bem como seus ativadores e inibidores, tem sido estudada como potencial marcador de comportamento tumoral em várias neoplasias. Objetivos: Avaliarmos os níveis de expressão dos genes das gelatinases MMP-2 e MMP-9 no CUB, assim como proteínas envolvidas em suas vias de ativação e inibição (MMP-14, IL-8, TIMP-1, TIMP-2, RECK e TGF-! ). Material e Método: Estudamos pela técnica de qRT-PCR a expressão dos 8 genes em amostras de CUB de 40 pacientes submetidos a RTUb, tendo como grupo controle amostras de urotélio sem câncer de 6 pacientes submetidos a prostatectomia aberta por HPB, bem como sua relação com marcadores prognósticos clássicos (estádio, grau e IAL). Resultados: Houve uma superexpressão de MMP-9 na maioria das amostras de CUB, bem como subexpressão de MMP-2, TIMP-1, TIMP-2, MMP-14, IL-8, TGF-! e RECK. Comparando os níveis de expressão dos genes com o estádio patológico, houve uma superexpressão de MMP-9 nos tumores pT1-2, quando comparados com pTa (p=0,026), bem como maior expressão de IL-8 nos tumores pT1 e pT2 (p=0,015 e p=0,048, respectivamente). Embora estatisticamente nao significativa, houve uma superexpressão de MMP-14 nos tumores pT2, quando comparados aos demais (p=0,087). Com relação ao grau histológico, também identificamos superexpressão de MMP-9 nos tumores de alto grau, quando comparados aos de baixo grau (p=0,012), assim como maior expressão de IL-8 nos tumores de alto grau (p=0,003). Conclusão: Houve uma superexpressão de MMP-9 e uma subexpressão de MMP-2, TIMP-1, TIMP-2, MMP-14, RECK, IL-8 e TGF-! no CUB, quando comparado com o grupo controle. Também identificamos uma superexpressão de MMP-9 e IL-8 em tumores pT1-2 quando comparados com pTa e de alto grau quando comparados com baixo grau. A subexpressão dos principais inibidores da MMP-9 (TIMP-1 e RECK) pode explicar sua superexpressão no CUB, assim como a superexpressão de IL-8 nos tumores invasivos e de alto grau pode agir como fator ativador da MMP-9 nestes mesmos tumores

Introduction: Bladder cancer (BC) is the second most common urological tumor in Brazil. Because its high cost on diagnosis, treatment and follow-up, BC is one of the most expensive malignancies for health care…

Advisors/Committee Members: Marcos Francisco Dall\'Oglio, Edevard José de Araújo, Gilka Jorge Figaro Gattas, Luiz Carlos Neves de Oliveira, Brasil Silva Neto.

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Os tumores hipofisários mesmo sendo, em sua maioria, benignos, podem apresentar comportamento invasivo, com extensão para seio cavernoso, seio esfenoidal e clivo. As metaloproteinases de matriz tipo 2 (MMP-2) e 9 (MMP-9) e o inibidor tecidual de metaloproteinases-2 (TIMP-2) têm sido estudados em relação ao comportamento invasivo desses tumores, em especial quanto à invasão do seio cavernoso. Esse estudo teve como objetivo avaliar a expressão proteica das MMP-2, MMP-9 e do TIMP-2 nos tumores hipofisários e sua relação com invasão do seio cavernoso e, de maneira inédita, investigar a expressão dessas proteínas em nível plasmático. Adicionalmente, foram avaliadas a expressão dos RNAs mensageiros (RNAm) das MMP-2 e TIMP-2 com intuito de correlacioná-las com a expressão proteica no tecido tumoral, bem como a expressão do marcador de proliferação Ki67. Foram selecionados 77 casos, todos com amostras de tumor emblocado em parafina para análise imuno-histoquímica (IHQ). Destes, foram coletadas amostras de tumor fresco em 29 pacientes e de sangue periférico pré-operatório em outros 29 casos. A expressão proteica plasmática foi detectada de forma semi-quantitativa utilizando um arranjo de anticorpos em membrana comercial. A expressão dos RNAm das MMP-2 e TIMP-2 foi avaliada por reação em cadeia da polimerase quantitativo (qPCR) em tempo real. Do total de casos, 20 pacientes apresentavam tumores com invasão para o seio cavernoso. A expressão proteica tumoral das MMP-2, MMP-9 e TIMP-2 apresentou-se aumentada no grupo invasivo, contudo esta diferença não foi estatisticamente significante em relação ao grupo não- invasivo. A expressão plasmática das MMP-9 e TIMP-2 também não mostrou diferença entre os dois grupos e não se correlacionou com a expressão tumoral. A expressão plasmática da MMP-2 não foi detectada em nenhum caso. Quanto à expressão do RNAm das MMP-2 e TIMP-2, também não houve diferença significante entre os grupos e nem correlação com a expressão proteica tecidual ou plasmática. Foi observada uma diferença significante na dimensão tumoral [3.6 (2.5-5.2) x 2.0 (1.3-2.7); P < 0.001] e no índice do Ki67 [1.05 (0.27-25) x 0.5 (0.2-1.0); P < 0.001] entre os grupos invasivo e não-invasivo respectivamente. Em conclusão, em nossa coorte, não foi encontrada relação entre a expressão tecidual e plasmática das MMP-2, MMP-9 e TIMP-2 e a invasão para o seio cavernoso nos adenomas hipofisários

Pituitary tumors, although mostly benign, may present invasive behavior, with extension to the cavernous sinus, sphenoid sinus and clivus. Type 2 (MMP-2) and type 9 (MMP-9) matrix metalloproteinases and the metalloproteinase tissue inhibitor type 2 (TIMP-2) have been studied in relation to the invasive behavior of these tumors, especially regarding invasion of the cavernous sinus. The aim of this study was to evaluate the protein expression of MMP-2, MMP-9 and TIMP-2 in pituitary tumors and its relation with invasion of the cavernous sinus and, in an unprecedented way, to investigate the expression of these proteins at the plasma…

Advisors/Committee Members: Marcello Delano Bronstein, Júlio Zaki Abucham Filho, Nina Rosa de Castro Musolino.

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The increased expression of matrix metalloproteinases (MMPs) is considered to be a key factor in the development of COPD. We performed this study to quantify the expression of MMP-2 and MMP-9 in saliva of COPD patients and healthy controls, and to evaluate feasibility of saliva compounds as a biological material source for the study of biomarkers in COPD. Methods: COPD patients (n=16) and healthy controls (n=9) were selected. In the both group spirometry test was performed and saliva samples were obtained from each subject. The saliva levels of MMP-2 and MMP-9 were determined by Western Blot. Results: MMP-2 and MMP-9 were significantly higher in COPD patients than in control subjects. MMP-2 concentration was correlated negatively with forced expiatory volume in one second (FEV1) (r= -0,582; p= 0,014) in COPD patients. Conclusion: The current findings open new perspectives to study specific biomarkers in saliva to predict and monitor airway obstruction in COPD patients

O aumento da expressão das metaloproteinases da matriz (MMPs) é considerado um importante fator no desenvolvimento da DPOC. Nós realizamos este estudo para quantificar a expressão da MMP-2 e MMP-9 na saliva de pacientes com DPOC e indivíduos saudáveis, e para avaliar a viabilidade dos componentes da saliva como fonte de material biológico para o estudo de biomarcadores em DPOC. Métodos: Foram selecionados pacientes com DPOC (n=16) e controles saudáveis (n=9). Em ambos os grupos foram realizados teste espirométrico e obtidas amostras de saliva de cada indivíduo. Os níveis de MMP-2 e MMP-9 na saliva foram determinados por Western Blot. Resultados: A MMP-2 e a MMP-9 foram significativamente maiores em pacientes com DPOC do que no grupo de indivíduos saudáveis. A concentração de MMP-2 foi correlacionada negativamente com o volume expiratório forçado no primeiro segundo (VEF1) (r= -0,582, p= 0,014) em pacientes com DPOC. Conclusão: Os atuais achados abrem novas perspectivas para o estudo específico de biomarcadores na saliva para predizer e monitorar a obstrução ao fluxo aéreo em pacientes com DPOC

Advisors/Committee Members: Raquel Agnelli Mesquita Ferrari, Carlos Alberto Silva, Fernanda Pontako.

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Orientador: José Eduardo Tanus dos Santos

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2018-08-21T14:39:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_FlaviaMagazoni_D.pdf: 13094273 bytes, checksum: b37b538d1e8c37ba2a2ec5c8c99a5a30 (MD5) Previous issue date: 2012

Resumo: A migrânea é uma cefaleia primária comum e altamente incapacitante que atinge cerca de 10% da população mundial, especialmente as mulheres. Apesar dos esforços, a fisiopatologia da migrânea não está completamente elucidada. No entanto, acredita-se que as metaloproteinases da matriz (MMPs) estejam envolvidas no rompimento da barreira-hematoencefálica durante uma crise de migrânea. O objetivo do presente trabalho é avaliar se polimorfismos funcionais nos genes da MMP-2 (C-1306T e C-735T) e da MMP-9 (C-1562T, -90(CA)n e R(279)Q) e haplótipos estão associados com a migrânea e se eles podem modificar os níveis circulantes de MMPs na migrânea. Para avaliar o efeito de polimorfismos da MMP-9, foram estudadas 102 mulheres sem migrânea (grupo controle) e 187 mulheres com migrânea (141 com migrânea sem aura; MSA e 46 com migrânea com aura; MA). As genotipagens para os polimorfismos C-1562T, -90(CA)n e R(279)Q da MMP-9 foram realizadas por PCR-RFLP, PCR convencional seguida de eletroforese em gel de poliacrilamida e PCR em Tempo Real, utilizando-se o sistema Taqman® para discriminação de alelo, respectivamente. As concentrações plasmáticas de MMP-9 e TIMP-1 foram determinadas por ELISA. Os genótipos para os polimorfismos da MMP-2 foram determinados por PCR em Tempo Real, utilizando-se o sistema Taqman® para discriminação de alelo em 148 mulheres sem migrânea e em 204 mulheres com migrânea (153 MSA e 51 MA). As concentrações plasmáticas da MMP-2 e do TIMP-2 foram avaliadas, respectivamente, por zimografia e por ELISA. Os haplótipos foram inferidos utilizando o programa PHASE. Este estudo é o primeiro a mostrar que polimorfismos funcionais e haplótipos nos genes da MMP-2 e da MMP-9 podem afetar os níveis circulantes das MMPs em pacientes com migrânea. Enquanto o haplótipo H6 (CLQ) da MMP-9 foi associado aos maiores níveis plasmáticos de MMP-9 nas pacientes com migrânea (359,8±69,53ng/ml versus 195,8±9,70ng/ml para o CLR; 201,5±18,67ng/ml para o CHR e 200,2±17,02ng/ml para o CHQ), as maiores concentrações de MMP-2 foram encontradas nas pacientes com migrânea com aura com o genótipo CC para o polimorfismo C-735T (1,29±0,07U.A. versus 0,96±0,06U.A. para os genótipos CT ou TT) e com o haplótipo H1 (CC) (1,24±0,05U.A. versus 0,94±0,05U.A. para o haplótipo CT) no gene da MMP-2. Apesar de não investigarmos os mecanismos moleculares que explicam esses resultados, podemos sugerir que o aumento dos níveis das MMPs associados a genótipos e haplótipos específicos podem predispor essas pacientes a um aumento da permeabilidade vascular da barreira hematoencefálica, promovendo assim o desenvolvimento de um ambiente neuroinflamatório no sistema nervoso central, contribuindo para uma crise de…

Advisors/Committee Members: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Santos, José Eduardo Tanus dos, Cendes, Iscia Teresinha Lopes, Tambeli, Claudia Herrera, Junior, Wilson Araujo da Silva, Sandrim, Valéria Cristina.

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Orientador: Luiz Carlos Zeferino

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2019-08-29T13:48:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_JordanaMariaAzevedo_M.pdf: 4016658 bytes, checksum: 60a959ebd127a68e9c19355445d46c13 (MD5) Previous issue date: 2019

Resumo: Introdução: O câncer do colo do útero é o quarto em incidência e mortalidade em mulheres no mundo. As expressões das metaloproteases de matriz 2, 9 e 14 (MMP-2, MMP-9, MMP-14), dos inibidores teciduais de metaloproteases 1 e 2 (TIMP-1, TIMP-2) e do fator de crescimento endotelial vascular A (VEGF-A) no microambiente tumoral estão envolvidas na invasão tumoral e metástase pela degradação da matriz extracelular e angiogênese. Uma associação destas proteínas com o prognóstico poderia indicá-las como alvos terapêuticos para esta patologia. Objetivo: Verificar se a expressão das proteínas MMP-2, MMP-9, MMP-14, TIMP-1, TIMP-2 e VEGF-A em células tumorais e estromais do câncer do colo do útero têm valor prognóstico. Materiais e Métodos: É uma coorte retrospectiva cuja amostra provém das 76 pacientes com carcinoma invasivo do colo do útero do estudo: "Expressão das proteínas MMP-2, MMP-9, MMP-14, TIMP-1, TIMP-2 e VEGF-A na NIC 3 e no carcinoma invasor do colo do útero", conduzido no Hospital da Mulher Prof. Dr. José Aristodemo Pinotti da Universidade Estadual de Campinas. Das 76 mulheres, 64 foram incluídas. As expressões proteicas foram anteriormente obtidas por imunohistoquímica nas células tumorais e estromais de biópsias. A expressão foi definida pela porcentagem de células coradas e categorizada, para este estudo, entre alta e baixa usando pontos de corte definidos individualmente por curva ROC. Coletou-se dados clínicos e morfológicos para prosseguir com a análise de sobrevida doença-específica (DSS). Para tal, coletou-se as informações de tratamento e seguimento desde o diagnóstico até a última visita clínica. Os status clínicos foram categorizados em: viva livre de doença, viva com doença, óbito por causa desconhecida e óbito pela doença. Óbito pela doença foi associado com estádio do tumor, grau histopatológico, e com as expressões tumorais e estromais de MMP-2, MMP-9, MMP-14, TIMP-1, TIMP-2 e VEGF-A por modelos de regressão de Cox univariada e multivariada testadas por Hazard Ratio (HR) com intervalo de confiança 95% (IC95%). Para as associações significantes da univariada (p<0,05) foram construídas curvas de Kaplan-Meier e comparadas por Log-rank para análise de DSS. Resultados: Em 50% dos estádios avançados (II-IV) houve maiores expressões de MMP-9 no estroma, enquanto 89,5% em estádio I apresentou expressões altas de MMP-9 no estroma. Risco relativo de óbito pela doença foi associado à altas expressões de: MMP-2 estromal (HR; IC95%: 4.3; 1.3-14.2), MMP-14 estromal (HR; IC95%: 8.8; 1.1-69.6), TIMP-2 estromal (HR; IC95%: 5.3; 1.1-24.7) e VEGF-A tumoral (HR; IC95%: 3.8;1.1-13.6). Altas expressões de MMP-9 estromal (HR; IC95%: 0.2; 0.05-0.54) e tumoral (HR; IC95%: 0.2; 0.03-0.8)…

Advisors/Committee Members: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Zeferino, Luiz Carlos, 1955-, Conde, Delio Marques, Teixeira, Júlio César.

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Orientador: José Eduardo Tanus dos Santos

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2018-08-21T15:51:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferraz_KarinaCoutinho_D.pdf: 4092717 bytes, checksum: 304af959216055cd75432ac292abc300 (MD5) Previous issue date: 2012

Resumo: Evidências clínicas e experimentais indicam o envolvimento de metaloproteinases da matriz extracelular (MMPs) na patogênese de diversas doenças, incluindo as doenças cardiovasculares. Particularmente, alterações na atividade da MMP-2 parecem desempenhar um importante papel na hipertensão, na insuficiência cardíaca e em outras alterações do sistema cardiovascular. Diversos estudos mostram vários alvos não relacionados à matriz extracelular para a MMP-2, incluindo proteínas intracelulares e mediadores vasoativos. Adicionalmente, diversos trabalhos indicam o envolvimento desta enzima na clivagem proteolítica de receptores ?1- e ?2-adrenérgicos. Embora alguns estudos tenham sugerido que a MMP-2 possa afetar o tônus vascular e prejudicar a função dos ?-adrenoreceptores, nenhum estudo prévio examinou os efeitos hemodinâmicos agudos desta enzima. Nós verificamos os efeitos da MMP-2 recombinante humana (rhMMP-2), administrada por via intravenosa (i.v.), a carneiros anestesiados sob condições basais e durante estimulação ?-adrenérgica com dobutamina. Vinte e seis carneiros machos anestesiados foram utilizados em dois protocolos experimentais. Primeiramente, rhMMP-2 (220 ng.kg-1.min-1 durante 60 min) ou salina foi infundida e nenhuma alteração hemodinâmica foi encontrada. No segundo protocolo, infundiu-se dobutamina (5 ?g.kg-1.min-1, i.v., durante 180 min) ou salina em carneiros que haviam recebido a mesma infusão descrita acima de rhMMP-2 ou salina precedida pelo tratamento com doxiciclina (10 mg.kg-1, i.v., durante 15 min) ou salina. Os níveis plasmáticos e cardíacos de MMP-2 foram avaliados por zimografia e a atividade gelatinolítica foi analisada por espectrofluorimetria. Nós observamos que, enquanto a infusão de rhMMP-2 não aumentou os níveis plasmáticos e cardíacos de MMP-2, produziu um aumento na atividade gelatinolítica do coração, e a doxiciclina preveniu este efeito. A dobutamina reduziu o índice de resistência vascular sistêmico (IRVS) e aumentou o índice cardíaco (IC) e a dP/dtmax no ventrículo esquerdo. Entretanto, a co-infusão de rhMMP-2 e dobutamina foi associada com uma menor redução no IRVS e com menores aumentos no IC e na dP/dtmax induzidos pela dobutamina. O pré-tratamento com doxiciclina impediu estas alterações induzidas pela rhMMP-2 na resposta à dobutamina. Adicionalmente, verificou-se que a rhMMP-2 reduziu a formação de AMP cíclico em cardiomiócitos e que os inibidores de MMPs doxiciclina e ONO-4817 impediram esta redução. Nossos resultados mostram que a rhMMP-2, sob condições basais, não exerce efeitos hemodinâmicos em carneiros. Entretanto, a rhMMP-2, sob estimulação cardíaca, prejudica a resposta cardiovascular induzida pela ativação de receptores…

Advisors/Committee Members: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Santos, José Eduardo Tanus dos, Mónica, Fabíola Zakia Taufic, Junior, Wilson Nadruz, Pupo, Andre Sampaio, Simões, Marcus Vinicius.

Resumo não disponível. Advisors/Committee Members: Bakos, Lucio, Edelweiss, Maria Isabel Albano.

▼ Introdução: A obstrução infravesical (OIV) de longo prazo secundária a hiperplasia prostática benigna (HPB) pode causar alterações funcionais e morfológicas na bexiga. Um dos principais eventos consiste no aumento da deposição de colágeno e perda de complacência vesical, levando a alteração de armazenamento e esvaziamento urinário. O aumento da deposição de colágeno na matriz extracelular (MEC) da musculatura detrusora é a principal razão para a diminuição da complacência vesical. Na bexiga, assim como em outros órgãos, este fenômeno depende da atividade equilibrada de enzimas proteolíticas, incluindo as metaloproteinases (MMP) e os seus inibidores endógenos (inibidores teciduais de metaloproteinases-TIMPs). Como estes fenômenos são desconhecidos na bexiga obstruída, o objetivo deste estudo foi avaliar a expressão gênica de colágeno, MMPs e seus inibidores na bexiga de pacientes com obstrução infravesical. Material e Métodos: Foi realizada uma análise prospectiva e controlada de 43 pacientes com OIV devido a HPB, que foram submetidos à ressecção transuretral da próstata (RTUP) entre 2011 e 2012. Como grupo controle foram selecionados espécimes de músculo detrusor de 10 pacientes que foram submetidos a prostatectomia radical retropúbica devido adenocarcinoma de próstata. Todos estes pacientes tinham idade menor que 60 anos, tamanho de próstata menor que 30 gramas ao ultra-som e escore internacional de sintomas prostáticos (IPSS) menor que 7. Todos os pacientes foram submetidos a estudo urodinâmico pré e pós operatório (após 6 meses). A biópsia de fragmento de músculo da bexiga foi realizada ao final da RTUP e colocada em solução estabilizadora de RNA para quantificação da expressão de colágenos I e III, metaloproteinases de matriz 1, 2 e 9, e inibidores de MMPs (TIMP1, TIMP2 e RECK) na bexiga de pacientes com HPB. Os genes descritos foram avaliados através da técnica de reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qRT-PCR). Resultados: Todos os pacientes com HPB tinham confirmado OIV, através da análise do estudo urodinâmico (média de pressão detrusora no fluxo máximo de 78,5 cmH2O e fluxo urinário máximo de 7,7 ml / s). O gene MMP1 mostrou-se superexpresso em pacientes com HPB (mediana = 1,87). MMP9, TIMP1 e RECK estavam subexpressos na maioria dos casos, enquanto TIMP2, colágeno I e III foram superexpressos (1,5, 4,4 e 1,9 vezes, respectivamente). No que diz respeito às características clínicas e urodinâmicas encontramos que MMP2 foi mais expresso entre pacientes com um baixo IPSS global (0,005) e sem urgência (p=0,035). Colágeno III foi mais expresso em pacientes com contrações vesicais não inibidas (p = 0,049). Os outros genes não mostraram nenhuma correlação estatística com quaisquer características clínicas ou urodinâmicas. Após 6 meses de RTU, pacientes que possuíam expressão aumentada de duas ou mais MMPs, apresentaram resolução da CNI em 66,6% dos casos, contra 14,0% quando apenas uma ou nenhuma MMP estava aumentada (p=0,038) Conclusões: Encontramos um perfil de superexpressão de MMP1, TIMP2,… Advisors/Committee Members: Alberto Azoubel Antunes, Sabrina Thalita dos Reis, Adriano Almeida Calado, Joao Carlos Campagnari, Pierre Damião Gonçalves, Sabrina Thalita dos Reis.

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Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-09Bitstream added on 2014-06-13T20:16:24Z : No. of bitstreams: 1 marangoni_nr_me_araca.pdf: 326349 bytes, checksum: 7dc73435330e73a5c923b91991a9e1f1 (MD5)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

A leishmaniose visceral canina, causada pelo protozoário Leishmania (Leishmania) chagasi, é uma doença de grande ocorrência principalmente na América Latina. A caracterização das lesões sistêmicas associadas à infecção pelo parasita tem sido amplamente estudada, entretanto, poucos autores elucidam a patogenia na forma nervosa. Com o objetivo de compreender melhor os mecanismos envolvidos na inflamação do sistema nervoso central de cães naturalmente infectados por L. chagasi, amostras de liquor e plexo coróide foram colhidas e submetidas à zimografia para a detecção de metaloproteinases (MMPs). Amostras do plexo coróide e liquor de cães sadios foram avaliadas como controle. Os géis de zimograma foram analisados quanto à presença e atividade proteolítica das metaloproteinases -2 e -9. Formas inativas das proteases foram detectadas no plexo coróide, sendo que o Grupo de animais positivos não diferiu do negativo. No liquor foram encontradas formas ativas e inativas das MMPs-2 e -9 e a atividade proteolítica das mesmas diferiu entre os Grupos positivo e negativo. A MMP-2 teve maior detecção nos animais negativos e a MMP-9 nos positivos. O aumento da MMP- 9 no liquor dos cães doentes representa seu possível envolvimento na patogenia das lesões encefálicas ao ocasionarem o rompimento das barreiras hematoencefálica e/ou hematoliquórica, permitindo a passagem de células e proteínas envolvidas no processo inflamatório

Canine visceral leishmaniasis, caused by the protozoan Leishmania (Leishmania) chagasi, is a disease with high occurrence in Latin America. The characteristics of the systemic lesions related to the infection have been widely studied, but few studies clarify the disease on a neurological aspect. With the aim of a better understanding of the inflammation mechanisms within the central nervous system of dogs naturally infected by L. chagasi, some samples of cerebrospinal fluid and choroid plexus were collected and submitted to zymography to detect metalloproteinases (MMPs). Samples of choroid plexus and cerebrospinal fluid from healthy dogs were evaluated as control. The zymogram gels were analysed taking into account the presence and the proteolytic activity of metalloproteinase -2 and -9. Inactive forms of the proteases were detected in the choroid plexus, and the group of positive animals did not differ from negative ones. In the cerebrospinal fluid, active and inactive forms of MMP-2 and -9 were found, and their proteolytic activity differed between negative and positive groups. MMP-2 had higher detection in the negative animals and MMP-9 in the positive ones. The increasing of MMP-9 in the cerebrospinal fluid of infected dogs represents its possible involvement in the brain injuries,…

Advisors/Committee Members: Universidade Estadual Paulista (UNESP), Machado, Gisele Fabrino [UNESP].

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Orientador: José Eduardo Tanus dos Santos

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2018-08-17T09:43:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lacchini_Riccardo_D.pdf: 22512390 bytes, checksum: 7470f8034f9078b089b846087b2a9dcf (MD5) Previous issue date: 2011

Resumo: A hipertensão é uma doença muito comum, e está associada à alta morbidade e mortalidade cardiovascular. Em relação às doenças associadas à hipertensão, se observam diferenças étnicas, sendo que negros são expostos a maior risco cardiovascular que os brancos. A manutenção de níveis pressóricos elevados leva a alterações teciduais em vasos e no coração em um processo chamado remodelamento cardiovascular. No coração este processo leva à hipertrofia cardíaca. Esta condição causa progressiva perda na eficiência de contração do coração, e em casos avançados pode levar à morte dos pacientes. O remodelamento cardíaco envolve a participação de metaloproteinases de matriz extracelular (MMPs), principalmente a MMP-2 e MMP-9. Diversos polimorfismos genéticos foram associados com alterações na expressão e/ou atividade destas enzimas, e é possível que diferenças nas distribuições dos polimorfismos ajudem a explicar as diferenças étnicas quanto à morbidade e mortalidade cardiovascular. Os principais polimorfismos da MMP-9 e MMP-2 são: um polimorfismo de base única (SNP) (C-1562T) e um microssatélite (-90 CA (14-24)) no promotor, e um SNP no exon 6 (A855G - Q279R) da MMP-9, e dois SNPs (C-1306T e C-735T) no promotor da MMP-2. Como estes polimorfismos também foram associados com diversas doenças, o propósito deste estudo foi avaliar se polimorfismos da MMP-9 e MMP-2 estão associados à hipertensão, a alterações ecocardiográficas em hipertensos e se diferem entre populações de brancos e de negros. Em nosso estudo avaliamos 173 hipertensos submetidos a eco cardiografia e 137 indivíduos normotensos, pareados para idade gênero e raça. Avaliamos também 140 indivíduos brancos e 177 indivíduos negros recrutados aleatoriamente. Nossos resultados mostraram uma associação do alelo H e do genótipo HH do microssatélite -90 CA(14-24) com hipertensão (P= 0,0058 e P=0,0085, respectivamente), e os portadores destes alelos apresentaram maior risco a estadoença, quando comparados com o alelo L (odds ratio, ou razão de chances (OR) =1,581) e genótipo LL (OR=2,32). Haplótipos da MMP-9 foram capazes de exercer efeitos protetores (H3, P=0,049) e deletérios (H7; P=0,0015) sobre o diâmetro diastólico final e protetores (H3, P=0,0367) e deletérios (H7; P=0,0057) sobre o índice de massa do ventrículo esquerdo. Não encontramos associações dos polimorfismos da MMP-2 com hipertensão, porém os haplótipos H1 e H3 mostraram efeitos protetores sobre diâmetro diastólico final e índice de massa do ventrículo esquerdo (H1; P=0,0290 e P=0,0318, respectivamente) e deletérios sobre e índice de massa do ventrículo esquerdo (H3; P=0,0187). Nós encontramos diferenças grandes nas distribuições dos polimorfismos estudados entre brancos e negros.…

Advisors/Committee Members: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Santos, José Eduardo Tanus dos, Sonati, Maria de Fátima, Hyslop, Stephen, Colombo, Fernanda Consolim, Coelho, Eduardo Barbosa.

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Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_luiz_eduardo_rilling_nova_cruz.pdf: 941247 bytes, checksum: b51c3277dc5892c9cf7c0ddc659e85c4 (MD5) Previous issue date: 2010-06-01

The objective of the present study was the immunohistochemical evaluation of the proportion of mononuclear cells and the expression of MMP-2 and 9 on chronic periodontitis between smokers and non-smokers. From the 127 patients examined 31(16 non-smokers and 15 smokers) fulfill the inclusion criteria were included in the study. These patients underwent surgical procedures and 31 biopsies were collected and divided in two parts, one for histological preparation and the other for zymography. Each sample was histologically processed and exposed to monoclonal antibodies for B cells (anti-CD20), memory T cells (anti-CD45RO) and macrophages or monocytes (anti-CD68) detection. The samples showed a similar pattern, with connective tissue rich in inflammatory cells. The histometric analysis showed that the total amount of mononuclear inflammatory cells labeled did not differ significantly between smokers and non-smokers (p> 0.05). Evaluating each cell type separately, significant differences were not detected between groups (p> 0.05). When stratifying the samples into regions (coronal, middle and apical third) to evaluate the presence of individual cell types in each region significant differences between the groups were not detected (p> 0.05). The zymography of the samples suggested that the expression of MMP-2 and 9 showed no statistically significant differences between the two groups (p> 0.05). Thus, within the limits of this study, we can conclude that sites with chronic periodontitis in smokers and non-smokers did not differ in the amount of mononuclear inflammatory cells and in the expression of MMPs 2 and 9.

O estudo teve como objetivo a avaliação imunoistoquímica da proporção de células mononucleares e da expressão zimográfica da MMP-2 e 9 na periodontite crônica em fumantes e não-fumantes. Foram examinados 127 pacientes dos quais 31 preencheram os critérios de inclusão e foram inseridos no estudo, sendo 16 não-fumantes e 15 fumantes. Estes pacientes foram operados e 31 biópsias foram coletadas de área interproximal de dentes com bolsa periodontal >5mm e divididas longitudinalmente em duas partes, uma para análise histológica e outra para zimografia. As amostras foram processadas histologicamente e expostas aos anticorpos monoclonais para células B (anti-CD20), células T de memória (anti-CD45RO) e monócitos ou macrófagos (anti-CD68). De maneira geral, as amostras apresentaram padrão semelhante, com um tecido conjuntivo subjacente ao epitélio oral rico em células inflamatórias. A análise histométrica demonstrou que a quantidade total de células inflamatórias mononucleares marcadas não diferiu entre fumantes e não-fumantes (p>0,05). Ao avaliar cada tipo celular separadamente, também não foram detectadas diferenças estatisticamente significativas entre os grupos (p>0,05). Ao dividir as amostras em…

Advisors/Committee Members: CPF:28426454801, Neto, João Batista César, Etges, Adriana, César Junior, João Batista.

▼ Tumores malignos tem a habilidade de invadir tecidos normais e de se espalharem para sítios anatômicos distantes, originando, a metástase o maior fator de mortalidade do câncer. As metaloproteinases de matriz (MMP)-1 e MMP-13 tem sido associada a invasão tumoral e a metástase, pois a MMP-1 degrada colágeno tipo I, que é o substrato mais abundante no estroma tumoral e a MMP-13 degrada coágeno tipo IV, dentre outros , que está presente na membrana basal dos vasos. Pesquisas mostram que a IL-8 é um potente fator angiogênico e está associada ao crescimento tumoral, à metástase e ao pobre prognóstico do câncer. O presente trabalho se propõe a verificar a existência e a frequências dos polimorfismos nos genes das MMPs-1(rs2071230 e rs470558), -13(rs2252070) e da IL-8 (rs4073 e rs2227532) e investigar o possivel valor prognósticos dos mesmo em uma serie de casos de carcinoma epidermoide oral e de orofaringe(CEOO). Foram genotipados por meio de PCR em tempo real 98 amostra de pacientes com carcinoma epidermóide e 134 amostras controle. Advisors/Committee Members: http://lattes.cnpq.br/9512014003639405, Nonaka, Cassiano Francisco Weege, http://lattes.cnpq.br/0224522010734716, Silveira, Ericka Janine Dantas da, http://lattes.cnpq.br/2186658404241838, Santos, Jean Nunes dos, http://lattes.cnpq.br/0926138204356872, Souza, Lelia Batista de, http://lattes.cnpq.br/6671914892609743, Freitas, Roseana de Almeida.

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Orientador: Dagmar Ruth Stach-Machado

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Made available in DSpace on 2018-08-06T14:02:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_JulieteAparecidaFranciscoda_M.pdf: 1928631 bytes, checksum: b86edaf3408398f4a27c1c24171c8108 (MD5) Previous issue date: 2006

Resumo: A doença periodontal é caracterizada como um grupo de lesões que afetam os tecidos que rodeiam e suportam os dentes nos seus alvéolos. A placa bacteriana é seu agente etiológico principal, todavia inúmeras evidências sugerem que a doença periodontal não está simplesmente associada à colonização da cavidade oral por microrganismos patogênicos, mas à susceptibilidade ou resistência do hospedeiro, uma vez que, dependendo da resposta imune mediada a estes microrganismos poderá resultar ou não na destruição do tecido periodontal. Nos tecidos periodontais saudáveis, há um delicado equilíbrio entre os microrganismos encontrados na placa e a resposta do hospedeiro. Embora a resposta seja essencialmente protetora é influenciada por diversos fatores que podem gerar uma resposta imune exacerbada e deste modo, contribui para o agravamento das lesões e cronificação da doença periodontal. Entre os fatores de risco está o Diabetes Mellitus, caracterizado pela ineficiência na produção ou utilização inadequada de insulina pelo organismo, afetando o metabolismo de proteínas, carboidratos e gordura, resultando em severas desordens metabólicas. O objetivo inicial deste trabalho foi estudar o desenvolvimento da doença periodontal experimental em ratos sob influência do diabetes induzido por estreptozotocina (STZ), caracterizando as alterações morfológicas encontradas no tecido epitelial e conjuntivo, uma vez que, indivíduos diabéticos apresentam um retardo na capacidade de cicatrização. Os resultados obtidos confirmaram que os animais diabéticos tiveram cronificação da resposta inflamatória com aumento de células inflamatórias no tecido do periodonto, degradação maior e mais rápida de fibras colágenas, que levou ao acúmulo de fibras colágenas densas, aumentou aparentemente a quantidade de fibroblastos, aumentou a degradação de fibras reticulares que sustentam a membrana da basal, houve involução das papilas dérmicas e aumento da camada córnea. Uma vez que, nos animais diabéticos o processo fibrótico foi mais acentuado com o avanço da inflamação afetando a organização estrutural do tecido epitelial e conjuntivo, provavelmente devido ao aumento da degradação da matriz extracelular. Deste modo, efetuamos a avaliação das MMP2 e 9, também denominadas gelatinases, as quais entre outras atividades biológicas atuam na degradação proteolítica da matriz extracelular. Os resultados obtidos na quantificação da atividade enzimática das MMPs por zimografia mostrou que,a expressão das isoformas de MMP 2 foram significativamente menores nos animais diabéticos quando comparados aos animais normais durante todo decorrer do tempo experimental. Todavia, a atividade enzimática da MMP9 foi maior nos animais…

Advisors/Committee Members: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Stach-Machado, Dagmar Ruth, 1951-, Junior, Carlos Rossa, Costa, Fabio Trindade Maranhão.

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Objetivo: Estudar a imunoexpressão das proteínas metaloproteinase-1, metaloproteinase-7 e p53 em pacientes portadores de adenocarcinoma colorretal, correlacionando com os fatores prognósticos clínico-patológicos. Métodos: Foram analisados tecidos fixados em formol e dispostos em blocos de parafina dos tumores de 82 pacientes, por imunohistoquímica, pelo método da estreptavidina-biotina, usando-se a técnica de arranjo em matriz de amostras teciduais (tissue microarray). Na avaliação da positividade dos marcadores foi utilizado um escore categórico, que predeterminou o valor de corte na percentagem de células coradas do tumor. As expressões teciduais das proteínas foram correlacionadas com as varáveis representadas pelo grau de diferenciação celular, estadiamento, tempo livre de doença, recidiva, sobrevida e mortalidade específica. Foram empregados os testes do qui-quadrado e de Kaplan-Meier para verificar as associações dos marcadores com as varáveis estudadas. Para testar a significância das diferenças entre as curvas do tempo livre de doença e da sobrevida foram utilizados os testes de Log-Rank e Wilcoxon. Resultados: A metaloproteinase-1 foi positiva em todos os tumores. A metaloproteinase-7 foi positiva em 50 (61%) e negativa em 32 (39%) tumores. A p53 foi positiva em 70 (85,4%) e negativa em 12 (14,6%) tumores. A correlação da imunoexpressão dos marcadores realizada separadamente e em conjunto não apresentou associação comsignificância estatística com nenhuma das variáveis analisadas. Conclusão: Não houve correlação da associação entre a imunoexpressão das proteínas metaloproteinase-1, metaloproteinase-7 e p53 com a recidiva tumoral, mortalidade, intervalo de tempo livre de doença, sobrevida, grau de diferenciação celular e estadiamento do câncer colorretal.

Purpose: To analyse the immunoexpression of metalloproteinase-1, metalloproteinase-7 and also the p53 in colorectal adenocarcinoma and correlate it with the clinical pathological prognostic factors. Methods: Formalin-fixed, wax-embedded tissue of the tumours of 82 patients were analysed by immunohystochemistry through the streptavidin-biotin method, using the tissue microarray technique. When evaluating the positivism of the markers a categorical score was used, which predetermined the cutting value on the percentage of the tumours cored cells. The proteins tissue expressions were correlated with the variation represented by the degree of cellular differential, stage, relapse-free survival, recurrence, survival and specific mortality. The tests of the qui-square and Kaplan-Meyer were applied with the aim to verify the markers association with the studied variations. In order to test the significance of the differences between the curves of relapse-free survival and of the overall survival, the tests of Log-Rank and Wilcoxon were utilized. Results: The metalloproteinase-1 was found to be positive in all the tumours. The metalloproteinase-7 was found to be positive in 50 (61%) and negative in 32 (39%) of the tumours. The p53 was found to be positive in 70…

Advisors/Committee Members: Delcio Matos, Mario Jorge Jucá, José Eduardo Gonçalves, Sarhan Sydney Saad, Ricardo Artigiani Neto, Sidney Roberto Nadal.

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Orientador: José Mauro Granjeiro

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Made available in DSpace on 2018-08-09T02:30:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_RodrigoCardosode_D.pdf: 3052048 bytes, checksum: f37f738c374af69b889b7672904eddfc (MD5) Previous issue date: 2005

Resumo: O objetivo do trabalho foi avaliar comparativamente a neoformação óssea e o perfil de gelatinases 2 e 9 durante o reparo de defeito crítico em crânio de ratos tratados com osso autógeno ou xenoenxerto desmineralizado. Um defeito ósseo de tamanho crítico (8 mm) foi confeccionado no crânio de 90 ratos Wistar (90 dias de vida), e preenchido com osso autógeno (grupo controle) obtido durante a confecção do defeito ou com matriz óssea bovina desmineralizada (grupo teste). Após os períodos de 7, 14, 21, 30 e 90 dias, os animais foram eutanasiados e as peças coletadas para análises histomorfométrica (em hematoxilina e eosina) e zimográfica. A análise paramétrica foi realizada utilizando análise de variância (teste de Tukey se p<0,05). O completo fechamento do defeito no grupo controle foi observado aos 90 dias com a neoformação óssea ocorrendo das bordas do defeito para o centro e da dura-máter para epiderme. No grupo teste houve atraso no processo de reparo, ossificação incompleta e substituição das partículas do biomaterial por tecido conjuntivo fibroso, após 21 dias. Nos primeiros 14 dias após a cirurgia o infiltrado inflamatório predominante era composto de células mononucleares e poucas células gigantes multinucleadas. A análise zimográfica demonstrou que a atividade MMP-2 e -9 foram significativamente maiores no grupo teste que no grupo controle (p<0,05), sendo que a atividade MMP-2 manteve-se elevada até o período de 14 dias no grupo teste. A despeito da biocompatibilidade do xenoenxerto, o biomaterial não foi capaz de promover a neoformação óssea no defeito, possivelmente devido ao intenso estímulo da atividade gelatinolítica, em particular da MMP-2, que pode ter mediado a reabsorção prematura da matriz óssea bovina desmineralizada

The purpose of this study was to evaluate comparatively new bone formation and the profile of the gelatinases 2 and 9 during the repair of critical size defects treated with autogenous bone or demineralized xenograft. A critical defect (8mm) was created in the skull of 90 Wistar rats (90-day-old) and treated with autogenous bone (control group) obtained during the confection of the defect or demineralized bovine bone (experimental group). After at 7, 14, 21, 30 and 90 days, the animals were killed and the calvaria removed for morphometric (stained by hematoxylin-eosin) and zymografic analysis. Parametric analysis was realized with analysis of variance (Tuckey¿s test if p<0.05). The control group showed complete closure of the defects at 90 days with new bone formation occurring from the sides towards the center of the defect and from the dura-mater outwards to the epidermis. In the experimental group, there was a delay in the process of repair, incomplete…

Advisors/Committee Members: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Granjeiro, Jose Mauro, Ferreira, Carmen Veríssima, Buzalaf, Marilia Afonso Rabelo, Gadelha, Fernanda Ramos, Garlet, Gustavo Pompermaier.

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O objetivo desse estudo foi sintetizar e caracterizar um primer experimental contendo Nanopartículas (NLS) de Quitosana e avaliar algumas de suas propriedades. Foram utilizados 50 molares humanos os quais foram seccionados no sentido mesio-distal e oclusal. Esses foram polidos com lixas de diferentes granulações. Após foi realizada a síntese e caracterização de primers experimentais contendo nanopartículas de Quitosana. Os grupos experimentais foram determinados por um ensaio de atividade antimicrobiana e alocados da seguinte forma: 1) Sem aplicação de primer experimental, 2) Aplicação de um primer experimental contendo Clorexidina (CHX) 2% 3) Aplicação de um primer experimental de NLS Quitosana 2% 4) Aplicação de um primer experimental de NLS Quitosana 0,6% 5) Aplicação de um primer experimental de NLS Quitosana 0,4%. Os primers experimentais foram aplicados sobre a dentina sadia. Para a análise de Microtração, foi confeccionado um platô de resina composta Z350 (3M Dental Products, St, Paul, MN, EUA), onde foram realizadas secções para a confecção dos palitos. Foi realizada a caracterização dos primers experimentais por meio de espalhamento de luz dinâmica e o ensaio da atividade de MMPs por meio de Zimografia in situ. Para a analise de Microtração foi utilizada a análise de variância (ANOVA) öne way(̈p=0,9054). Para a análise de Zimografia in situ foi utilizada ANOVA seguido do teste de Holm-Sidak (p<0,05). A caracterização das NLS de Quitosana demonstrou sua estabilidade em todos os tempos analisados. No ensaio de atividade antimicobriana foi observado concentração de 0,4% para CIM e 0,6% para CBM. Na Resistência a Microtração, não foi observada diferença estatística entre os grupos experimentais (p=0,9054). O ensaio de Zimografia in situ mostrou que o primer experimental contendo Quitosana 2% apresentou maior atividade de inativação de MMPs comparado com os demais grupos experimentais (p<0,05). O primer experimental contendo NLS de Quitosana possui atividade antimicrobiana, não altera a resistência adesiva e possui efeito de inativação de MMPs presentes na dentina

The objective of this study was to synthesize and characterize an experimental primer containing Chitosan Nanoparticles (NLS) and to evaluate some of its properties. Fifity human molars were used which were sectioned mesio-distally and occlusally. These were polished with sandpaper of different granulations. After the synthesis and characterization of experimental primers containing chitosan nanoparticles were performed. The experimental groups were determined by an antimicrobial activity assay and were allocated as follows: 1) Without application of experimental primer 2) Application of an experimental primer containing Chlorhexidine (CHX) 2% 3) Application of an experimental primer of NLS Chitosan 2 % 4) Application of an experimental primer of NLS Chitosan 0.6% 5) Application of an experimental primer of NLS Chitosan 0.4%. The experimental primers were applied on the dentin sound. A composite resin plateau Z350 (3M Dental Products, St,…

Advisors/Committee Members: Maria Cristina Borsato, Priscyla Daniely Marcato Gaspari, Lourdes Aparecida Martins dos Santos Pinto, Silvia Amelia Scudeler Vedovello.

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Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-31Bitstream added on 2014-06-13T19:44:10Z : No. of bitstreams: 1 000757746.pdf: 1927597 bytes, checksum: 54d5961ec9abfb730ff68a427c6b569c (MD5)

Desordens orais potencialmente malignas como a Queilite Actínica (QA) e neoplasias malignas como os Carcinomas Epidermoides (CE) apresentam comportamentos biológicos variáveis em função de diversos fatores teciduais que levam a desregulação do metabolismo celular. As Metaloproteinases de Matriz (MMP), endopeptidases responsáveis pela degradação dos componentes da matriz extracelular, podem estar relacionadas com o comportamento biológico dos carcinomas. O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão imuno-histoquímica da MMP-2 e da MMP-9 e dos Inibidores Teciduais de Metaloproteinases (TIMP) 1 e 2 na QA e nos CE de lábio e de língua e relacionar os resultados com as características histopatológicas das lesões com uma possível relação entre a QA e o CE de lábio. Para tanto, neste estudo foram analisados 35 casos de QA em lábio inferior, 32 casos de CE primário em lábio inferior e 34 casos de CE primário em língua, todos com diagnóstico clínico e histopatológico, do Ambulatório da Disciplina de Propedêutica Estomatológica e da Disciplina de Patologia Bucal, da Faculdade de Odontologia do Instituto de Ciência e Tecnologia, São José dos Campos – UNESP, respectivamente. O grupo controle contou com 16 casos, sem alteração clínica ou histopatológica no tecido epitelial e sem inflamação, provenientes de biópsias realizadas na mesma instituição para confirmação do diagnóstico de hiperplasia fibrosa ou mucocele.Os resultados foram submetidos à análise estatística. Pode-se observar que, em nossas amostras de QA e de CE de lábio e de língua, a MMP-2 e seu regulador, a TIMP-2, encontra-se subexpressa, assim como a MMP-9 e seu inibidor, a TIMP-1. A expressão de MMP-9 não mostrou diferença estatisticamente significativa entre os casos de QA e de CE, no entanto não se pode negar o claro aumento de expressão de MMP-9 nas lesões de QA quando estas são comparadas as lesões ao grupo controle. Portanto....

Potentially malignant oral disorders as actinic cheilitis (QA) and neoplastic as squamous cell carcinomas (EC) of the lip and tongue, exhibit biological behavior that varies with several factors, such as genetic changes that lead to dysregulation of cellular metabolism. The aim of this study was to evaluate the expression of matrix metalloproteinases (MMPs) 2 and 9 and tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP) 1 and 2, using the technique of immunohistochemistry. MMPs are responsible for endopeptidase degradation of the extracellular matrix. Was investigated in QA and CE lip and tongue, the presence and activity of these proteolytic enzymes and a possible relationship between that and the transition from QA to EC lip; besides trying to relate the results with pathologic features and compare the found between the groups. For both the study included 35 cases of QA in the lower…

Advisors/Committee Members: Universidade Estadual Paulista (UNESP), Brandão, Adriana Aigotti Haberbeck [UNESP].

▼ Dada a possível diferença fisiopatológica entre insuficiência cardíaca com fração de ejeção preservada (ICFEP) e reduzida (ICFER) associada à falta de biomarcadores capazes de diferencia-las, objetivamos comparar níveis de metaloproteinase-9, microRNAs e marcadores inflamatórios entre pacientes com ICFEP e ICFER durante e após episódios de IC descompensada. Os biomarcadores foram avaliados na admissão hospitalar, alta e em uma consulta ambulatorial. Os pacientes com ICFER apresentaram maiores níveis de MMP-9 e miR-150 após terapia aguda. MMP-9 e miR-150 reduziram e miR-21 aumentou após a alta comparado à admissão, porém, essas alterações foram transitórias nos dois grupos. Ainda, MMP-9 elevada e miR-21 reduzidos na consulta ambulatorial foram preditores de readmissão hospitalar. Os níveis de IL-18 no grupo ICFEP foram maiores, reduziram após a alta e se correlacionaram com troponina I. Concluímos que marcadores de remodelamento cardíaco estão mais alterados na ICFER e que a IL-18 pode atuar de forma distinta na ICFEP. Advisors/Committee Members: Biolo, Andreia.

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Espécies reativas de oxigênio (ROS) têm sido descritas como potenciais causadoras de doenças como aterosclerose, artrite e câncer. Falhas na regulação das metaloproteinases de matriz (MMP), uma família de proteases que degradam matriz extracelular, parecem estar intimamente relacionadas com essas mesmas doenças. Além disso, autores sugerem uma relação entre a atividade das MMPs e ROS. Em trabalhos anteriores, nosso grupo de pesquisa demonstrou que o tratamento com retinol 7 μM foi capaz de induzir mudanças no metabolismo de células de Sertoli cultivadas, como o aumento da atividade de enzimas antioxidantes, aumento do dano oxidativo a biomoléculas, ativação de ERK1/2 MAPK, alteração do ciclo celular e transformação pré-neoplásica, ligando o tratamento com retinol ao estresse oxidativo. No presente trabalho, nós utilizamos a técnica de zimografia para verificar a atividade da MMP-2 em células de Sertoli tratadas com retinol e ácido retinóico. Nós encontramos que tanto o tratamento por 24 horas com retinol 7 μM, quanto o tratamento por 24 horas com ácido retinóico 1 nM, aumentaram a atividade da MMP-2 em células de Sertoli cultivadas. O cotratamento com diferentes antioxidantes reverteu o aumento da atividade da MMP-2 induzido por retinol, mas não por ácido retinóico. Além disso, o tratamento com retinol, mas não com ácido retinóico, foi capaz de aumentar a produção de ROS quantificada pela oxidação de DCFH-DA. Nós encontramos também que tanto o tratamento com retinol quanto com ácido retinóico foram capazes de aumentar a fosforilação de ERK1/2. Entretanto, somente o aumento da atividade da MMP-2 induzido por tratamento com retinol foi inibido por co-tratamento com UO126, um potente inibidor de fosforização de ERK1/2. Nossos resultados sugerem que o aumento da atividade da MMP-2 induzido por retinol, mas não por ácido retinóico, está relacionado com a fosforilação de ERK1/2 e com a geração de ERO.

Reactive oxygen species (ROS) have been hypothesized to play a causative role in numerous diseases such as atherosclerosis, arthritis and cancer. Failures in the regulation of the matrix metalloproteinases (MMP), a family of extracellular matrixdegrading proteases, appear to be intimately involved in these diseases. In addition, authors suggest a relationship between MPP activity and ROS. In early reports our research group has demonstrated that 7 μM retinol was able to induce changes in Sertoli cell metabolism, such as up-regulation of antioxidant enzyme activities, increase in oxidative damage to biomolecules, activation of ERK1/2 MAPK, cell-cycle alteration and pre-neoplasic transformation, linking retinol treatment and oxidative stress. Here, we verify the MMP activity in cultured Sertoli cells treated with vitamin A using gelatin zymography. We found that both retinol (7 μM by 24 hours) and retinoic acid (1 nM by 24 hours) treatments induces MMP-2 activity in cultured Sertoli cells. Antioxidants cotreatment reversed retinol-induced but not retinoic acid-induced MMP-2 activity. Moreover, retinol but not retinoic acid…

Advisors/Committee Members: Moreira, Jose Claudio Fonseca.

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Orientador: Kleber Gomes Franchini

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas

Made available in DSpace on 2018-08-13T09:40:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_AnaPaulaDalla_M.pdf: 3504258 bytes, checksum: c5455cd7943b5dcb62c07cb63be2f681 (MD5) Previous issue date: 2009

Resumo: Mudancas dinamicas que ocorrem no intersticio do coracao contribuem diretamente para o remodelamento miocardico decorrente de doencas cardiacas tais como infarto do miocardio, cardiopatia hipertensiva e cardiomiopatias. As metaloproteinases de matriz extracelular (MMPs) sao importantes no remodelamento destas doencas. Estimulos mecanicos e neuro-humoral regulam a expressao e atividade de MMPs atraves de multiplos processos. Em estudos previos verificamos que o silenciamento da FAK no VE de camundongos inibe a fibrose e reduz a atividade de MMP2. Objetivamos avaliar o papel da FAK no controle da ativacao de fibroblastos cardiacos de ratos(FCRNs), induzidos por estiramento mecanico. Os FCRNs foram cultivados em placas Bioflex e submetidos a estiramento ciclico (10%) por ate 8 horas, exceto os controles. A expressao e atividade da FAK foram avaliadas por imunoblottings com anticorpos especificos para FAK ou pFAK Tyr397, respectivamente. A expressao das MMPs 2 e 9 foi avaliada em imunoblottings e a atividade por zimografia ambas no sobrenadante da cultura. O estiramento provocou aumento de 2.4 vezes da quantidade de FAK fosforilada em Tyr397, alem da expressao e a atividade de MMP 2 e 9. Alem disto, modificou os parametros de proliferacao dos FCRNs, mostrando aumento de celulas positivas para Ki67 e BrdU. Do mesmo modo, a diferenciacao em miofibroblastos foi ativada(celulas positivas para a-actina de musculo liso (a-SMA). A inibicao genica da FAK atraves da tecnica de interferencia de RNA (siRNAFAK), nos FCRNs, inibiu a expressao de a-SMA, a atividade e a expressao das MMPs 2 e 9. Alem disso, a deplecao da FAK em FCRNs promoveu a diminuicao da fosforilacao em AKT Ser473, TSC-2 Thr1462, e S6 quinase Thr389 em resposta ao estiramento mecanico. A ativacao dos FCRNs foi impedida pelo pre-tratamento com o inibidor do complexo mTOR, rapamicina. Assim mostramos que a FAK medeia a ativacao de FCRNs invocado pelo estresse mecanico, possivelmente atraves da coordenacao da via de sinalizacao mTOR. Os resultados do presente estudo indicam a ativacao da FAK pode ter um papel critico na proliferacao e diferenciacao, e na ativacao de MMPs em FCRNs quando submetidos a estiramento, e ainda o knockdown da FAK apresenta efeitos contrarios, logo, infere-se o papel da FAK na ativacao de fibroblastos cardiacos.

Dynamic changes that occur in the heart interstitium contribute directly to the myocardial remodeling due to heart disease such as myocardial infarction, hypertensive heart disease and cardiomyopathies. The extracellular matrixmetalloproteinases (MMPs) play an important role in remodeling in these diseases. Mechanical and neuro-humoral stimuli regulate the MMPs expression/activity through several…

Advisors/Committee Members: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Franchini, Kleber Gomes, 1961-, Silva, Valdo Jose Dias da, Carvalho, Hernandes Faustino de.