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1. Ariadna Dias Almeida. Estudo da função do gene SmDimp de Schistosoma mansoni através da técnica de Complementação fenotípica em levedura.

Degree: 2009, Universidade Federal de Minas Gerais

URL: http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8ACMLZ 

A esquistossomose é uma doença que afeta 200 milhões de pessoas em todo o mundo. Apesar dos esforços para controlar esta doença através do desenvolvimento de novos medicamentos ou vacinas, até o momento o número de pessoas afetadas permanece quase inalterado. A fim de melhorar o conhecimento sobre a biologia e aspectos relacionados com o desenvolvimento do parasito, ciclo de vida e de reprodução, o que poderia conduzir à concepção de novas drogas e / ou vacinas, projetos genoma têm sido desenvolvidos para este parasito. Um grande número de genes têm sido descobertos e na era pós-genômica, alguns genes têm sido escolhidos para ser melhor caracterizado. Um gene de S. mansoni envolvido no ciclo celular e apresentando homologia com genes de outras espécies, incluíndo seres humanos, foi selecionado para ser melhor caracterizado. Este gene em Saccharomyces cerevisiae está envolvido no processo de interação com o complexo do spliceosoma. A técnica de complementação fenotípica foi escolhida para determinar se o gene de S. mansoni apresenta a mesma função que o gene de S. cerevisiae. Já foi demonstrado que a supressão deste gene é letal na levedura, por isso, decidiu-se utilizar leveduras diplóides neste trabalho. A supressão do gene nas leveduras foi realizada pela ruptura de um dos alelos através de um evento de recombinação homóloga do gene Dib1, utilizando gene marcador autoxotópico HIS3. Os mutantes foram selecionados em placas contendo os nutrientes necessários exceto histidina. Para identificar o nocaute, os clones obtidos foram analisados por PCR de colônia usando iniciadores específicos. Leveduras nocauteadas para o Dib1 e transfectadas com os plasmídeos contendo o gene Dib1 da levedura (controles positivos), e o Dimp do S. mansoni, foram utilizados para ensaios de esporulação, para verificar se o gene de S. mansoni complementa a função gênica do seu ortólogo em S. cerevisiae. Após experimento de nocaute, 111 clones de leveduras foram obtidas, 45 destas colônias foram testadas por PCR, e destas 6 foram identificados como nocauteadas. Uma destas colônias, então, foi usada para ser transfectada com os plasmídeos construídos. Nenhuma esporulação foi observada em qualquer um dos plasmídeos recombinantes (Dib1 de levedura e Dimp de S. mansoni), sugerindo que a super expressão dos genes bloqueou a esporulação da levedura. O fato das levedura não esporularem quando se utiliza ambos os genes, SmDimp e Dib1 da levedura, pode indicar que eles exerçam função semelhante, nos respectivos organismos. No entanto, novos experimentos precisam ser realizados para esclarecer definitivamente esta questão. Assim, os genes devem ser clonados em plasmídeos com promotores de expressão basal. Desta forma, Espera-se que a esporulação ocorra em níveis basais tornando possível confirmar se o gene SmDimp de S. mansoni pode complementar a função de seu ortólogo na levedura. Advisors/Committee Members: Elida Mara Leite Rabelo, Elida Mara Leite Rabelo, Monica Bucciarelli Rodriguez, Nelder de Figueiredo Gontijo.

Subjects/Keywords: Parasitologia Teses.; Shistosoma mansoni Teses.; Levedos Teses.; Complementação (Genética) Teses.; Processamento de RNA Teses.; Nocaute gênico Teses.

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APA (6th Edition):

Almeida, A. D. (2009). Estudo da função do gene SmDimp de Schistosoma mansoni através da técnica de Complementação fenotípica em levedura. (Thesis). Universidade Federal de Minas Gerais. Retrieved from http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8ACMLZ

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Chicago Manual of Style (16th Edition):

Almeida, Ariadna Dias. “Estudo da função do gene SmDimp de Schistosoma mansoni através da técnica de Complementação fenotípica em levedura.” 2009. Thesis, Universidade Federal de Minas Gerais. Accessed March 04, 2021. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8ACMLZ.

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MLA Handbook (7th Edition):

Almeida, Ariadna Dias. “Estudo da função do gene SmDimp de Schistosoma mansoni através da técnica de Complementação fenotípica em levedura.” 2009. Web. 04 Mar 2021.

Vancouver:

Almeida AD. Estudo da função do gene SmDimp de Schistosoma mansoni através da técnica de Complementação fenotípica em levedura. [Internet] [Thesis]. Universidade Federal de Minas Gerais; 2009. [cited 2021 Mar 04]. Available from: http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8ACMLZ.

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Council of Science Editors:

Almeida AD. Estudo da função do gene SmDimp de Schistosoma mansoni através da técnica de Complementação fenotípica em levedura. [Thesis]. Universidade Federal de Minas Gerais; 2009. Available from: http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8ACMLZ

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2. Raquel Silva de Moura. Probióticos ou fitase na dieta de potros Mangalarga Marchador.

Degree: 2010, Universidade Federal de Minas Gerais

URL: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8E6KUU 

No experimento 1 avaliou-se os efeitos da suplementação com probióticos ou fitase sobre o desenvolvimento corporal de 16 potros Mangalarga Marchador, dos 173±8 dias (desmame) aos 363±12 dias de idade, distribuídos em quatro grupos experimentais: A-dieta (pastagem de Cynodon+1,2kg/100kg PV de concentrado+água e sal mineral ad libitum); B-dieta+5g/dia de 109 ufc/g S. cerevisiae; C-dieta+2g/dia de 108 ufc/g B. bifidum, E. faecium, L. acidophilus, L. plantarum e 105 ufc/g S. cerevisiae; e D- dieta+544 FTU/kg concentrado/dia de fitase. O delineamento foi inteiramente casualizado, em arranjo de parcelas subdivididas, sendo os resultados de ganhos de peso vivo, medidas corporais, índices de conformação, parâmetros sanguíneos e índice cortical do metacarpo direito comparados pelo teste SNK e por equações de regressão. Os aditivos testados não afetaram as variáveis avaliadas (P>0,05), exceto ganho mensal de índice cortical que foi maior no grupo B aos 273 dias (P<0,05). O probiótico composto por S. cerevisiae influenciou positivamente na mineralização óssea de potros aos 100 dias pós desmame. No experimento 2 objetivou-se avaliar a viabilidade de microorganismos presentes em probióticos comerciais, um composto por S. cerevisiae Sc47 (pó liofilizado probiótico 1) e outro por S. cerevisiae, B. bifidum, E. faecium, L. acidophilus e L. plantarum (pasta ou pó por spray drying probiótico 2), armazenados em diferentes temperaturas (4ºC ou ambiente); e produção in vitro de substâncias antagonistas contra Salmonella spp. e E.coli. Os resultados foram analisados por estatística descritiva e equações de regressão. Houve diferenças na viabilidade de acordo com o modo de conservação, sendo a apresentação em pó, sem (probiótico 1) ou com resfriamento (probiótico 2), mais adequado para manutenção de células viáveis por 12 meses após fabricação. O probiótico 2 em pasta deve ter seu prazo de validade reduzido e ser armazenado a 4 °C. As bactérias avaliadas produziram substâncias antagonistas in vitro, sendo necessários estudos in vivo para futura aplicação em equinos. No experimento 3 estudou-se a estabilidade enzimática in vitro de fitase exógena comercial em diferentes pH e em condições in vitro de digestão péptica e pancreática equina. Os resultados foram analisados por teste de Tukey e equações de regressão. A fitase manteve sua atividade catalítica em pH 2,3 a 7,0 e sob ataque de enzimas presentes no estômago e intestino delgado equino.

In experiment 1, the objective was to assess the effects of probiotic or phytase supplementation on body development of 16 Mangalarga Marchador colts, of 173±8 days (weaning) to 363±12 days of age, and allocated into four treatments groups: A-diet (Cynodon pasture + 1.2 kg/100 kg BW of concentrate + water and mineral salt ad libitum); B-diet+5 g/day of yeast culture (109 CFU/g S. cerevisiae); C-diet+2g/day of bacteria (108 CFU/g B. bifidum, E. faecium, L. acidophilus, L. plantarum) and yeast culture (105 CFU/g S. cerevisiae); and D-diet + 544 FTU/kg concentrate/day of phytase. All foals were randomized,…

Advisors/Committee Members: Adalgiza Souza Carneiro de Rezende, Adalgiza Souza Carneiro de Rezende, Jose Augusto de Freitas Lima, Fernando Queiroz de Almeida, Marilia Martins Melo, Angela Maria Quintao Lana.

Subjects/Keywords: Mangalarga (Cavalo) Alimentação e rações Teses.; Suplemento alimentar Teses.; Bactérias produtoras de ácido láctico Teses.; Dieta em veterinaria Teses.; Probióticos Teses.; Levedos Teses.; Zootecnia Teses.

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APA (6th Edition):

Moura, R. S. d. (2010). Probióticos ou fitase na dieta de potros Mangalarga Marchador. (Thesis). Universidade Federal de Minas Gerais. Retrieved from http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8E6KUU

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Chicago Manual of Style (16th Edition):

Moura, Raquel Silva de. “Probióticos ou fitase na dieta de potros Mangalarga Marchador.” 2010. Thesis, Universidade Federal de Minas Gerais. Accessed March 04, 2021. http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8E6KUU.

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MLA Handbook (7th Edition):

Moura, Raquel Silva de. “Probióticos ou fitase na dieta de potros Mangalarga Marchador.” 2010. Web. 04 Mar 2021.

Vancouver:

Moura RSd. Probióticos ou fitase na dieta de potros Mangalarga Marchador. [Internet] [Thesis]. Universidade Federal de Minas Gerais; 2010. [cited 2021 Mar 04]. Available from: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8E6KUU.

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Council of Science Editors:

Moura RSd. Probióticos ou fitase na dieta de potros Mangalarga Marchador. [Thesis]. Universidade Federal de Minas Gerais; 2010. Available from: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8E6KUU

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