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Universidade Nova

1. CHINJENGUE, Nataniel Paulino. Fasciola hepatica: diversidade gen�tica e avalia��o de SNPs associados a resist�ncia ao albendazol em Portugal e Brasil.

Degree: 2016, Universidade Nova

Nos �ltimos anos, em muitos pa�ses, incluindo Portugal, a fasciolose tem vindo a ser considerada uma doen�a emergente, resultando num problema de sa�de humana e animal, e com elevado impacte econ�mico. O conhecimento da estrutura gen�tica de popula��es de Fasciola hepatica � essencial quando se avalia o potencial de desenvolvimento e extens�o da resist�ncia aos anti-helm�nticos, tais como f�rmacos triclorobendazol e albendazol. A esp�cie F. hepatica pode ser encontrada em todos os continentes, exceto a Ant�rtida, enquanto que F. gigantica se encontra apenas na �frica e na �sia. Ambas as esp�cies de Fasciola utilizam como hospedeiros intermedi�rios moluscos de �gua doce da fam�lia Lymnaeidae. Utilizou-se uma amostra com um total de 94 vermes. Oitenta e sete vermes adultos de F. hepatica da cole��o do Departamento de Helmintologia M�dica do IHMT, fixados em etanol a 70% e armazenados a -20 �C, obtidos entre 2009 e 2010 em matadouros de Portugal e provenientes de diversas regi�es do pa�s. Sete vermes tinham sido recolhidos no Brasil em 2015. Extraiu-se o DNA gen�mico atrav�s do protocolo de CTAB. Avaliaram-se tr�s marcadores nucleares: ITS1, para identifica��o da esp�cie, o gene ribossomal 28S e o gene para TubB3, que � um marcador candidato de resist�ncia aos f�rmacos. Avaliou-se tamb�m um marcador mitocondrial: citocromo c oxidase I. Os marcadores foram amplificados por PCR e sequenciados. No caso de 28S e de TubB3, SNPs de interesse foram genotipados com PCR espec�fico desenvolvido no �mbito deste trabalho, e no qual se testou a efici�ncia de desemparelhamentos em bases na 2� e na 3� posi��es antes do extremo 3?. Redes filogen�ticas foram geradas, para alinhamentos de sequ�ncias com bases amb�guas ou heterozig�ticas, no programa SplitsTree4, utilizando o algoritmo NeighborNet e as dist�ncias calculadas atrav�s do modelo Kimura-2- parameter. A regi�o ITS1 permitiu identificar as amostras como F. hepatica e mostrou ser bastante conservada. A regi�o 28S mostrou heterozigotia na posi��o 115, que separa duas linhagens encontradas no leste Europeu, em todas as amostras Portuguesas e Brasileiras, sugerindo que esteja a ocorrer sele��o de heterozigoto ou reprodu��o partenog�nica. As regi�es COI e TubB3 apresentaram diversidade intra-populacional em Portugal e no Brasil e em rela��o a outras regi�es, assim como heterozigotia em v�rias posi��es, e poder�o ser usadas em estudos populacionais alargados desta esp�cie nos dois pa�ses. Contudo, a altera��o n�o sin�nima na posi��o 311 de TubB3 n�o foi detetada nas amostras estudadas, sugerindo que este gene n�o est� envolvido em resist�ncia a f�rmacos em F. hepatica, pelo menos em Portugal ou no Brasil. O PCR espec�fico para alelos mostrou ser uma alternativa � sequencia��o para genotipagem de SNPs espec�ficos num n�mero grande de amostras, particularmente em estudos populacionais e na pesquisa de marcadores de resist�ncia a f�rmacos.

In recent years, in many countries, including Portugal, fascioliasis has been considered an emerging disease, being a human and animal health…

Advisors/Committee Members: MAUR�CIO, Isabel, CALADO, Manuela.

Subjects/Keywords: Parasitologia m�dica; F�gado patologia; Gen�tica; Portugal; Brasil

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APA (6th Edition):

CHINJENGUE, N. P. (2016). Fasciola hepatica: diversidade gen�tica e avalia��o de SNPs associados a resist�ncia ao albendazol em Portugal e Brasil. (Thesis). Universidade Nova. Retrieved from https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:run.unl.pt:10362/20070

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Chicago Manual of Style (16th Edition):

CHINJENGUE, Nataniel Paulino. “Fasciola hepatica: diversidade gen�tica e avalia��o de SNPs associados a resist�ncia ao albendazol em Portugal e Brasil.” 2016. Thesis, Universidade Nova. Accessed December 09, 2019. https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:run.unl.pt:10362/20070.

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MLA Handbook (7th Edition):

CHINJENGUE, Nataniel Paulino. “Fasciola hepatica: diversidade gen�tica e avalia��o de SNPs associados a resist�ncia ao albendazol em Portugal e Brasil.” 2016. Web. 09 Dec 2019.

Vancouver:

CHINJENGUE NP. Fasciola hepatica: diversidade gen�tica e avalia��o de SNPs associados a resist�ncia ao albendazol em Portugal e Brasil. [Internet] [Thesis]. Universidade Nova; 2016. [cited 2019 Dec 09]. Available from: https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:run.unl.pt:10362/20070.

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Council of Science Editors:

CHINJENGUE NP. Fasciola hepatica: diversidade gen�tica e avalia��o de SNPs associados a resist�ncia ao albendazol em Portugal e Brasil. [Thesis]. Universidade Nova; 2016. Available from: https://www.rcaap.pt/detail.jsp?id=oai:run.unl.pt:10362/20070

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