subject:(ENZIMAS)

1. MAHNKE, Layla Carvalho. Produção e purificação de queratinases empregando micropartículas de magnetita-queratina .

Degree: 2015, Universidade Federal de Pernambuco

URL: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/24270

► Queratinases (EC: 3.4.99) são amplamente utilizadas na indústria durante o processamento do couro, na produção de detergentes, assim como aplicadas na medicina e cosmética para… (more)

▼ Queratinases (EC: 3.4.99) são amplamente utilizadas na indústria durante o processamento do couro, na produção de detergentes, assim como aplicadas na medicina e cosmética para remoção de calosidades. Elas são produzidas por diversos microrganismos, entre eles, o gênero Cunninghamellatem se mostrado promissor entre os fungos filamentosos. Desta forma, este trabalho teve como objetivo produzir, quantificar, caracterizar e purificar as queratinases obtidas pelos fungos Cunninghamella echinulata UCP 1299 e Cunninghamella phaeosphora UCP 1303 isolados do solo da Caatinga. Os microrganismos foram mantidos em meio sólido mineral específico contendo queratina extraída de penas de ave como única fonte de Carbono e Nitrogênio por 15 dias e usado posteriormente na fermentação submersa para a determinação quantitativa da produção enzimática. O cultivo foi realizado durante 15 dias, a 28°C em agitador orbital a 150 rpm. A cada três dias foram retiradas alíquotas para avaliar a concentração proteica, atividade queratinolítica e variação do pH durante a produção. Os isolados apresentaram uma elevada atividade específica de 84,1 U/mg para C. echinulata UCP 1299 no 9º dia de cultivo e de 96,2 U/mg para C. phaeosphoraUCP 1303 no 6º dia de cultivo, onde ambos extratos brutosforam utilizados para a caracterização parcial da enzima. As queratinases da C. echinulata UCP 1299e C. phaeosphora UCP 1303apresentaram valores com maior atividade no pH e temperatura de 8,0 e 28ºC – 45ºC; 9,0 e 35ºC – 55ºC, respectivamente. As queratinases, com massa molecular de aproximadamente 35 KDa foram purificadas por cromatografia de afinidade empregando partículas do compósito magnetita-queratina obtendo um fator de purificação de 37,4% e 44,1% para C. echinulata UCP 1299e C. phaeosphora UCP 1303 respectivamente. Deste modo, ambos os microrganismos podem ser utilizadospara produzir queratinase que pode ser purificada por afinidade utilizando a queratina magnetizada. Advisors/Committee Members: CARVALHO JUNIOR, Luiz Bezerra de (advisor), NASCIMENTO, Aline Elesbão do (advisor), http://lattes.cnpq.br/6466300269003304 (advisor).

Subjects/Keywords: Enzimas; Enzimas de fungos

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APA (6^th Edition):

MAHNKE, L. C. (2015). Produção e purificação de queratinases empregando micropartículas de magnetita-queratina . (Masters Thesis). Universidade Federal de Pernambuco. Retrieved from https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/24270

Chicago Manual of Style (16^th Edition):

MAHNKE, Layla Carvalho. “Produção e purificação de queratinases empregando micropartículas de magnetita-queratina .” 2015. Masters Thesis, Universidade Federal de Pernambuco. Accessed February 25, 2021. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/24270.

MLA Handbook (7^th Edition):

MAHNKE, Layla Carvalho. “Produção e purificação de queratinases empregando micropartículas de magnetita-queratina .” 2015. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

MAHNKE LC. Produção e purificação de queratinases empregando micropartículas de magnetita-queratina . [Internet] [Masters thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2015. [cited 2021 Feb 25]. Available from: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/24270.

Council of Science Editors:

MAHNKE LC. Produção e purificação de queratinases empregando micropartículas de magnetita-queratina . [Masters Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2015. Available from: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/24270

Universidade Estadual de Campinas

2. Comerlato, Maria Helena. Imobilização de enzimas no suporte crisotila.

Degree: 1995, Universidade Estadual de Campinas

URL: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/250465

Subjects/Keywords: Enzimas

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Comerlato, M. H. (1995). Imobilização de enzimas no suporte crisotila. (Thesis). Universidade Estadual de Campinas. Retrieved from http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/250465

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Comerlato, Maria Helena. “Imobilização de enzimas no suporte crisotila.” 1995. Thesis, Universidade Estadual de Campinas. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/250465.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Comerlato, Maria Helena. “Imobilização de enzimas no suporte crisotila.” 1995. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Comerlato MH. Imobilização de enzimas no suporte crisotila. [Internet] [Thesis]. Universidade Estadual de Campinas; 1995. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/250465.

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Council of Science Editors:

Comerlato MH. Imobilização de enzimas no suporte crisotila. [Thesis]. Universidade Estadual de Campinas; 1995. Available from: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/250465

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3. NASCIMENTO, Thiago Pajeú. Purificação e caracterização de proteases fibrinolíticas produzidas por Mucor subtilissimus UCP 1262 para possível aplicação na terapia trombolítica .

Degree: 2018, Universidade Federal de Pernambuco

URL: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/31913

► A utilização de enzimas proteolíticas em aplicações terapêuticas tem sido um dos objetivos da indústria farmacêutica nos últimos anos. Entre as várias proteases utilizadas em… (more)

▼ A utilização de enzimas proteolíticas em aplicações terapêuticas tem sido um dos objetivos da indústria farmacêutica nos últimos anos. Entre as várias proteases utilizadas em terapias, destacam-se as proteases fibrinolíticas, que são enzimas capazes de degradar à fibrina, principal componente do coágulo sanguíneo. Há uma crescente busca por metodologias eficazes e de baixo custo para a purificação dessas enzimas, uma vez que qualquer fármaco necessita de um alto grau de pureza e especificidade para evitar reações imunológicas. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi purificar proteases fibrinolíticas produzidas por Mucor Subtilissimus UCP 1262 através de sistema de duas fases aquosas e métodos cromatográficos, além de caracterizá-las bioquímica e estruturalmente. Um planejamento fatorial completo do tipo 2 ³ e a metodologia de superfície de resposta foram usados para identificar as condições ótimas para a extração de uma protease fibrinolítica por sistema de duas fases aquosas, enquanto métodos cromatográficos tradicionais foram utilizados para purificar outra protease fibrinolítica. A primeira enzima foi recuperada e purificada parcialmente por sistemas de duas fases aquosas constituídos por polietilenoglicol (PEG) e sulfato de sódio, onde a melhor condição a do sistema formado por 30,0% (m/m) de PEG 6000g/mol e 13,2% (m/m) de sulfato de sódio, que assegurou um fator de purificação de 10,um coeficiente de partição de 0,2 e uma recuperação de 102,0%. A SDS-PAGE e o zimograma de fibrina revelaram que essa protease fibrinolítica purificada tem uma massa molecular de 97 kDa e um ponto isoelétrico de 5,4 e é uma serino protease semelhante a quimotripsina. A temperatura ótima da enzima foi de 37ºC e sua atividade foi estável por 150 minutos. A outra protease fibrinolítica foi pré-purificada inicialmente através de precipitação com sulfato de amônio (40 – 60% de saturação) e posteriormente através de cromatografia de troca iônica (DEAE-Sephadex A50) e gel filtração (Superdex 75 HR10/300) e igualmente caracterizada como serino protease do tipo quimiotripsina, com uma massa molecular de 20 kDa, um ponto isoelétrico de 4,94,e temperatura e pH ótimos de 40°C e 8,0 respectivamente. Sua atividade proteásica foi aumentada na presença de Cu²⁺, Mg²⁺ e Fe²⁺ e sua estrutura secundária mostrou alta composição de α-hélice e nenhuma mudança significativa após exposição à presença de polímeros ou da maioria de agentes desnaturantes. Este estudo demonstra a possibilidade de purificar proteases fibrinolíticas com baixo custo e de considerá-las como potenciais candidatos a agentes trombolíticos. Advisors/Committee Members: CONVERTI, Attilio (advisor), PORTO, Ana Lúcia Figueiredo (advisor), http://lattes.cnpq.br/3423653074671287 (advisor).

Subjects/Keywords: Enzimas proteolíticas

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NASCIMENTO, T. P. (2018). Purificação e caracterização de proteases fibrinolíticas produzidas por Mucor subtilissimus UCP 1262 para possível aplicação na terapia trombolítica . (Doctoral Dissertation). Universidade Federal de Pernambuco. Retrieved from https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/31913

Chicago Manual of Style (16^th Edition):

NASCIMENTO, Thiago Pajeú. “Purificação e caracterização de proteases fibrinolíticas produzidas por Mucor subtilissimus UCP 1262 para possível aplicação na terapia trombolítica .” 2018. Doctoral Dissertation, Universidade Federal de Pernambuco. Accessed February 25, 2021. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/31913.

MLA Handbook (7^th Edition):

NASCIMENTO, Thiago Pajeú. “Purificação e caracterização de proteases fibrinolíticas produzidas por Mucor subtilissimus UCP 1262 para possível aplicação na terapia trombolítica .” 2018. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

NASCIMENTO TP. Purificação e caracterização de proteases fibrinolíticas produzidas por Mucor subtilissimus UCP 1262 para possível aplicação na terapia trombolítica . [Internet] [Doctoral dissertation]. Universidade Federal de Pernambuco; 2018. [cited 2021 Feb 25]. Available from: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/31913.

Council of Science Editors:

NASCIMENTO TP. Purificação e caracterização de proteases fibrinolíticas produzidas por Mucor subtilissimus UCP 1262 para possível aplicação na terapia trombolítica . [Doctoral Dissertation]. Universidade Federal de Pernambuco; 2018. Available from: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/31913

4. López-López, Olalla. Búsqueda de enzimas lipolíticas termófilas y expresión en microorganismos mesófilos .

Degree: 2015, Universidad da Coruña

URL: http://hdl.handle.net/2183/14799

► [Resumen] El descubrimiento de enzimas lipolfticas con nuevas y/o mejores características es dave para la optimización de biotransformaciones de interés industrial o biotecnológico. Las enzimas… (more)

Subjects/Keywords: Enzimas; Genoteca

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APA (6^th Edition):

López-López, O. (2015). Búsqueda de enzimas lipolíticas termófilas y expresión en microorganismos mesófilos . (Doctoral Dissertation). Universidad da Coruña. Retrieved from http://hdl.handle.net/2183/14799

Chicago Manual of Style (16^th Edition):

López-López, Olalla. “Búsqueda de enzimas lipolíticas termófilas y expresión en microorganismos mesófilos .” 2015. Doctoral Dissertation, Universidad da Coruña. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/2183/14799.

MLA Handbook (7^th Edition):

López-López, Olalla. “Búsqueda de enzimas lipolíticas termófilas y expresión en microorganismos mesófilos .” 2015. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

López-López O. Búsqueda de enzimas lipolíticas termófilas y expresión en microorganismos mesófilos . [Internet] [Doctoral dissertation]. Universidad da Coruña; 2015. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/2183/14799.

Council of Science Editors:

López-López O. Búsqueda de enzimas lipolíticas termófilas y expresión en microorganismos mesófilos . [Doctoral Dissertation]. Universidad da Coruña; 2015. Available from: http://hdl.handle.net/2183/14799

Universidad Andrés Bello

5. Barrientos Rios, Victoria. Clonamiento y expresión heteróloga de tres genes que codifican para enzimas del tipo lipasa y proteasa, relacionadas con la actividad nematicida de Pseudomonas veronii R4 .

Degree: 2017, Universidad Andrés Bello

URL: http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/4205

► Pseudomonas veronii R4 es un nuevo aislado bacteriano que ha sido identificado previamente desde un panel de Pseudomonas ssp. fluorescentes con actividad nematicida. En particular,… (more)

▼ Pseudomonas veronii R4 es un nuevo aislado bacteriano que ha sido identificado previamente desde un panel de Pseudomonas ssp. fluorescentes con actividad nematicida. En particular, P. veronii R4, presenta actividad nematicida contra el fitopatógeno Xiphinema index, nematodo de importancia comercial en viticultura, debido a que es el principal vector del virus de la hoja en abanico de la vid (GFLV). Tras su caracterización y secuenciación de su genoma, se ha propuesto que esta actividad antagonista sobre X. index se debería a una batería enzimática que consiste en al menos una proteasa (AprA), una lipasa (LipA) y una fosfolipasa (ExoU). Con el objetivo de evaluar y confirmar la actividad nematicida de estas enzimas, en este trabajo de Tesis se clonaron los genes aprA, lipA y exoU (que codifican para las enzimas antes mencionadas) en vectores de entrada y expresión de la serie Gateway, utilizando como hospedero heterólogo la bacteria Escherichia coli BL21(DE3). La sobreexpresión de las proteínas recombinantes en el sistema de expresión produjo agregados de proteínas recombinantes, las cuales se debieron solubilizar y renaturalizar. Ensayos enzimáticos de extractos de enzimas recombinantes, AprA, LipA y ExoU, en los sustratos gelatina, tributirina y sangre, respectivamente, evidenciaron la funcionalidad de estas enzimas. Finalmente, la exposición de X. index frente a los extractos de proteínas enriquecidos con las enzimas AprA (500 μg/mL), LipA (50 μg/mL) y ExoU (50 μg/mL) recombinantes provocaron pérdida de movilidad mayor a 90% después de 2 h de incubación a temperatura ambiente, evaluado a través de ensayos in vitro. Concordantemente, se observaron, mediante microscopia electrónica de barrido, daños estructurales en la cutícula, deshidratación y exposición de tejidos internos de los nematodos expuestos a los extractos de enzimas recombinantes. Los resultados obtenidos permiten confirmar que la actividad nematicida de la bacteria es causada por al menos las enzimas AprA, LipA y ExoU de R4, lo que además representa proyecciones de estas enzimas para su aplicación biotecnológica.; Pseudomonas veronii R4 is a new bacterial isolate that has been previously identified from a panel of fluorescent Pseudomonas ssp. with nematicidal activity. In particular , P. veronii R4, has nematicidal activity against the phytopathogen Xiphinema index, a nematode of commercial importance in viticulture, because it is the main vector of the grapevine fanleaf virus in the vine (GFLV). After characterization and sequencing of its genome, it has been proposed that this antagonistic activity on X. index would be due to an enzymatic battery consisting of at least one protease (AprA), a lipase (LipA) and a phospholipase (ExoU). In order to evaluate and confirm the nematicidal activity of these enzymes, in this Thesis , the genes aprA, lipA and exoU (encoding the aforementioned enzymes) were cloned into input and expression vectors of the Gateway serie system , using the bacterium Escherichia coli BL21 (DE3) as an heterologous host .The… Advisors/Committee Members: Prieto, Humberto (advisor).

Subjects/Keywords: Pseudomonas; Enzimas

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Barrientos Rios, V. (2017). Clonamiento y expresión heteróloga de tres genes que codifican para enzimas del tipo lipasa y proteasa, relacionadas con la actividad nematicida de Pseudomonas veronii R4 . (Thesis). Universidad Andrés Bello. Retrieved from http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/4205

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Barrientos Rios, Victoria. “Clonamiento y expresión heteróloga de tres genes que codifican para enzimas del tipo lipasa y proteasa, relacionadas con la actividad nematicida de Pseudomonas veronii R4 .” 2017. Thesis, Universidad Andrés Bello. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/4205.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Barrientos Rios, Victoria. “Clonamiento y expresión heteróloga de tres genes que codifican para enzimas del tipo lipasa y proteasa, relacionadas con la actividad nematicida de Pseudomonas veronii R4 .” 2017. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Barrientos Rios V. Clonamiento y expresión heteróloga de tres genes que codifican para enzimas del tipo lipasa y proteasa, relacionadas con la actividad nematicida de Pseudomonas veronii R4 . [Internet] [Thesis]. Universidad Andrés Bello; 2017. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/4205.

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Council of Science Editors:

Barrientos Rios V. Clonamiento y expresión heteróloga de tres genes que codifican para enzimas del tipo lipasa y proteasa, relacionadas con la actividad nematicida de Pseudomonas veronii R4 . [Thesis]. Universidad Andrés Bello; 2017. Available from: http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/4205

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Universidad Autónoma de Madrid

6. Temes Zafrilla, Elisa. Los sensores de oxígeno como dianas terapéuticas: activación farmacológica de las hidrozilasas de HIF .

Degree: 2005, Universidad Autónoma de Madrid

URL: http://hdl.handle.net/10486/10686

Subjects/Keywords: Enzimas

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Temes Zafrilla, E. (2005). Los sensores de oxígeno como dianas terapéuticas: activación farmacológica de las hidrozilasas de HIF . (Thesis). Universidad Autónoma de Madrid. Retrieved from http://hdl.handle.net/10486/10686

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Temes Zafrilla, Elisa. “Los sensores de oxígeno como dianas terapéuticas: activación farmacológica de las hidrozilasas de HIF .” 2005. Thesis, Universidad Autónoma de Madrid. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10486/10686.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Temes Zafrilla, Elisa. “Los sensores de oxígeno como dianas terapéuticas: activación farmacológica de las hidrozilasas de HIF .” 2005. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Temes Zafrilla E. Los sensores de oxígeno como dianas terapéuticas: activación farmacológica de las hidrozilasas de HIF . [Internet] [Thesis]. Universidad Autónoma de Madrid; 2005. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10486/10686.

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Council of Science Editors:

Temes Zafrilla E. Los sensores de oxígeno como dianas terapéuticas: activación farmacológica de las hidrozilasas de HIF . [Thesis]. Universidad Autónoma de Madrid; 2005. Available from: http://hdl.handle.net/10486/10686

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Universidade Estadual de Campinas

7. Contiero, Jonas. Estudo da produção da enzima invertase extracelular por Kluyveromyces bulgarius.

Degree: 1992, Universidade Estadual de Campinas

URL: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/256533

► Abstract: The main objective of this work was to study the production of enzyme invertase by Kluyveromyces bulgaricus using immobilized cell and free cell fermentations.… (more)

▼ Abstract: The main objective of this work was to study the production of enzyme invertase by Kluyveromyces bulgaricus using immobilized cell and free cell fermentations. Parallel with this, it was studied the influence of the substrates sucrose, glucose and fructose on the kinetics of cell growth and enzyme production. The fermentations were carried out at a temperature of 30°C and with aeration at a level between 0.2 and 0.3 vvm. The best results were obtained utilizing the continuous reactor operating with immobilized cells and a liquid volume of 530 ml. Molasse from sugar cane juice was the carbon source and the nitrogen source was the corn steep liquor. The values found f or enzyme production, and productivity and yield for the various process studied were as follows: for the simple batch process respectively 9.17 U.I./ml, 0.19 U.I./ml.h and 424.34 U.I./g ART; for fed batch 11.0 U.I./ml, 1.3 U.I/ml.h and 883.66 U.I/g ART; for 2 stage continuous culture 32.0 U.I.Xml, 5.30 l).I./ml.h and 1749.60 U.I/g ART; and for continuous culture with immobilized cells 97.3 U.l./ml, 5.74 U.I./ml.h and 5322.97 U.I./g ART. The study of influence on enzyme production confirmed that the enzyme is produced constitutively and is inhibited by excess sucrose, glucose or fructose. Using the technique of graded perturbation in continuous culture, values for umax (specific growth rate) and Ks (Saturation constant) of the microorganism were determined, umax found to be approximately constant at 0,24 h-1 while Ks was found to be 1.4x10-4, 1.15x10-9 and 1.77x10-9 mol/l for sucrose, glucose and fructose respectively. The kinetcs constant umax and Ks for enzyme production were: 3099.51 U.I/gcells.h and 0.0181 mol/l; 5264.8 U.I/gcells.h and 0.0023 mol/l, and 1450.99 U.I./gcells .h and 0.0097 mol/I for sucrose, glucose and fructose respectively. With respect the characterization of the enzyme itself, the deactivation of the energy of the purified enzyme after precipitation with ethanol was 61043 cal/gmol wile after further purification using a DEAE-celulose column was 93861.9 cal/mol For the raw enzyme (after simpy precipitating with ethanol) a Km value of 0.0662 mol/l and Vmax value of 2037U.I./ml Advisors/Committee Members: UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS (CRUESP), Maugeri Filho, Francisco, 1952- (advisor), Filho, Francisco Maugeri (advisor), Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Engenharia de Alimentos (institution), Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos (nameofprogram), Serra, Gil Eduardo (committee member), Hokka, Carlos Osamu (committee member), Santana, Maria Helena Andrade (committee member), Zanin, Gisella Maria (committee member).

Subjects/Keywords: Enzimas; Enzimas - Análise

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Contiero, J. (1992). Estudo da produção da enzima invertase extracelular por Kluyveromyces bulgarius. (Thesis). Universidade Estadual de Campinas. Retrieved from http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/256533

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Contiero, Jonas. “Estudo da produção da enzima invertase extracelular por Kluyveromyces bulgarius.” 1992. Thesis, Universidade Estadual de Campinas. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/256533.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Contiero, Jonas. “Estudo da produção da enzima invertase extracelular por Kluyveromyces bulgarius.” 1992. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Contiero J. Estudo da produção da enzima invertase extracelular por Kluyveromyces bulgarius. [Internet] [Thesis]. Universidade Estadual de Campinas; 1992. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/256533.

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Not specified: Masters Thesis or Doctoral Dissertation

Council of Science Editors:

Contiero J. Estudo da produção da enzima invertase extracelular por Kluyveromyces bulgarius. [Thesis]. Universidade Estadual de Campinas; 1992. Available from: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/256533

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8. BARROS, Priscila Danielly Santos de. Purificação e caracterização de enzimas fibrinolíticas obtidas de Arthrospira platensis .

Degree: 2018, Universidade Federal de Pernambuco

URL: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/32890

► Uma das principais causas de morbidade e mortalidade em todo o mundo são as doenças cardiovasculares (DCV) que estão intimamente associadas com a formação desordenada… (more)

▼ Uma das principais causas de morbidade e mortalidade em todo o mundo são as doenças cardiovasculares (DCV) que estão intimamente associadas com a formação desordenada de coágulos sanguíneos. A terapia fibrinolítica é um tratamento padrão para estas desordens, entretanto as enzimas fibrinolíticas atualmente utilizadas possuem efeitos colaterais indesejáveis. Neste sentido, a busca por novas enzimas fibrinolíticas mais seguras e com menos efeitos colaterais têm recebido atenção. Estudos demonstraram a utilização de microrganismos fotossintetizantes para produção de enzimas fibrinolíticas. Estes microrganismos são importantes fontes de substâncias ativas para o tratamento de várias doenças, incluindo Arthrospira platensis que têm sido amplamente utilizada na aplicação de cosméticos e produtos farmacêuticos. À vista disso, este trabalho teve como finalidade purificar e caracterizar proteases fibrinolíticas produzidas pela cianobactéria, Arthrospira platensis. O microrganismo foi cultivado em meio Schlösser sem nitrato de sódio (NaNO3) e suplementado com 0,2% de milhocina com uma concentração celular inicial de 50 mg/L, 30 ± 2 ºC e 45 ± 5 μmol de fótons m⁻²s⁻¹. A extração da enzima fibrinolítica foi realizada por homogeneização de 50 mg/mL da biomassa liofilizada em tampão Tris-HCl 20 mM, pH 8,0, durante 30 minutos à temperatura ambiente (30 ± 2 °C). A proteína foi precipitada utilizando 70% (m/v) de sulfato de amônio e purificada utilizando dois passos cromatográficos, cromatografia de troca iônica (DEAE-Shephadex) e gel filtração (Superdex 75). A enzima purificada foi então utilizada para avaliação da sua massa molecular por métodos eletroforéticos, caracterização bioquímica quanto a temperatura e ao pH ótimos, estabilidade enzimática à temperatura e ao pH, avaliação do efeito de íons e surfactantes na atividade fibrinolítca e classificação quanto ao tipo de enzima proteolítica. A enzima fibrinolítica purificada apresentou aumento de 32,72 vezes no fator de purificação e recuperação de 28,85% em relação às proteínas do extrato bruto inicial, além de massa molar equivalente a 72,6 kDa e atividade fibrinolítica específica de 7988,34 U/mg. Esta exibiu uma temperatura ótima de 40 ºC e foi estável nesta temperatura por 150 minutos e pH ótimo de 6,0, e maior estabilidade no pH 7,0, no qual manteve sua atividade por 24 horas. A enzima mostrou aumento da atividade específica na presença de íons (Fe²⁺, Zn²⁺ K⁺) e surfactantes (Triton X-100), tendo a atividade enzimática completamente inibida na presença de PMSF, indicando ser uma serino protease. O zimograma utilizando fibrina como substrato específico evidenciou que a enzima fibrinolítica estudada atua de forma semelhante a plasmina, apresentando especificidade pela fibrina. Portanto, esta enzima fibrinolítica (72,6 kDa) representa um possível agente terapêutico para utilização no tratamento de doenças trombolíticas como infarto do miocárdio, doenças cardíacas isquêmicas, trombose venosa profunda e tromboembolismo venoso. Advisors/Committee Members: PORTO, Ana Lúcia Figueiredo (advisor), BEZERRA, Raquel Pedrosa (advisor), http://lattes.cnpq.br/4989617783837981 (advisor).

Subjects/Keywords: Enzimas; Enzimas microbianas; Sistema cardiovascular – Doenças; Trombose

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APA (6^th Edition):

BARROS, P. D. S. d. (2018). Purificação e caracterização de enzimas fibrinolíticas obtidas de Arthrospira platensis . (Masters Thesis). Universidade Federal de Pernambuco. Retrieved from https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/32890

Chicago Manual of Style (16^th Edition):

BARROS, Priscila Danielly Santos de. “Purificação e caracterização de enzimas fibrinolíticas obtidas de Arthrospira platensis .” 2018. Masters Thesis, Universidade Federal de Pernambuco. Accessed February 25, 2021. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/32890.

MLA Handbook (7^th Edition):

BARROS, Priscila Danielly Santos de. “Purificação e caracterização de enzimas fibrinolíticas obtidas de Arthrospira platensis .” 2018. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

BARROS PDSd. Purificação e caracterização de enzimas fibrinolíticas obtidas de Arthrospira platensis . [Internet] [Masters thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2018. [cited 2021 Feb 25]. Available from: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/32890.

Council of Science Editors:

BARROS PDSd. Purificação e caracterização de enzimas fibrinolíticas obtidas de Arthrospira platensis . [Masters Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2018. Available from: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/32890

9. ALBERTINI, Alessandro Patrício de. Desenvolvimento de cerâmica a partir das cinzas volantes de carvão mineral para imobilização de enzimas .

Degree: 2010, Universidade Federal de Pernambuco

URL: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/16669

► Suportes vítreo-cerâmicos foram desenvolvidos a partir da sinterização das cinzas volantes de carvão mineral da Termelétrica Presidente Medici, Candiota-RS/Brasil para imobilização covalente de enzimas. A… (more)

▼ Suportes vítreo-cerâmicos foram desenvolvidos a partir da sinterização das cinzas volantes de carvão mineral da Termelétrica Presidente Medici, Candiota-RS/Brasil para imobilização covalente de enzimas. A enzima invertase (β-fructofuranosidase, E.C. 3.2.1.26) foi tomada como exemplo. Invertase foi covalentemente imobilizada em suportes cerâmicos de vidro (GCS), obtida a partir de cinzas volantes de carvão (CFA) com polivinilpirrolidona (PVP) e estearato de magnésio adicionado como aditivo temporário. As amostras GCS contendo Pb (CH3COO) 2 , (GCSPb ) ou ZnSO4 (GCSZn) foram obtidos em várias temperaturas de sinterização ( 1000-1200 °C ) e tempos (1-3 h) . Os valores aparentes de porosidade, absorção de água, densidade e resistência à compressão uniaxial foram estudados por planejamento fatorial e diferenças morfológicas por microscopia eletrônica de varredura. A melhor covalente imobilizado derivado invertase foi em GCSZn (1200 °C / 1 h ) com 4398 ± 59,75 U / g GCS. No entanto, 95,83 % de actividade invertase imobilizada foi obtido usando um protocolo económico com a concentração de 0,636 mM de 3- aminopropiltrietoxi -silano (3-APTES ) e 0,576 mM de glutaraldeído. O derivado GCSZn-invertase manteve 100% da atividade inicial após nove reutilizações (5.476,19 ± 155,49 U / g GCSZn). O derivado escolhido contendo a cerâmica com enzima ligada covalentemente (invertase-GCSZn) foi demonstrada por difracção de raios - X (XRD). Não houve qualquer alteração no pH óptimo (4.6) , mas aumentou a temperatura óptima de 55 °C para a invertase livre a 60 °C durante derivado imobilizado . A energia de ativação diminuiu após a imobilização (37,31 ± 3,40 kJ / mol) , apesar de invertase livre ( 51,34 ± 5,21 kJ / mol). Houve uma melhora na constante de Michaelis -Menten para hidrólise de sacarose após a imobilização ser 15 vezes menor em relação ao de invertase livre (0,30 ± 0,01 mmol). Após dez reutilizações a 25 ± 2 °C , a invertase imobilizada perdeu apenas 9 % da actividade inicial , mas à temperatura óptima ( 60 °C ) , a redução atividade foi cerca de 70 % , o que é economicamente viável sob o ponto de vista energético para aplicação industrial. De acordo com as propriedades físicas obtidas em cerâmica que foi preparada com álcool polivinílico foi também desenvolvida para ser testadas em um inédito sistema de fluxo contínuo. Esse sistema permitiu a desestabilização de caminhos preferenciais ou “zonas mortas” da solução de sacarose entre cerâmicas no bioreator e nas suas regiões interiores; permitindo assim, uma melhor performance do biocatalisador imobilizado e consequentemente a total hidrólise da sacarose em menor tempo de reação. A cerâmica obtida do resíduo, cinzas volantes de carvão mineral, mostrou ser uma alternativa biotecnológica promissora como suporte de imobilização invertase para a produção de açúcar invertido e devendo ser usada para imobilização outras enzimas de interesse industrial. Advisors/Committee Members: LIMA FILHO, José Luiz de (advisor).

Subjects/Keywords: Biotecnologia; Enzimas; Cerâmica

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APA (6^th Edition):

ALBERTINI, A. P. d. (2010). Desenvolvimento de cerâmica a partir das cinzas volantes de carvão mineral para imobilização de enzimas . (Thesis). Universidade Federal de Pernambuco. Retrieved from http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/16669

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

ALBERTINI, Alessandro Patrício de. “Desenvolvimento de cerâmica a partir das cinzas volantes de carvão mineral para imobilização de enzimas .” 2010. Thesis, Universidade Federal de Pernambuco. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/16669.

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MLA Handbook (7^th Edition):

ALBERTINI, Alessandro Patrício de. “Desenvolvimento de cerâmica a partir das cinzas volantes de carvão mineral para imobilização de enzimas .” 2010. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

ALBERTINI APd. Desenvolvimento de cerâmica a partir das cinzas volantes de carvão mineral para imobilização de enzimas . [Internet] [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2010. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/16669.

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Council of Science Editors:

ALBERTINI APd. Desenvolvimento de cerâmica a partir das cinzas volantes de carvão mineral para imobilização de enzimas . [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2010. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/16669

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10. Homero Campos Marinho, Petrusk. Efeito do Pireno no crescimento, na morfologia e na produção de enzimas em Rhodotorula sp .

Degree: 2009, Universidade Federal de Pernambuco

URL: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1690

► Rhodotorula mucilaginosa UCP 1003 foi cultivada em meio de cultura Yeast Mold Broth (YMB) na ausência e presença de pireno nas concentrações de 0,25 mg/mL,… (more)

Subjects/Keywords: Rhodotorula; Enzimas; Ultraestrutura

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APA (6^th Edition):

Homero Campos Marinho, P. (2009). Efeito do Pireno no crescimento, na morfologia e na produção de enzimas em Rhodotorula sp . (Thesis). Universidade Federal de Pernambuco. Retrieved from http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1690

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Homero Campos Marinho, Petrusk. “Efeito do Pireno no crescimento, na morfologia e na produção de enzimas em Rhodotorula sp .” 2009. Thesis, Universidade Federal de Pernambuco. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1690.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Homero Campos Marinho, Petrusk. “Efeito do Pireno no crescimento, na morfologia e na produção de enzimas em Rhodotorula sp .” 2009. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Homero Campos Marinho P. Efeito do Pireno no crescimento, na morfologia e na produção de enzimas em Rhodotorula sp . [Internet] [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2009. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1690.

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Council of Science Editors:

Homero Campos Marinho P. Efeito do Pireno no crescimento, na morfologia e na produção de enzimas em Rhodotorula sp . [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2009. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1690

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11. Fontana, Roselei Claudete. Estudo da produção de poligalacturonases em processo submerso em biorreatores de agitação mecânica e airlift.

Degree: 2009, Universidade de Caxias do Sul

URL: https://repositorio.ucs.br/handle/11338/393

► Nesse trabalho, foi estudada a produção de endo e exo-poligalacturonases (PG) por Aspergillus oryzae IPT 301, em biorreatores com agitação mecânica (STR) e airlift de… (more)

▼ Nesse trabalho, foi estudada a produção de endo e exo-poligalacturonases (PG) por Aspergillus oryzae IPT 301, em biorreatores com agitação mecânica (STR) e airlift de circulação interna e externa em escala de bancada. Utilizando um planejamento experimental, foi definida uma formulação de meio isento de sólidos em suspensão (WBE), com o qual foram obtidas atividades máximas de endo e exo-PG comparáveis com as atingidas com um meio formulado com farelo de trigo integral. Com o meio WBE, a produção de PG foi comparada em STR e airlift de circulação interna. Nesses ensaios, foram alcançadas atividades superiores de endo-PG (91,3 unidades por mililitro de meio, U/mL) e exo-PG (65,2 U/mL) com o STR, enquanto que com o biorreator airlift as atividades máximas de endo-PG e exo-PG foram 86,2 U/mL e 60,6 U/mL, respectivamente. Esses resultados demonstram a viabilidade do emprego da configuração airlift na produção de poligalacturonases por A. oryzae. Em cultivos em STR, foi avaliada a influência da presença, no meio WBE, de diferentes concentrações de pectina (0, 10 e 20 g/L) e glicose (0, 5, 10, 15, 20, 25 e 30 g/L) sobre o processo. Adicionalmente, em meios contendo 20 g/L de pectina e 20, 30 e 50 g/L de glicose, o pH foi controlado em um valor mínimo de 2,7. Nos testes em que o pH foi controlado nesse valor mínimo, foi observado um forte incremento das atividades de endo e exo-PG, destacando-se a concentração de glicose de 30 g/L com a qual atividades enzimáticas de 175,0 U/mL de endo-PG e 103,0 U/mL de exo-PG foram obtidas. Em STR, foram ainda testados meios de cultivo formulados com pectina em sua forma normal (WBE) e pectina que sofreu hidrólise enzimática parcial, com o fim de promover a redução da viscosidade do meio e, dessa forma, favorecer a transferência de oxigênio para o cultivo. Numa das condições testadas (WBE5), o meio foi formulado com metade da pectina parcialmente hidrolisada e com a outra metade não tratada. Nessa condição, atividades de endo-PG de 149,0 U/mL e de exo-PG de 82,2 U/mL foram obtidas, enquanto que com o uso do meio com a pectina integral atividades estatisticamente inferiores 130,0 e 78,0 U/mL, respectivamente foram determinadas. A produção de PG foi avaliada na condição WBE5 e na condição WBE6, com pectina não hidrolisada, em que os sais nutrientes foram adicionados parceladamente ao meio durante o cultivo, em biorreatores STR e airlift de circulação interna e externa. Após 96 h de processo, atividade superior de endo-PG (145,0 U/mL) foi atingida no STR, na condição WBE5, seguindo-se a condição WBE6 (140,0 U/mL) no mesmo reator. Em biorreatores airlift, títulos superiores de endo-PG (116,0 U/mL) e exo-PG (80,4 U/mL) foram atingidos no sistema de circulação externa, na condição WBE6, observando-se, para exo-PG, atividade semelhante à obtida no STR. O processo foi avaliado em meios com diferentes concentrações de KH2PO4, (NH4)2SO4, FeSO4, MnSO4, MgSO4 e ZnSO4. Em análises individuais de cada um desses sais, em ensaios em frascos agitados, evidenciou-se a influência nas concentrações de… Advisors/Committee Members: Silveira, Maurício Moura da.

Subjects/Keywords: BIOQUIMICA; Enzimas; Pectinase

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APA (6^th Edition):

Fontana, R. C. (2009). Estudo da produção de poligalacturonases em processo submerso em biorreatores de agitação mecânica e airlift. (Doctoral Dissertation). Universidade de Caxias do Sul. Retrieved from https://repositorio.ucs.br/handle/11338/393

Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Fontana, Roselei Claudete. “Estudo da produção de poligalacturonases em processo submerso em biorreatores de agitação mecânica e airlift.” 2009. Doctoral Dissertation, Universidade de Caxias do Sul. Accessed February 25, 2021. https://repositorio.ucs.br/handle/11338/393.

MLA Handbook (7^th Edition):

Fontana, Roselei Claudete. “Estudo da produção de poligalacturonases em processo submerso em biorreatores de agitação mecânica e airlift.” 2009. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Fontana RC. Estudo da produção de poligalacturonases em processo submerso em biorreatores de agitação mecânica e airlift. [Internet] [Doctoral dissertation]. Universidade de Caxias do Sul; 2009. [cited 2021 Feb 25]. Available from: https://repositorio.ucs.br/handle/11338/393.

Council of Science Editors:

Fontana RC. Estudo da produção de poligalacturonases em processo submerso em biorreatores de agitação mecânica e airlift. [Doctoral Dissertation]. Universidade de Caxias do Sul; 2009. Available from: https://repositorio.ucs.br/handle/11338/393

12. Souza, Jean Ricardo de, 1985- ; Wendhausen Júnior, Renato, 1958- ; Jesus, Paulo César de, 1967- . Avaliação dos pré-tratamentos ácido, básico e enzimático sobre a sacarificação da casca de arroz e sua influência no rendimento de açúcares.

Degree: 2013, Universidade Regional de Blumenau

URL: http://www.bc.furb.br/docs/DS/2013/354567_1_1.pdf

Orientador: Renato Wendhausen Jr..

Co-orientador: Paulo Cesar de Jesus.

Dissertação (mestrado) - Universidade Regional Blumenau, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Programa de Pós-Graduação em Química.

Subjects/Keywords: Fermentação; Enzimas; Açúcar

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APA (6^th Edition):

Souza, Jean Ricardo de, 1985- ; Wendhausen Júnior, Renato, 1958- ; Jesus, Paulo César de, . 1. (2013). Avaliação dos pré-tratamentos ácido, básico e enzimático sobre a sacarificação da casca de arroz e sua influência no rendimento de açúcares. (Masters Thesis). Universidade Regional de Blumenau. Retrieved from http://www.bc.furb.br/docs/DS/2013/354567_1_1.pdf

Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Souza, Jean Ricardo de, 1985- ; Wendhausen Júnior, Renato, 1958- ; Jesus, Paulo César de, 1967-. “Avaliação dos pré-tratamentos ácido, básico e enzimático sobre a sacarificação da casca de arroz e sua influência no rendimento de açúcares.” 2013. Masters Thesis, Universidade Regional de Blumenau. Accessed February 25, 2021. http://www.bc.furb.br/docs/DS/2013/354567_1_1.pdf.

MLA Handbook (7^th Edition):

Souza, Jean Ricardo de, 1985- ; Wendhausen Júnior, Renato, 1958- ; Jesus, Paulo César de, 1967-. “Avaliação dos pré-tratamentos ácido, básico e enzimático sobre a sacarificação da casca de arroz e sua influência no rendimento de açúcares.” 2013. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Souza, Jean Ricardo de, 1985- ; Wendhausen Júnior, Renato, 1958- ; Jesus, Paulo César de 1. Avaliação dos pré-tratamentos ácido, básico e enzimático sobre a sacarificação da casca de arroz e sua influência no rendimento de açúcares. [Internet] [Masters thesis]. Universidade Regional de Blumenau; 2013. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://www.bc.furb.br/docs/DS/2013/354567_1_1.pdf.

Council of Science Editors:

Souza, Jean Ricardo de, 1985- ; Wendhausen Júnior, Renato, 1958- ; Jesus, Paulo César de 1. Avaliação dos pré-tratamentos ácido, básico e enzimático sobre a sacarificação da casca de arroz e sua influência no rendimento de açúcares. [Masters Thesis]. Universidade Regional de Blumenau; 2013. Available from: http://www.bc.furb.br/docs/DS/2013/354567_1_1.pdf

Universidad de Valladolid

13. Prieto Jiménez, Bernarda. Efecto de la administración intravenosa de nigrina B sobre la absorción de minerales, producción de malondialdehido y enzimas antioxidantes.

Degree: 2015, Universidad de Valladolid

URL: http://uvadoc.uva.es/handle/10324/17796

► La nigrina b es una enzima inhibidora de la síntesis de proteínas (rips), que se ha venido estudiando en los últimos años por sus efectos… (more)

Subjects/Keywords: Medicamentos-Administración; Enzimas

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APA (6^th Edition):

Prieto Jiménez, B. (2015). Efecto de la administración intravenosa de nigrina B sobre la absorción de minerales, producción de malondialdehido y enzimas antioxidantes. (Thesis). Universidad de Valladolid. Retrieved from http://uvadoc.uva.es/handle/10324/17796

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Prieto Jiménez, Bernarda. “Efecto de la administración intravenosa de nigrina B sobre la absorción de minerales, producción de malondialdehido y enzimas antioxidantes.” 2015. Thesis, Universidad de Valladolid. Accessed February 25, 2021. http://uvadoc.uva.es/handle/10324/17796.

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Not specified: Masters Thesis or Doctoral Dissertation

MLA Handbook (7^th Edition):

Prieto Jiménez, Bernarda. “Efecto de la administración intravenosa de nigrina B sobre la absorción de minerales, producción de malondialdehido y enzimas antioxidantes.” 2015. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Prieto Jiménez B. Efecto de la administración intravenosa de nigrina B sobre la absorción de minerales, producción de malondialdehido y enzimas antioxidantes. [Internet] [Thesis]. Universidad de Valladolid; 2015. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://uvadoc.uva.es/handle/10324/17796.

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Council of Science Editors:

Prieto Jiménez B. Efecto de la administración intravenosa de nigrina B sobre la absorción de minerales, producción de malondialdehido y enzimas antioxidantes. [Thesis]. Universidad de Valladolid; 2015. Available from: http://uvadoc.uva.es/handle/10324/17796

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14. MORAIS, Marciana Bizerra de. Proteômica diferencial e resposta do metabolismo antioxidativo no potencial fitorremediador de Lemnaceae .

Degree: 2017, Universidade Federal de Pernambuco

URL: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/25143

► As lentilhas-d'água são plantas capazes de crescer densamente na superfície das águas, gerando rápida produção de biomassa com alto teor de proteínas e amido. Além… (more)

▼ As lentilhas-d'água são plantas capazes de crescer densamente na superfície das águas, gerando rápida produção de biomassa com alto teor de proteínas e amido. Além disso, apresenta características naturais relevantes para estudos de biologia e biotecnologia de plantas e aplicações práticas, como exemplo, o estresse salino que é capaz de induzir a produção e armazenamento de amido em níveis elevados. Por outro lado, a tolerância à salinidade pode contribuir para expandir as aplicações biotecnológicas potenciais destas plantas, as quais apresentam ampla variação intraespecífica. Neste trabalho, objetivou-se identificar mecanismos antioxidativos que favorecem a aclimatação das lentilhas-d’água, visando investigar estratégias de tolerância da espécie ao estresse oxidativo ocasionado pelo estresse salino, bem como a identificação de proteínas significativamente associadas com aplicações biotecnológicas. Análises bioquímicas, fisiológicas e moleculares foram realizadas em quatro clones (M1, U1, RC e DI) da espécie Lemna aequinoctialis submetidos adiferentes concentrações de NaCl (0, 25 e 50 mM). No geral, o estresse estimulou nos clones o acúmulo de amido, açúcares redutores e reduziu o teor dos pigmentos fotossintéticos, além de provocar inibição do crescimento e respostas antioxidantes nos clones submetidos a 50 mM de NaCl. A inibição no crescimento das plantas foi reflexo do estresse oxidativo, evidenciado pelo significativo incremento no conteúdo de malondialdeído (MDA) e peróxido de hidrogênio (H₂O₂). No entanto, os clones M1 e DI cultivados sob estresse moderado (25 mM), apresentaram um incremento na atividade e no acúmulo das enzimas antioxidativas, paralelo a manutenção dos níveis de MDA. Ademais, o clone M1 destacou-se por apresentar maior extração de Na⁺, o que reflete a eficiência da aclimatação. A partir dos dados bioquímicos foram selecionados os clones M1 (mais tolerante) e U1 (mais sensível) para análise proteômica. Os géis bidimensionais apresentaram um total de 188 spots diferencialmente acumulados nos clones M1 e U1 (82 e 106, respectivamente), dos quais 131 (67 em M1 e 64 em U1) foram identificados a partir da análise por espectrometria de massa. Os perfis proteômicos tiveram coeficiente de correlação maior que 0,90. As proteínas responsivas ao estresse salino foram principalmente associadas à produção de energia, aos componentes de fotossistemas e indução de resposta a estímulos ambientais, sugerindo a existência de mecanismos de ajuste fisiológico aos fatores do estresse estudado. A redução de crescimento associado à elevada produção de amido indica que estas macrófitas podem se cultivadas sob condições salinas moderadas, podendo ser útil no processo de dessalinização, produzindo matéria-prima potencial para a produção de biocombustíveis, além de boa fonte de proteínas vegetais que pode ser direcionada para outros produtos de interesse, como consumo animal. Advisors/Committee Members: CALSA JUNIOR, Tercilio (advisor), WILLADINO, Lilia Gomes (advisor), http://lattes.cnpq.br/2775650529232362 (advisor).

Subjects/Keywords: Fitorremediação; Lentilha; Enzimas

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APA (6^th Edition):

MORAIS, M. B. d. (2017). Proteômica diferencial e resposta do metabolismo antioxidativo no potencial fitorremediador de Lemnaceae . (Doctoral Dissertation). Universidade Federal de Pernambuco. Retrieved from https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/25143

Chicago Manual of Style (16^th Edition):

MORAIS, Marciana Bizerra de. “Proteômica diferencial e resposta do metabolismo antioxidativo no potencial fitorremediador de Lemnaceae .” 2017. Doctoral Dissertation, Universidade Federal de Pernambuco. Accessed February 25, 2021. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/25143.

MLA Handbook (7^th Edition):

MORAIS, Marciana Bizerra de. “Proteômica diferencial e resposta do metabolismo antioxidativo no potencial fitorremediador de Lemnaceae .” 2017. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

MORAIS MBd. Proteômica diferencial e resposta do metabolismo antioxidativo no potencial fitorremediador de Lemnaceae . [Internet] [Doctoral dissertation]. Universidade Federal de Pernambuco; 2017. [cited 2021 Feb 25]. Available from: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/25143.

Council of Science Editors:

MORAIS MBd. Proteômica diferencial e resposta do metabolismo antioxidativo no potencial fitorremediador de Lemnaceae . [Doctoral Dissertation]. Universidade Federal de Pernambuco; 2017. Available from: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/25143

Universidad de Cantabria

15. Lázaro Pinto, Beatriz. Added-value oils in genetically engineered bacteria: Lípidos de valor añadido en bacterias genéticamente modificadas.

Degree: 2016, Universidad de Cantabria

URL: http://hdl.handle.net/10902/9750

► ABSTRACT: The increasing demand for triacylglycerols (TAGs) together with the unsustainability of its traditional obtainment has motivated strong research efforts towards alternative processes for its… (more)

Subjects/Keywords: Enzimas WS/DGAT

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APA (6^th Edition):

Lázaro Pinto, B. (2016). Added-value oils in genetically engineered bacteria: Lípidos de valor añadido en bacterias genéticamente modificadas. (Doctoral Dissertation). Universidad de Cantabria. Retrieved from http://hdl.handle.net/10902/9750

Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Lázaro Pinto, Beatriz. “Added-value oils in genetically engineered bacteria: Lípidos de valor añadido en bacterias genéticamente modificadas.” 2016. Doctoral Dissertation, Universidad de Cantabria. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10902/9750.

MLA Handbook (7^th Edition):

Lázaro Pinto, Beatriz. “Added-value oils in genetically engineered bacteria: Lípidos de valor añadido en bacterias genéticamente modificadas.” 2016. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Lázaro Pinto B. Added-value oils in genetically engineered bacteria: Lípidos de valor añadido en bacterias genéticamente modificadas. [Internet] [Doctoral dissertation]. Universidad de Cantabria; 2016. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10902/9750.

Council of Science Editors:

Lázaro Pinto B. Added-value oils in genetically engineered bacteria: Lípidos de valor añadido en bacterias genéticamente modificadas. [Doctoral Dissertation]. Universidad de Cantabria; 2016. Available from: http://hdl.handle.net/10902/9750

Universidad Andrés Bello

16. García Mena, Nicole. Re-ingeniería de la B-glucuronidasa de E. coli para aumentar su eficiencia catalitica por codeína-6-glucurónido .

Degree: 2017, Universidad Andrés Bello

URL: http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/6855

► El objetivo del proyecto es mejorar la eficiencia catalítica que posee la enzima Pglucuronidasa de Escherichia coli por codefna-6-glucurónido, a fin de reducir el tiempo… (more)

▼ El objetivo del proyecto es mejorar la eficiencia catalítica que posee la enzima Pglucuronidasa de Escherichia coli por codefna-6-glucurónido, a fin de reducir el tiempo de hidrólisis de éste metabolito en test de doping (actualmente se logra niveles de hidrólisis deseable en 12 horas). Asumiendo que la eficiencia catalítica de la enzima se correlaciona con la energía de unión del ligando en una confonnación catalftica, lo que se busca en esta tesis es generar mutantes que mejoren la afinidad por codeína-6-glucurónido en una confonnación catalltica similar al primer estado de transición del mecanismo catalftico. A modo comparativo, se partió el análisis utilizando también morfina-3-glucurónido, para la cual se conoce que la enzima tiene una eficiencia cataHtica mayor que por codefna-6-glucurónido. En el Protein Data Bank (PDB) se encuentran 6 cristales de la enzima con diversos rangos de resolución y largos de secuencia. Para identificar el confónnero que mejor sirva de templado para nuestros estudios de unión de ligandos en confonnaciones catalíticas, se tomó cada una de las cadenas presentes en los 6 cristales del PDB y se realizó ensayos de acoplamiento molecular ( docking) de cada uno de las cadenas con ligandos conocidos ( codefna-6-glucurónido y morfina- 3-glucurónido) usando el programa Autodock Vina. El procedimiento anterior arrojó la cadena A de la estructura 3LPF como el mejor confónnero a partir del cual se llevó a cabo un proceso in silico de generación de mutaciones simples y múltiples usando Modeller de fonna automatizada. Para seleccionar los residuos del sitio activo que serían mutados se utilizó el mejor modelo de docking de 3LPF cadena A y morfina-3-glucurónido o codefna-6-glucurónido, y se identificó los residuos aminoacfdicos que estaban en proximidad de los ligandos usando VMD. Con la selección de las mejores mutantes simples, se generaron luego mutantes dobles y triples con criterios específicos de selección. Finalmente, evaluamos si las posiciones mutadas que resultan en mejoras en la unión de codefna-6-glucurónido en confonnaciones catalfticas ocurren en sitios con adaptación positiva (aquellos donde las mutaciones no sinónimas priman por sobre las mutaciones sinónimas) o sitios con adaptación negativa (mutaciones sinónimas predominan por sobre las no sinónimas). Existe evidencia en la literatura para otras familias de enzimas que los sitios con adaptación positiva están involucrados en cambios de especificidad de sustrato, por tanto, mutaciones racionales en sitios con adaptación positiva reflejarían de mejor manera la evolución natural que seguiría esta enzima en un organismo confrontado en la naturaleza con el sustrato de nuestro interés. Para cumplir este objetivo, se identificaron miembros caracterizados de la familia Glicosil Hidrolasa 2 a la que pertenece la P-glucuronidasa de Escherichia coli. A partir de estos se generó una red de similitud de secuencias con el fin de identificar otros miembros de la familia a partir de bases de datos públicas de… Advisors/Committee Members: Almonacid, Daniel (advisor).

Subjects/Keywords: Escherichia Coli; Enzimas

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García Mena, N. (2017). Re-ingeniería de la B-glucuronidasa de E. coli para aumentar su eficiencia catalitica por codeína-6-glucurónido . (Thesis). Universidad Andrés Bello. Retrieved from http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/6855

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

García Mena, Nicole. “Re-ingeniería de la B-glucuronidasa de E. coli para aumentar su eficiencia catalitica por codeína-6-glucurónido .” 2017. Thesis, Universidad Andrés Bello. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/6855.

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MLA Handbook (7^th Edition):

García Mena, Nicole. “Re-ingeniería de la B-glucuronidasa de E. coli para aumentar su eficiencia catalitica por codeína-6-glucurónido .” 2017. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

García Mena N. Re-ingeniería de la B-glucuronidasa de E. coli para aumentar su eficiencia catalitica por codeína-6-glucurónido . [Internet] [Thesis]. Universidad Andrés Bello; 2017. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/6855.

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Council of Science Editors:

García Mena N. Re-ingeniería de la B-glucuronidasa de E. coli para aumentar su eficiencia catalitica por codeína-6-glucurónido . [Thesis]. Universidad Andrés Bello; 2017. Available from: http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/6855

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Universidad de Chile

17. Betta Morales, Katerina Angélica. Evaluación de la actividad de la enzima lisosomal beta-galactosidasa en muestras de fibroblastos lisados dispuestos sobre papel filtro.

Degree: 2014, Universidad de Chile

URL: http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/149559

► En los Errores Innatos del Metabolismo (EIM), los cultivos de fibroblastos (FB) a partir de biopsia de piel, han sido desarrollados con el objetivo de… (more)

▼ En los Errores Innatos del Metabolismo (EIM), los cultivos de fibroblastos (FB) a partir de biopsia de piel, han sido desarrollados con el objetivo de obtener material para la determinación enzimas deficientes en este tipo de patologías y establecer un diagnóstico definitivo. Este tipo de diagnóstico es realizado en laboratorios especializados, debido a la complejidad en el manejo y mantención de los cultivos de FB. El envío de muestras de FB a estos centros debe ser realizado en condiciones que garanticen la viabilidad de las células durante el trayecto, con el objetivo de evitar un retraso en el diagnóstico, lo que podría ocasionar daño neurológico irreversible o la muerte de estos pacientes. Entre los EIM, el grupo de Enfermedades de Depósito Lisosomal (EDL) han sido ampliamente diagnosticadas mediante análisis enzimático sobre muestras de FB. La detección de enzimas lisosomales deficientes en muestras de FB permite confirmar el diagnóstico en este tipo de patologías. El uso de gotas de sangre seca (GSS) en papel filtro ha permitido el desarrollo de Programas de Pesquisa Neonatal para diversos EIM, ya que se ha demostrado ampliamente la estabilidad de metabolitos y enzimas en GSS en papel filtro. Además, la toma de muestra, el transporte y almacenamiento de muestras en este tipo de soporte se ven facilitados. El objetivo de este estudio fue evaluar la estabilidad de la actividad específica de betagalactosidasa, enzima lisosomal deficiente en la Gangliosidosis GM1, un tipo de EDL, en muestras de lisados de FB obtenidos a partir de la línea celular 3T3-L1 y dispuestos en papel filtro. Las muestras fueron sometidas a distintas condiciones de tiempo y temperatura de almacenaje para la evaluación de la actividad enzimática. Las muestras mantenidas a 4°C mostraron estabilidad de la actividad enzimática de betagalactosidasa hasta al menos los 28 días de almacenaje. Las muestras re-almacenadas a 4°C y - 70°C presentaron una mayor estabilidad de la actividad de beta-galactosidasa, en comparación con otras temperaturas de re-almacenaje estudiadas; In Inborn Errors of Metabolism (IEM), fibroblasts (FB) cultures from skin biopsy have been developed in order to obtain material for the determination of deficient enzymes in this type of pathologies and to establish a definitive diagnosis. This type of diagnosis is performed in specialized laboratories, due to the complexity of sample handling and FB culture maintenance. Shipment of FB samples to these centers must be carried out under conditions that guarantee the viability of the cells during the journey, in order to avoid a delay in diagnosis, which may cause irreversible neurological damage or death of these patients. Among the IEM, the Lysosomal Storage Diseases (LSD) group, has been widely diagnosed by enzymatic analysis of FB samples. The detection of deficient lysosomal enzymes in FB samples allows us to confirm the diagnosis in this type of pathology. The use of dried blood spots (DBS) on filter paper has allowed the development of…

Subjects/Keywords: beta-Galactosidasa; Enzimas

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Betta Morales, K. A. (2014). Evaluación de la actividad de la enzima lisosomal beta-galactosidasa en muestras de fibroblastos lisados dispuestos sobre papel filtro. (Thesis). Universidad de Chile. Retrieved from http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/149559

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Betta Morales, Katerina Angélica. “Evaluación de la actividad de la enzima lisosomal beta-galactosidasa en muestras de fibroblastos lisados dispuestos sobre papel filtro.” 2014. Thesis, Universidad de Chile. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/149559.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Betta Morales, Katerina Angélica. “Evaluación de la actividad de la enzima lisosomal beta-galactosidasa en muestras de fibroblastos lisados dispuestos sobre papel filtro.” 2014. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Betta Morales KA. Evaluación de la actividad de la enzima lisosomal beta-galactosidasa en muestras de fibroblastos lisados dispuestos sobre papel filtro. [Internet] [Thesis]. Universidad de Chile; 2014. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/149559.

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Council of Science Editors:

Betta Morales KA. Evaluación de la actividad de la enzima lisosomal beta-galactosidasa en muestras de fibroblastos lisados dispuestos sobre papel filtro. [Thesis]. Universidad de Chile; 2014. Available from: http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/149559

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Universidad de Chile

18. Rodríguez Vega, Sebastián Jesús Amadeo. Búsqueda bioinformática y estudio de una lipasa proveniente de Streptomyces Leeuwenhoekii C34T.

Degree: 2018, Universidad de Chile

URL: http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/151945

► Actualmente, el uso de enzimas corresponde a un área de la biotecnología de gran crecimiento y desarrollo, la cual ha buscado dar solución a problemas… (more)

▼ Actualmente, el uso de enzimas corresponde a un área de la biotecnología de gran crecimiento y desarrollo, la cual ha buscado dar solución a problemas de tipo industriales, biomédicos y domésticos; representando una solución específica, sustentable y ecológicamente amigable. En el ámbito de la innovación, como parte de una mejora tecnológica se ha buscado obtener enzimas estables y que puedan ser utilizadas en condiciones extremas de pH, temperatura, salinidad etc. Los microorganismos provenientes de ambientes extremos representan una buena fuente de este tipo de enzimas, ya que generalmente estos microorganismos precisan de este tipo de enzimas para la sobrevida en las condiciones hostiles de su hábitat. Un ambiente extremo que ha sido poco explorado en este sentido es el Desierto de Atacama. Conocido por ser el desierto más antiguo y árido del planeta, presenta condiciones ambientales que hacen que sea considerado como un ambiente extremo único en el mundo. Pese a estas condiciones adversas, diversos microorganismos han podido ser aislados desde este ambiente tan particular. Entre ellos esta Streptomyces leeuwenhoekii C34 que presenta varios grados de tolerancia a condiciones extremas. En este trabajo se realizó la búsqueda bioinformática de enzimas de interés comercial en el genoma de S. leeuwenhoekii C34. Teniendo en cuenta el gran potencial biotecnológico y diversidad de aplicaciones de las enzimas lipasas, se seleccionó el gen sle_62990 que codifica para una lipasa putativa GDSL- SGNH. Con el fin de estudiar este gen se generó la cepa LIP de S. leeuwenhoekkii C34 que sobre expresa el gen sle_62990. Con esta cepa se pudo comprobar que el gen sle_62990 codifica para una lipasa extracelular funcional y que presenta actividad contra p-nitrofenil palmitato. También se intentó la expresión heteróloga de la enzima en el medio intracelular de E. coli. Sin embargo, no se obtuvieron los resultados esperados, ya que se encontró en cuerpos de inclusión.; Currently, the use of enzymes corresponds to a growing area in the biotechnology field which has sought to solve industrial, biomedical, and domestic problems. These represent a specific, sustainable and ecologically friendly solution. Stable enzymes that can be used under extreme conditions such as high pH, temperature and salinity are of particular interest for biotechnological improvement. Microorganisms from extreme environments require these types of enzymes in order to survive under the harsh conditions of their habitat. Therefore, they represent a good source of interesting enzymes. An extreme environment that has been little explored is the Atacama Desert. The Atacama Desert is known as the oldest and driest desert on Earth. It presents extreme a environmental conditions. Despite these harsh conditions, various microorganisms have been isolated from this particular environment. Among them Streptomyces leeuwenhoekii C34, that shows several degrees of tolerance to extreme conditions. In this work, possible commercial enzymes were searched in the genome of S.…

Subjects/Keywords: Lipasa; Enzimas; Streptomyces

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APA (6^th Edition):

Rodríguez Vega, S. J. A. (2018). Búsqueda bioinformática y estudio de una lipasa proveniente de Streptomyces Leeuwenhoekii C34T. (Thesis). Universidad de Chile. Retrieved from http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/151945

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Rodríguez Vega, Sebastián Jesús Amadeo. “Búsqueda bioinformática y estudio de una lipasa proveniente de Streptomyces Leeuwenhoekii C34T.” 2018. Thesis, Universidad de Chile. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/151945.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Rodríguez Vega, Sebastián Jesús Amadeo. “Búsqueda bioinformática y estudio de una lipasa proveniente de Streptomyces Leeuwenhoekii C34T.” 2018. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Rodríguez Vega SJA. Búsqueda bioinformática y estudio de una lipasa proveniente de Streptomyces Leeuwenhoekii C34T. [Internet] [Thesis]. Universidad de Chile; 2018. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/151945.

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Council of Science Editors:

Rodríguez Vega SJA. Búsqueda bioinformática y estudio de una lipasa proveniente de Streptomyces Leeuwenhoekii C34T. [Thesis]. Universidad de Chile; 2018. Available from: http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/151945

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19. Silva, Rui Pedro Oliveira. Aplicação de nanopartículas magnéticas para caracterização de proteases .

Degree: 2013, Universidade de Aveiro

URL: http://hdl.handle.net/10773/11003

► Durante vários anos, as proteases foram vistas como enzimas cuja função era, fundamentalmente, a degradação de proteínas em processos como a digestão, coagulação sanguínea entre… (more)

▼ Durante vários anos, as proteases foram vistas como enzimas cuja função era, fundamentalmente, a degradação de proteínas em processos como a digestão, coagulação sanguínea entre outros. Contudo, com o aumento do conhecimento científico da estrutura e função destas enzimas, esta visão foi sendo progressivamente alterada e atualmente as proteases são reconhecidas pela sua importância na sinalização celular em diversos processos biológicos. A caracterização do modo de atuação destas enzimas é importante. Para tal, o desenvolvimento de abordagens experimentais que permitam o enriquecimento e caracterização de proteases será crucial. No presente trabalho, foram sintetizadas e caracterizadas nanopartículas magnéticas de óxido de ferro, acopladas com inibidores específicos para proteases existentes em diversos biofluidos. Estudou-se o efeito da funcionalização química da superfície das nanopartículas magnéticas na estrutura e morfologia das nanopartículas. Após o acoplamento com os inibidores, foi testada a capacidade de interação destas nanopartículas com as proteases presentes nos biofluidos. Os resultados evidenciaram que após a funcionalização e acoplamento com os inibidores em estudo, não ocorreu alteração da estrutura cristalina e da morfologia das nanopartículas, não se tendo ainda verificado fenómenos de aglomeração. Os resultados obtidos por SDS-PAGE permitiram constatar que as nanopartículas com grupos carboxilo com ação quelante à superfície ([email protected]) apresentaram capacidade para enriquecer especificamente metaloproteases, uma família de proteases cujo centro catalítico possui catiões metálicos (Zn2+). Estes resultados foram ainda validados por zimografia tendo-se a ocorrência de ligações específicas entre as metaloproteases e os inibidores ligados às nanopartículas magnéticas. No caso dos resultados do SDS-PAGE das [email protected] foi possível observar especificidade das interações entre as NPs e proteínas-alvo da saliva, não se tendo observado a ligação de proteínas abundantes na saliva, como a amilase, às NPs. Em suma, no presente trabalho desenvolveu-se um sistema de enriquecimento de proteases de sistemas biológicos envolvendo nanopartículas magnéticas que se revelou eficaz. Advisors/Committee Members: Vitorino, Rui Miguel Pinheiro (advisor), Silva, Ana Luísa Daniel da (advisor).

Subjects/Keywords: Biotecnologia molecular; Enzimas; Proteómica; Enzimas proteolíticas; Fluidos corporais; Inibidores de enzimas; Nanopartículas - Propriedades magnéticas

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APA (6^th Edition):

Silva, R. P. O. (2013). Aplicação de nanopartículas magnéticas para caracterização de proteases . (Thesis). Universidade de Aveiro. Retrieved from http://hdl.handle.net/10773/11003

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Silva, Rui Pedro Oliveira. “Aplicação de nanopartículas magnéticas para caracterização de proteases .” 2013. Thesis, Universidade de Aveiro. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10773/11003.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Silva, Rui Pedro Oliveira. “Aplicação de nanopartículas magnéticas para caracterização de proteases .” 2013. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Silva RPO. Aplicação de nanopartículas magnéticas para caracterização de proteases . [Internet] [Thesis]. Universidade de Aveiro; 2013. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10773/11003.

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Council of Science Editors:

Silva RPO. Aplicação de nanopartículas magnéticas para caracterização de proteases . [Thesis]. Universidade de Aveiro; 2013. Available from: http://hdl.handle.net/10773/11003

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Universidade do Rio Grande do Sul

20. Abreu, Ligia de. Influência de diferentes estratégias de cultivo na produção de lipases por Staphylococcus warneri EX17 e propriedades desta enzima após imobilização em suportes hidrofóbicos.

Degree: 2013, Universidade do Rio Grande do Sul

URL: http://hdl.handle.net/10183/77070

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Enzimas microbianas, quando produzidas a um custo acessível e preservadas suas propriedades catalíticas, são ferramentas determinantes para a sustentabilidade das indústrias química e energética. Buscando… (more)

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Enzimas microbianas, quando produzidas a um custo acessível e preservadas suas propriedades catalíticas, são ferramentas determinantes para a sustentabilidade das indústrias química e energética. Buscando aprimorar a produção de lipases pela cepa de Staphylococcus warneri EX17, diferentes estratégias de cultivo em biorreatores submersos foram aplicadas para analisar a influência de algumas variáveis na produção da enzima e então foi proposto o cultivo em batelada alimentada. Paralelamente, lipases de S. warneri EX17 (SWL) foram imobilizadas por adsorção hidrofóbica em Octyl-Sepharose, Immobead 150 e MCI GEL CHP20P. Os resultados indicaram que a interação entre enzima e suporte interfere nas propriedades da enzima imobilizada. Os preparados Octyl-SWL e MCI-SWL preservaram sua atividade lipolítica quando expostos a 50 % (v/v) de Butanol, Etanol, n-Hexano, Isopropanol e Metanol. Na síntese do éster aromático butirato de etila, Octyl-SWL e MCI-SWL exibiram desempenho promissor, alcançando em 24 h de reação 28 % e 35,6 % de rendimento, respectivamente. Lipases de S. warneri EX17 purificadas e imobilizadas em suportes hidrofóbicos preservaram propriedades que apontam seu potencial como biocatalisador industrial.

Microbial enzymes, when produced at affordable costs and preserving their catalytic properties, are crucial tools for sustainable chemical and energy industries. To enhance lipase production by Staphylococcus warneri EX17 strain, different cultivation strategies were applied to investigate the influence of some variables on enzyme production and then fed-batch cultivation was proposed. Additionally, three hydrophobic supports, Octyl-Sepharose, Immobead 150 and MCI GEL CHP20P have been assayed to purify and immobilize the lipase from S. warneri EX17 (SWL) via interfacial adsorption. Results indicated that the intensity of the interaction between the lipase and the support surface interferes in properties of the immobilized enzyme. The immobilized preparations Octyl-SWL and MCI-SWL preserved their lipolytic activity in the presence of 50 % (v/v) Butanol, Ethanol, n-Hexane, Isopropanol and Methanol. Octyl-SWL and MCI-SWL catalyzed the ester synthesis reaction giving 28 % and 35.6 % of conversion in 24 h. These enzyme preparations may be promising alternatives as industrial biocatalysts.

Advisors/Committee Members: Ayub, Marco Antônio Záchia.

Subjects/Keywords: Lipase; Staphylococcus; Enzimas imobilizadas

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Abreu, L. d. (2013). Influência de diferentes estratégias de cultivo na produção de lipases por Staphylococcus warneri EX17 e propriedades desta enzima após imobilização em suportes hidrofóbicos. (Thesis). Universidade do Rio Grande do Sul. Retrieved from http://hdl.handle.net/10183/77070

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Abreu, Ligia de. “Influência de diferentes estratégias de cultivo na produção de lipases por Staphylococcus warneri EX17 e propriedades desta enzima após imobilização em suportes hidrofóbicos.” 2013. Thesis, Universidade do Rio Grande do Sul. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10183/77070.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Abreu, Ligia de. “Influência de diferentes estratégias de cultivo na produção de lipases por Staphylococcus warneri EX17 e propriedades desta enzima após imobilização em suportes hidrofóbicos.” 2013. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Abreu Ld. Influência de diferentes estratégias de cultivo na produção de lipases por Staphylococcus warneri EX17 e propriedades desta enzima após imobilização em suportes hidrofóbicos. [Internet] [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2013. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10183/77070.

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Council of Science Editors:

Abreu Ld. Influência de diferentes estratégias de cultivo na produção de lipases por Staphylococcus warneri EX17 e propriedades desta enzima após imobilização em suportes hidrofóbicos. [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2013. Available from: http://hdl.handle.net/10183/77070

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Universidade do Rio Grande do Sul

21. Silva, Lucas André Dedavid e. Queratinases de BACILLUS subtilis S14 : produção, expressão e análise de enzimas mutantes.

Degree: 2013, Universidade do Rio Grande do Sul

URL: http://hdl.handle.net/10183/90480

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Enzimas industriais movimentam um mercado mundial estimado em sete bilhões de dólares anualmente. Entre essas enzimas, incluem-se as queratinases, enzimas capazes de catalisar a hidrólise… (more)

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Enzimas industriais movimentam um mercado mundial estimado em sete bilhões de dólares anualmente. Entre essas enzimas, incluem-se as queratinases, enzimas capazes de catalisar a hidrólise de queratina e com aplicação potencial na indústria coureira. A queratinase KerS14, produzida pelo Bacillus subtilis S14 é capaz de depilar o couro sem causar danos ao colágeno. Embora tenha esta capacidade de grande interesse biotecnológico, sua baixa termoestabilidade a 50 °C é uma característica desvantajosa para a aplicação industrial da enzima. Visando aumentar a produção de queratinases pelo B. subtilis S14 e a termoestabilidade da KerS14, duas estratégias foram adotadas: mudanças nas condições de cultura do microrganismo selvagem e obtenção de enzimas mutantes recombinantes. Na primeira estratégia, B. subtilis S14 foi cultivado em meio farinha de pena 1,5% e CaCl2 1%. O sobrenadante da cultura foi caracterizado e 60% da atividade queratinolítica permaneceu depois de armazenada por nove dias a temperatura de 50 °C. Em paralelo, a ORF que codifica a KerS14 foi amplificada e clonada em vetor de expressão. Os resíduos de aminoácidos G61, S98 e P239 da KerS14 foram modificados por mutagênese sítio dirigida , as enzimas mutantes foram expressas in Escherichia coli e purificadas. A enzima recombinante (rKerS14) foi mais termoestável do que a enzima selvagem. Além disso, foi verificado que o fibrinogênio e fibrina são hidrolisados pela rKerS14, mostrando que a enzima também tem potencial para desenvolver drogas para o tratamento de doenças cardiovasculares.

Industrial enzymes have a world market of more than seven billion dollars per year. Keratinases are among these enzymes. They have a potential for use in tannery. The keratinase KerS14, produced by Bacillus subtilis S14, differ from other keratinases because it can depilate leather without damaging collagen. Despite this great biotechnological potential, its low thermal stability at 50 °C is an undesirable property for industrial application. In order to increase keratinases production by B. subtilis S14 and KerS14 thermal stability, two strategies were adopted: changes in wild–type microorganism growth conditions and producing recombinant mutant enzymes. In first strategy, B. subtilis S14 were grown in feather meal 1.5% and CaCl2 1 %. The supernatant obtained after fermentation was characterized and its keratinolytic activity remained in 60% after nine days of storage at 50 °C. In parallel, the KerS14 ORF was amplified and cloned into an expression vector. The KerS14 amino acid residues G61, S98 and P239 were modified and mutant enzymes were expressed in Escherichia coli and purified. It was verified that recombinant enzyme (rKerS14) is more thermal stable than the wild–type enzyme. In addition, it is able to hydrolyze fibrinogen and fibrin which is useful to develop drugs for the treatment of cardiovascular diseases.

Advisors/Committee Members: Termignoni, Carlos.

Subjects/Keywords: Bacillus subtilis; Queratinase; Enzimas

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Silva, L. A. D. e. (2013). Queratinases de BACILLUS subtilis S14 : produção, expressão e análise de enzimas mutantes. (Thesis). Universidade do Rio Grande do Sul. Retrieved from http://hdl.handle.net/10183/90480

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Silva, Lucas André Dedavid e. “Queratinases de BACILLUS subtilis S14 : produção, expressão e análise de enzimas mutantes.” 2013. Thesis, Universidade do Rio Grande do Sul. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10183/90480.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Silva, Lucas André Dedavid e. “Queratinases de BACILLUS subtilis S14 : produção, expressão e análise de enzimas mutantes.” 2013. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Silva LADe. Queratinases de BACILLUS subtilis S14 : produção, expressão e análise de enzimas mutantes. [Internet] [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2013. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10183/90480.

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Council of Science Editors:

Silva LADe. Queratinases de BACILLUS subtilis S14 : produção, expressão e análise de enzimas mutantes. [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2013. Available from: http://hdl.handle.net/10183/90480

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Universidade do Rio Grande do Sul

22. Lagranha, Valeska Lizzi. Otimização da liberação e captação de enzimas lisossômicas superexpressas por células recombinantes microencapsuladas.

Degree: 2012, Universidade do Rio Grande do Sul

URL: http://hdl.handle.net/10183/115606

► As doenças lisossômicas (DL) são um grupo de doenças herdadas geneticamente e que são causadas por um defeito parcial ou total de enzimas envolvidas na… (more)

▼ As doenças lisossômicas (DL) são um grupo de doenças herdadas geneticamente e que são causadas por um defeito parcial ou total de enzimas envolvidas na degradação de macromoléculas dentro dos lisossomos. Terapias para aumentar os níveis de enzima nas DL incluem o transplante de célulastronco hematopoiéticas (TCTH) e terapia de reposição enzimática (TRE). Esses tratamentos são todos baseados na propriedade das enzimas lisossomais de serem secretadas e captadas pelas células vizinhas através do receptor de manose-6-fosfato (M6PR). Novas abordagens terapêuticas vêm sendo investigadas, uma vez que as terapias atuais possuem limitações. A microencapsulação de células geneticamente modificadas superexpressando um produto terapêutico e o aperfeiçoamento na captação de enzimas lisossomais, via M6PR, parecem ser estratégias promissoras. Neste trabalho objetivamos aperfeiçoar o sistema de liberação de enzimas lisossomais superexpressas por células recombinantes microencapsuladas para o tratamento das DL. Para isso, estudos de biocompatibilidade in vivo foram avaliados com distintos tipos celulares (BHK e HepG2), concentrações de alginato (1 e 1,5%), tempos (7 e 21 dias) e sítios de implante (cavidade peritoneal, tecido subcutâneo e músculo vasto-medial) em ratos Wistar. A resposta inflamatória foi caracterizada e células-tronco mesenquimais (CTM) foram encapsuladas e implantadas em ratos para avaliar se o seu efeito imunomodulador poderia diminuí-la. Posteriormente o efeito antiinflamatório da prednisolona foi avaliado em camundongos normais e MPS I tratados com células BHK superexpressando IDUA (BHKIDUA) encapsuladas e implantadas na cavidade intraperitoneal por 15 dias. A liberação da enzima após implante foi avaliada por meio da recuperação das cápsulas e cultivo das mesmas por 24h e medida de IDUA no meio. Observamos que as microcapsulas in vivo provocam uma reação do tipo corpo estranho, em todos os parâmetros avaliados. Essa reação se dá por presença de fibrose e infiltrado inflamatório e diminui aos 21 dias. O uso de CTM encapsuladas melhorou esse aspecto, uma vez que a resposta foi menor em ratos nos quais esse tipo celular foi implantado, devido ao efeito imunomodulador dessas células. O tratamento com antiinflamatório prednisolona também diminuiu a resposta inflamatória gerada contra as microcápsulas implantadas na cavidade peritoneal de camundongos normais e MPS I. As células encapsuladas permaneceram viáveis após os 15 dias de implante. A liberação de enzima para o meio extracapsular é maior nas cápsulas recuperadas de animais tratados com prednisolona. Níveis de atividade de IDUA circulante passaram de indetectáveis para 2,4 nmol/h/mL de soro nos animais MPS I tratados. Outra estratégia utilizada foi a superexpressão de M6PR para melhorar a captação enzimática. Avaliamos os níveis de M6PR em fibroblastos de pacientes com Leucodistrofia Metacromática (LDM) e normais após o tratamento com o sobrenadante de células BHK superexpressando ARSA (BHKARSA), por imunocitoquímica e PCR em Tempo Real. Finalmente foi avaliado… Advisors/Committee Members: Giugliani, Roberto.

Subjects/Keywords: Mucopolissacaridose; Microencapsulação; Alginato; Enzimas captação

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APA (6^th Edition):

Lagranha, V. L. (2012). Otimização da liberação e captação de enzimas lisossômicas superexpressas por células recombinantes microencapsuladas. (Thesis). Universidade do Rio Grande do Sul. Retrieved from http://hdl.handle.net/10183/115606

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Lagranha, Valeska Lizzi. “Otimização da liberação e captação de enzimas lisossômicas superexpressas por células recombinantes microencapsuladas.” 2012. Thesis, Universidade do Rio Grande do Sul. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10183/115606.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Lagranha, Valeska Lizzi. “Otimização da liberação e captação de enzimas lisossômicas superexpressas por células recombinantes microencapsuladas.” 2012. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Lagranha VL. Otimização da liberação e captação de enzimas lisossômicas superexpressas por células recombinantes microencapsuladas. [Internet] [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2012. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10183/115606.

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Council of Science Editors:

Lagranha VL. Otimização da liberação e captação de enzimas lisossômicas superexpressas por células recombinantes microencapsuladas. [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2012. Available from: http://hdl.handle.net/10183/115606

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Universidade do Rio Grande do Sul

23. Fernandes, Claudia Lemelle. Modelagem molecular e estudos de docking da enzima corismato sintase de Mycobacterium tuberculosis.

Degree: 2006, Universidade do Rio Grande do Sul

URL: http://hdl.handle.net/10183/8453

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As enzimas da via do ácido chiquímico constituem um excelente alvo para o desenho de novos agentes antibacterianos. Esta rota é encontrada em bactérias, fungos,… (more)

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As enzimas da via do ácido chiquímico constituem um excelente alvo para o desenho de novos agentes antibacterianos. Esta rota é encontrada em bactérias, fungos, plantas e parasitas do filo apicomplexa, mas está ausente em mamíferos. A Corismato sintase (CS) catalisa o último passo desta rota, produto que é utilizado em outras reações biossintéticas, como biossíntese de aminoácidos aromáticos, folato, vitamina K e ubiquinona. Esta reação é a mais incomum de toda rota e é unica na natureza. Ela converte 5-enolpiruvil-chiqiuimato-3-fosfato (EPSP) em corismato na presença de uma flavina mononucleotídeo reduzida (FMNH2) como coenzima. A predição da estrutura tridimensional (3D) da enzima CS de Mycobacterium tuberculosis (Mtb) foi feita pela técnica de modelagem comparativa por homologia, utilizando a estrutura cristalográfica de CS de Streptococcus pneumoniae (PDB ID: 1QX0) como molde (≈ 42% de identidade), e o programa MODELLER6v2. Adicionalmente, com o intuito de entender as possíveis formas de ligação do substrato e da coenzima a enzima EPSP e flavina mononucleotídeo (FMN), repectivamente, foi feito um docking geométrico. A minimização de energia de todo o complexo mostrou, como esperado, que a maioria das interações ocorridas no molde são preservadas na estrutura de Mtb, exceto pela His11, Arg139 e Gln255. Entretanto, novas interações envolvendo Arg111, Gli113 e Ser317 também foram observadas. Este conhecimento poderá facilitar na busca por novos inibidores para esta enzima como fármacos alternativos no tratamento da tuberculose (Tb).

The enzymes of the shikimate pathway constitute an excellent target for the design of new antibacterial agents. This pathway is found in bacteria, fungi, plants and apicomplexan parasites but is absent in mammals. Chorismate synthase (CS) catalyzes the last step of this pathway, the product of which is utilized in other enzymatic transformations like the biosynthesis of aromatic amino acids, folate, vitamin K and ubiquinone. This reaction is the most unusual of the entire pathway and is unique in nature. It converts EPSP to chorismate in the presence of a reduced FMN coenzime. Structure prediction used the comparative protein structure modeling methodology. The three-dimensional (3D) structure prediction of the enzyme CS of Mycobacterium tuberculosis was performed using the crystal structure (PDB ID: 1QX0) of CS from Streptococcus pneumoniae as template (≈ 42% identity), and the MODELLER6v2 package. Additionally, in order to understand the possible binding modes of substrate and coenzime to the enzyme, EPSP and FMN, respectively, were geometrically docked to CS. Energy minimization of the whole complex showed, as expected, that most of the template interactions are preserved in the Mtb structure, except for His11, Arg139 and Gln255. However, novel interactions involving Arg111, Gly113 and Ser317 were also observed. This knowledge should facilitate the search for inhibitors of this enzyme as alternative agents to treat tuberculosis.

Advisors/Committee Members: Basso, Luiz Augusto.

Subjects/Keywords: Enzimas; Tuberculose

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APA (6^th Edition):

Fernandes, C. L. (2006). Modelagem molecular e estudos de docking da enzima corismato sintase de Mycobacterium tuberculosis. (Thesis). Universidade do Rio Grande do Sul. Retrieved from http://hdl.handle.net/10183/8453

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Fernandes, Claudia Lemelle. “Modelagem molecular e estudos de docking da enzima corismato sintase de Mycobacterium tuberculosis.” 2006. Thesis, Universidade do Rio Grande do Sul. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10183/8453.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Fernandes, Claudia Lemelle. “Modelagem molecular e estudos de docking da enzima corismato sintase de Mycobacterium tuberculosis.” 2006. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Fernandes CL. Modelagem molecular e estudos de docking da enzima corismato sintase de Mycobacterium tuberculosis. [Internet] [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2006. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10183/8453.

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Fernandes CL. Modelagem molecular e estudos de docking da enzima corismato sintase de Mycobacterium tuberculosis. [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2006. Available from: http://hdl.handle.net/10183/8453

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Universidade do Rio Grande do Sul

24. Silva, Rafael Guimaraes da. A enzima beta-cetoacil-PCA redutase de Mycobacterium tuberculosis H37Rv: mecanismos cinético, químico e cooperativo.

Degree: 2008, Universidade do Rio Grande do Sul

URL: http://hdl.handle.net/10183/13852

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A enzima -cetoacil-PCA redutase catalisa a redução, dependente de NADPH, de - cetoacil-PCA, a segunda etapa do sistema tipo II de elongação de ácidos graxos… (more)

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A enzima -cetoacil-PCA redutase catalisa a redução, dependente de NADPH, de - cetoacil-PCA, a segunda etapa do sistema tipo II de elongação de ácidos graxos em bactérias, plantas e organismos apicomplexos. No presente trabalho, utilizou-se acetoacetil- CoA como substrato para caracterizar cineticamente a reação catalisada pela enzima de Mycobacterium tuberculosis, o agente etiológico da tuberculose. O mecanismo cinético da reação foi investigado pela análise de padrões de velocidade inicial, inibição por produtos e efeitos isotópicos primários cinéticos, e os resultados apontam para um mecanismo aleatório em estado estacionário. Efeitos isotópicos cinéticos primários, a-secundários, de solvente e múltiplos, bem como estudos de pH e temperatura, ressonância magnética nuclear e variação dos efeitos isotópicos primários com o pH foram utilizados para determinar o mecanismo químico da reação, e a análise dos resultados sugere que as transferências de hidreto e próton e a re-hibridização dos substratos ocorrem de modo concertado. A interação entre NADPH e enzima foi estudada tanto em condições de equilíbrio quanto em estado pré-estacionário, monitorando-se o aumento na fluorescência do nucleotídeo ao ligar na proteína. Os dados coletados em equilíbrio sugerem a presença de cooperatividade homotrópica positiva entre as subunidades do dímero, e a análise dos dados cinéticos sugere duas formas de enzima livre em solução como base para a cooperatividade. Diálise em equilíbrio foi empregada para caracterizar a ligação de acetoacetil-CoA à enzima, e os resultados indicam que não há cooperatividade na ligação deste substrato. Mecanismos cinético, químico e cooperativo para a reação catalisada pela -cetoacil-PCA redutase de M. tuberculosis são propostos com base nos dados aqui apresentados.

The -ketoacyl-ACP reductase enzyme catalyzes the NADPH-dependent reduction of -ketoacyl-ACP, the second step of type II fatty acid elongation system of bacteria, plants, and apicomplexan organisms. In the present work, acetoacetyl-CoA was utilized as substrate to kinetically characterize the reaction catalyzed by the enzyme of Mycobacterium tuberculosis, the etiogical agent of tuberculosis. The reaction kinetic mechanism was investigated by analyzing initial velocity and product inhibition patterns, and primary kinetic isotope effects, and the results point to a random steady-state mechanism. Primary, a-secondary, solvent, and multiple kinetic isotope effects, as well as pH and temperature studies, nuclear magnetic resonance, and pH variation of primary isotope effects were utilized to determine the reaction chemical mechanism, and analysis of the results suggests that hydride and proton transfer and substrate re-hybridization occur in a concerted fashion. Interaction between NADPH and enzyme was studied both in equilibrium and pre-steadystate conditions, by monitoring the enhancement in nucleotide fluorescence upon its binding to the enzyme. Data collected at equilibrium suggest the presence of positive homotropic cooperativity between…

Advisors/Committee Members: Basso, Luiz Augusto.

Subjects/Keywords: Enzimas : Bioquímica; Mycobacterium tuberculosis; Tuberculose

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APA (6^th Edition):

Silva, R. G. d. (2008). A enzima beta-cetoacil-PCA redutase de Mycobacterium tuberculosis H37Rv: mecanismos cinético, químico e cooperativo. (Thesis). Universidade do Rio Grande do Sul. Retrieved from http://hdl.handle.net/10183/13852

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Silva, Rafael Guimaraes da. “A enzima beta-cetoacil-PCA redutase de Mycobacterium tuberculosis H37Rv: mecanismos cinético, químico e cooperativo.” 2008. Thesis, Universidade do Rio Grande do Sul. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10183/13852.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Silva, Rafael Guimaraes da. “A enzima beta-cetoacil-PCA redutase de Mycobacterium tuberculosis H37Rv: mecanismos cinético, químico e cooperativo.” 2008. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Silva RGd. A enzima beta-cetoacil-PCA redutase de Mycobacterium tuberculosis H37Rv: mecanismos cinético, químico e cooperativo. [Internet] [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2008. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10183/13852.

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Council of Science Editors:

Silva RGd. A enzima beta-cetoacil-PCA redutase de Mycobacterium tuberculosis H37Rv: mecanismos cinético, químico e cooperativo. [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2008. Available from: http://hdl.handle.net/10183/13852

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Universidade do Rio Grande do Sul

25. Matos, Fernanda Brocca de. Isolamento e caracterização de fungos isolados de ambiente marinho.

Degree: 2012, Universidade do Rio Grande do Sul

URL: http://hdl.handle.net/10183/103968

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Os oceanos constituem 71% da superfície da Terra e muitos microrganismos que provém deste ambiente podem secretar enzimas de alto interesse biotecnológico. As enzimas produzidas… (more)

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Os oceanos constituem 71% da superfície da Terra e muitos microrganismos que provém deste ambiente podem secretar enzimas de alto interesse biotecnológico. As enzimas produzidas por microrganismos marinhos podem ser mais estáveis, devido à alta complexidade deste ambiente. Por este motivo, objetivou-se isolar e identificar os fungos presentes no sedimento marinho e verificar a atividade enzimática da amilase, celulase, lípase e protease dos mesmos em diferentes temperaturas (15°C, 20°C, 25°C e 30°C). As amostras de sedimento foram coletadas com auxilio de seringas estéreis à 10 metros de profundidade, e transportadas até o laboratório em caixas isotérmicas. Após o crescimento, fragmentos de micélio foram repicados no centro de placa de petri para isolamento das amostras. Diferentes substratos foram utilizados para avaliar a atividade da amilase, celulase, lipase e protease dos isolados. A capacidade de hidrolisar os substratos foi verificada em diferentes temperaturas (15°C, 20°C, 25°C e 30°C). Foram isoladas 22 cepas fúngicas, de 14 diferentes espécies, pertencentes a nove gêneros, dentre eles Helicosporium, Helicomyces, Paecilomyces, Phoma, Chaetomium, Geotrichum, duas espécies de Cladosporium sp., Aspergillus sp., Penicillium sp., Penicillium chrysogenum e Penicillium aurantiogriseum. O maior índice de positividade enzimática ocorreu na temperatura de 25°C, na qual 71% dos isolados hidrolisaram o substrato lipídico, seguido de protease com 50%, celulase 43% e amilase 36%. Todos os isolados produziram no mínimo um tipo de enzima, nas temperaturas testadas, ficando evidente a que o ambiente marinho é para descoberta de novas enzimas.

Oceans constitute 71% of the Earth's surface, and many microorganisms from this environment may secrete enzymes of high biotechnological interest. Enzymes produced by marine microorganisms might be more stable due to the great complexity of this environment. Therefore, we aimed at isolating and identifying the fungi present in marine sediment and at verifying the corresponding enzymatic activities of amylase, cellulase, lipase, and protease. Sediment samples were collected with sterile syringes at a depth of 10 meters and transported to the laboratory in cool boxes. After their growth, mycelial fragments were sub-cultured and inoculated in the center of Petri dishes for isolating the samples. Different substrates were used to evaluate the activity of amylase, cellulase, lipase and protease. The ability to hydrolyse the substrates was observed at different temperatures (15°C, 20°C, 25°C e 30°C).Twenty-two fungal strains were isolated from 14 different species belonging to nine genera, including Helicosporium, Helicomyces, Paecilomyces, Phoma, Chaetomium, Geotrichum, two different types of Cladosporium sp., Aspergillus sp., Penicillium sp., Penicillium chrysogenum, and Penicillium aurantiogriseum. The highest enzymatic production rate was found for lipase, produced by 71% of the isolated fungi, followed by protease (50%), cellulase (43%), and amylase (36%). All isolates produced at…

Advisors/Committee Members: Germani, Jose Carlos.

Subjects/Keywords: Microorganismo; Fungos; Ambiente marinho; Enzimas

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APA (6^th Edition):

Matos, F. B. d. (2012). Isolamento e caracterização de fungos isolados de ambiente marinho. (Thesis). Universidade do Rio Grande do Sul. Retrieved from http://hdl.handle.net/10183/103968

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Matos, Fernanda Brocca de. “Isolamento e caracterização de fungos isolados de ambiente marinho.” 2012. Thesis, Universidade do Rio Grande do Sul. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10183/103968.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Matos, Fernanda Brocca de. “Isolamento e caracterização de fungos isolados de ambiente marinho.” 2012. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Matos FBd. Isolamento e caracterização de fungos isolados de ambiente marinho. [Internet] [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2012. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10183/103968.

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Not specified: Masters Thesis or Doctoral Dissertation

Council of Science Editors:

Matos FBd. Isolamento e caracterização de fungos isolados de ambiente marinho. [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2012. Available from: http://hdl.handle.net/10183/103968

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26. OLIVEIRA, Vagne de Melo. Obtenção de proteases a partir do trato digestivo de peixes neotropicais para aplicação na produção de peptídeos de colágeno .

Degree: 2015, Universidade Federal de Pernambuco

URL: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/14976

► Este trabalho objetivou obter proteases com propriedades colagenolíticas a partir dos resíduos de três espécies de peixes neotropicais (arabaiana Seriola dumerili; pescada-branca Cynoscion leiarchus; e… (more)

▼ Este trabalho objetivou obter proteases com propriedades colagenolíticas a partir dos resíduos de três espécies de peixes neotropicais (arabaiana Seriola dumerili; pescada-branca Cynoscion leiarchus; e tucunaré Cichla ocellaris), através de extração por sistema de duas fases aquosas (SDFA), visando aplicá-lo para produção de peptídeos de colágeno. Inicialmente, serino proteases foram extraídas e caracterizadas físico-quimicamente quanto à temperatura e pH ótimos, bem como estabilidade à variação desses parâmetros e verificação de seus parâmetros cinéticos (Km e Vmáx). A sensibilidade aos íons metálicos e aos inibidores naturais e sintéticos também foi avaliada. Em seguida, a atividade colagenolítica dos extratos foi mensurada, obtendo-se 106,82 U/mg (C. ocellaris), 42,44 U/mg (S. dumerili) e 98,08 U/mg (C. leiarchus). Nos testes com inibidores de serino (PMSF) e metaloproteases (EDTA) obteve-se 18,53 e 23,29 U/mg, 14,09 e 14,94 U/mg e de 37,45 e 15,55 U/mg, como atividades enzimáticas de C. ocellaris, S. dumerili e C. leiarchus, respectivamente. Proteases com propriedades colagenolíticas de C. leiarchus e de C. ocellaris obtiveram pH ótimo de 8,0 e 7,5, mantendo-se estável entre 6,5 e 11,5; temperatura ótima de 55°C, termoestável entre 25 e 60°C, respectivamente. Os íons Ca2+ e Mg2+ funcionaram como ativadores, enquanto Zn2+ e Pb2+ atuaram como inibidores, assim como a ação da Benzamidina e TLCK, inibidores específicos de tripsina. No teste de especificidade ao colágeno, a enzima de C. leiarchus, após 48 horas, clivou todos os tipos de colágeno testados, sendo eficaz na seguinte ordem: colágeno da pele de P. corruscans > colágeno da pele de O. niloticus > colágeno bovino tipo I; enquanto que, para a enzima de C. ocellaris, após 36 horas, colágeno tipo I > colágeno de pele de P. corruscans > colágeno de pele de O. niloticus. As características físico-químicas da colagenases de C. ocellaris mostraram-se mais interessantes para prosseguimento das análises. Dessa forma, foram obtidos o Km e o Vmáx como 5,92 mM e 294,40 U/mg, respectivamente. Esta enzima mostrou especificidade aos colágenos testados, durante o intervalo de 1 h a 55°C, na seguinte condição: colágeno tipo I > colágeno de pele de O. niloticus > colágeno de pele de P. corruscans. A colagenase intestinal de C. ocellaris foi recuperada por meio do sistema de duas fases aquosas (SDFA) para obtenção da enzima purificada, obtendo-se coeficiente de partição de 8.24, usando 20,0% (w/w) de PEG 8000 e 12,5% (w/w) de sal de fosfato a pH 8,0. A enzima PEG-colagenolítica ainda foi capaz de clivar o colágeno do tipo I e do colágeno extraído da pele de C. ocellaris (rendimento 2.9% de peso seco). A técnica de SDFA permitiu a remoção de contaminantes por um processo rápido, simples e econômico e funcionou como etapa principal de purificação capaz satisfazer a necessidade de isolamento para a produção de peptídeos de colágeno, como descritos no presente trabalho. A simplicidade e alto rendimento, somando investimentos mais baixos, tornam o SDFA uma opção promissora de… Advisors/Committee Members: PORTO, Ana Lúcia Figueiredo (advisor), BEZERRA, Ranilson de Souza (advisor), http://lattes.cnpq.br/4989617783837981 (advisor).

Subjects/Keywords: Enzimas proteolíticas; Colágeno; Visceras

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APA (6^th Edition):

OLIVEIRA, V. d. M. (2015). Obtenção de proteases a partir do trato digestivo de peixes neotropicais para aplicação na produção de peptídeos de colágeno . (Thesis). Universidade Federal de Pernambuco. Retrieved from http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/14976

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

OLIVEIRA, Vagne de Melo. “Obtenção de proteases a partir do trato digestivo de peixes neotropicais para aplicação na produção de peptídeos de colágeno .” 2015. Thesis, Universidade Federal de Pernambuco. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/14976.

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MLA Handbook (7^th Edition):

OLIVEIRA, Vagne de Melo. “Obtenção de proteases a partir do trato digestivo de peixes neotropicais para aplicação na produção de peptídeos de colágeno .” 2015. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

OLIVEIRA VdM. Obtenção de proteases a partir do trato digestivo de peixes neotropicais para aplicação na produção de peptídeos de colágeno . [Internet] [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2015. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/14976.

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Council of Science Editors:

OLIVEIRA VdM. Obtenção de proteases a partir do trato digestivo de peixes neotropicais para aplicação na produção de peptídeos de colágeno . [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2015. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/14976

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27. Silva, Roberto Afonso da. Caracterização físico-química e purificação da bromelina do Ananas comosus (L.) Merril (Abacaxi-Bromeliaceae) .

Degree: 2008, Universidade Federal de Pernambuco

URL: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1391

► Bromelina é o nome genérico dado ao grupo de enzimas proteolíticas encontrada nos vegetais da família Bromeliaceae, da qual o abacaxi é o mais conhecido… (more)

▼ Bromelina é o nome genérico dado ao grupo de enzimas proteolíticas encontrada nos vegetais da família Bromeliaceae, da qual o abacaxi é o mais conhecido e rico nesta protease, que tem grande importância na área de saúde e de alimentos. O objetivo deste trabalho foi determinar as propriedades físico-químicas e purificar a bromelina presente no Ananas comosus L. Merril (abacaxi). A Diálise seguida da precipitação com 80% de (NH 4 ) 2 SO 4 realizado no extrato do abacaxi proporciou uma maior recuperação de atividade e proteína produzindo um fator de purificação cerca de 3 vezes. O CE e o CED80% apresentaram valores de pH ótimos de 8,5 e 7,2, respectivamente. Entretanto a bromelina foi estável em todos os valores de pH testados (5,0-9,0) mostrando assim ser formada por diferentes frações proteolíticas. Em relação à temperatura ótima, o CE e o CED80% apresentaram valor de 50ºC e foram foram estáveis até temperaturas de 60 ºC, sendo totalmente desnaturada a 80ºC após 30 minutos. Os valores de K M e V max aparentes, calculados segundo modelo de Lineweaver-Burk, foram: para azocaseína - K M = 2,48 mg/ml e V max = 35,29 U/mL e para azoalbumina - K M = 2,94 mg/ml e V max = 11,11 U/mL, mostrando assim praticamente a mesma afinidade por ambos os substratos. Entretanto a eficiência catalítica foi maior para azocaseína que para azoalbumina (31,62 e 8,39 min -1 , respectivamente). Através da eletroforese em gel SDS-PAGE, o extrato bruto apresentou 4 bandas de proteínas com massas moleculares de 40, 29 e 27 kDa e uma inferior a 14 kDa. Através de zimograma as bandas de 29 e a abaixo de 14kDa apresentaram atividade caseinolítica. A Cromatografia de gel-filtração apresentou 2 picos, entretanto apenas o pico 2 com atividade proteolítica especifica de 116 U/mg de proteína e purificação de 25,1 vezes, o qual apresentou 2 bandas de 29 e 26 kDa em gel SDS-PAGE. Pico 2 este quando aplicado na cromatografia de troca aniônica, rendendo um maior pico (P1) com atividade proteolítica o qual apresentou banda única em SDS- PAGE de 29 kDa com atividade caseinolítica comprovada em zimograma Advisors/Committee Members: Lima Filho, José Luiz de (advisor).

Subjects/Keywords: Bromelina; purificação; FPLC; enzimas proteolíticas

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APA (6^th Edition):

Silva, R. A. d. (2008). Caracterização físico-química e purificação da bromelina do Ananas comosus (L.) Merril (Abacaxi-Bromeliaceae) . (Thesis). Universidade Federal de Pernambuco. Retrieved from http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1391

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Silva, Roberto Afonso da. “Caracterização físico-química e purificação da bromelina do Ananas comosus (L.) Merril (Abacaxi-Bromeliaceae) .” 2008. Thesis, Universidade Federal de Pernambuco. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1391.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Silva, Roberto Afonso da. “Caracterização físico-química e purificação da bromelina do Ananas comosus (L.) Merril (Abacaxi-Bromeliaceae) .” 2008. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Silva RAd. Caracterização físico-química e purificação da bromelina do Ananas comosus (L.) Merril (Abacaxi-Bromeliaceae) . [Internet] [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2008. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1391.

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Silva RAd. Caracterização físico-química e purificação da bromelina do Ananas comosus (L.) Merril (Abacaxi-Bromeliaceae) . [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2008. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1391

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28. DONATO, Mariana Aragão Matos. Avaliação dos efeitos do inibidor de fosfodiesterase 5 sobre a ovogênese de camundongos .

Degree: 2009, Universidade Federal de Pernambuco

URL: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1624

► O Vardenafil é um potente vasodilatador, com uso no tratamento de pacientes com disfunção erétil. Seu mecanismo de ação baseia-se na inibição seletiva da fosfodiesterase-5… (more)

Subjects/Keywords: Fosfodiesterase-5; iPDE5; Enzimas

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APA (6^th Edition):

DONATO, M. A. M. (2009). Avaliação dos efeitos do inibidor de fosfodiesterase 5 sobre a ovogênese de camundongos . (Thesis). Universidade Federal de Pernambuco. Retrieved from http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1624

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

DONATO, Mariana Aragão Matos. “Avaliação dos efeitos do inibidor de fosfodiesterase 5 sobre a ovogênese de camundongos .” 2009. Thesis, Universidade Federal de Pernambuco. Accessed February 25, 2021. http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1624.

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MLA Handbook (7^th Edition):

DONATO, Mariana Aragão Matos. “Avaliação dos efeitos do inibidor de fosfodiesterase 5 sobre a ovogênese de camundongos .” 2009. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

DONATO MAM. Avaliação dos efeitos do inibidor de fosfodiesterase 5 sobre a ovogênese de camundongos . [Internet] [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2009. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1624.

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DONATO MAM. Avaliação dos efeitos do inibidor de fosfodiesterase 5 sobre a ovogênese de camundongos . [Thesis]. Universidade Federal de Pernambuco; 2009. Available from: http://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1624

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Universidade do Rio Grande do Sul

29. Andreis, Fábio Carrer. Evolução molecular de proteases Pr1 (Classe II) de Metarhizium anisopliae.

Degree: 2016, Universidade do Rio Grande do Sul

URL: http://hdl.handle.net/10183/150723

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O fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae é amplamente empregado comercialmente como agente biocontrolador de artrópodes em pragas na agricultura e pecuária, abrangendo vasta gama de hospedeiros.… (more)

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O fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae é amplamente empregado comercialmente como agente biocontrolador de artrópodes em pragas na agricultura e pecuária, abrangendo vasta gama de hospedeiros. Para que o processo infectivo tenha sucesso, é necessário que o fungo atravesse a cutícula, a primeira e principal defesa do artrópode. A transposição dessa primeira barreira ocorre pela secreção de proteases, lipases e quitinases para degradar seus principais componentes estruturais. Dentre as proteases expressas por M. anisopliae, a família Pr1 de serino-proteases está associada à virulência. Essa família possui 11 isoformas - Pr1A a Pr1K - em M. anisopliae, sendo subdivididas em duas classes. A Classe II compreende 10 isoformas subdivididas em três subfamílias. Essas isoformas agem de forma sinergística entre si e com outros fatores, conferindo maior virulência e permitindo a infecção de diferentes hospedeiros. É suposto que a virulência coevolui por seleção recíproca com o hospedeiro, havendo seleção positiva para a evolução de novas proteases ou isoformas que não sejam inativadas por inibidores do hospedeiro. O presente trabalho busca testar essa hipótese na Classe II da família Pr1, com especial foco em M. anisopliae, utilizando diferentes métodos de inferência filogenética em conjuntos de aminoácidos e nucleotídeos das isoformas individuais, bem como agrupadas por subfamílias, abrangendo homólogos do gênero Metarhizium e fungos relacionados. As árvores obtidas e seus respectivos alinhamentos nucleotídicos foram analisados quanto à substituições sinônimas e não sinônimas para inferência de seleção positiva. Tanto para os conjuntos de dados individuiais quanto para aqueles agrupados por subfamília, as filogenias retratam grupos com alto suporte estatístico condizentes com a taxonomia dos organismos que sintetizam essas proteínas, embora contendo pequenas discrepâncias. Foram identificados sítios sob seleção positiva em seis das nove isoformas avaliadas, em sua maioria localizados no domínio proteolítico. Esses resultados indicam que existe pressão seletiva diferenciada para gerar novas variações de Pr1, com efeito potencial na especificidade por hospedeiros, aumento de virulência, ou adaptação a outros estilos de vida hospedeiro-independente.

The entomopathogenic fungus Metarhizium anisoplie is widely applied as a pest-arthropod biocontrol agent in crops and animal production, encompassing a wide array of hosts. For a successful infection, it is vital that the fungus breaches the host’s cuticle, the first and main defense of artrhopods. Transposing this first barrier requires secreted proteases, lipases and chitinases that degrade the cuticle’s main structural components. Among the expressed proteases of M. anisopliae, the Pr1 family of serine proteases is related to its virulence. In M. anisopliae, this family contains 11 isoforms – Pr1A through Pr1K – divided into two classes. Class II comprises 10 isoforms further divided into three subfamilies. It is believed that these isoforms act synergistically and…

Advisors/Committee Members: Schrank, Augusto.

Subjects/Keywords: Metarhizium anisopliae; Proteases : Enzimas

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APA (6^th Edition):

Andreis, F. C. (2016). Evolução molecular de proteases Pr1 (Classe II) de Metarhizium anisopliae. (Thesis). Universidade do Rio Grande do Sul. Retrieved from http://hdl.handle.net/10183/150723

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Andreis, Fábio Carrer. “Evolução molecular de proteases Pr1 (Classe II) de Metarhizium anisopliae.” 2016. Thesis, Universidade do Rio Grande do Sul. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/10183/150723.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Andreis, Fábio Carrer. “Evolução molecular de proteases Pr1 (Classe II) de Metarhizium anisopliae.” 2016. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Andreis FC. Evolução molecular de proteases Pr1 (Classe II) de Metarhizium anisopliae. [Internet] [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2016. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/10183/150723.

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Council of Science Editors:

Andreis FC. Evolução molecular de proteases Pr1 (Classe II) de Metarhizium anisopliae. [Thesis]. Universidade do Rio Grande do Sul; 2016. Available from: http://hdl.handle.net/10183/150723

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30. Ayala Gómez, Antonio. Estudio de la regulación a largo plazo de las enzimas productoras de NADPH implicación del requerimiento de NADPH.

Degree: 1986, Universidad de Sevilla

URL: http://hdl.handle.net/11441/23885

El NADPH es uno de los principales productos finales de los procesos metabólicos, siendo al mismo tiempo sustrato de importantes reacciones metabólicas y de destoxificación.| Advisors/Committee Members: Machado Quintana, Alberto (advisor), Universidad de Sevilla. Departamento de Bioquímica y Biología Molecular (affiliation).

Subjects/Keywords: Enzimas; Metabolismo

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APA (6^th Edition):

Ayala Gómez, A. (1986). Estudio de la regulación a largo plazo de las enzimas productoras de NADPH implicación del requerimiento de NADPH. (Thesis). Universidad de Sevilla. Retrieved from http://hdl.handle.net/11441/23885

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Chicago Manual of Style (16^th Edition):

Ayala Gómez, Antonio. “Estudio de la regulación a largo plazo de las enzimas productoras de NADPH implicación del requerimiento de NADPH.” 1986. Thesis, Universidad de Sevilla. Accessed February 25, 2021. http://hdl.handle.net/11441/23885.

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MLA Handbook (7^th Edition):

Ayala Gómez, Antonio. “Estudio de la regulación a largo plazo de las enzimas productoras de NADPH implicación del requerimiento de NADPH.” 1986. Web. 25 Feb 2021.

Vancouver:

Ayala Gómez A. Estudio de la regulación a largo plazo de las enzimas productoras de NADPH implicación del requerimiento de NADPH. [Internet] [Thesis]. Universidad de Sevilla; 1986. [cited 2021 Feb 25]. Available from: http://hdl.handle.net/11441/23885.

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Council of Science Editors:

Ayala Gómez A. Estudio de la regulación a largo plazo de las enzimas productoras de NADPH implicación del requerimiento de NADPH. [Thesis]. Universidad de Sevilla; 1986. Available from: http://hdl.handle.net/11441/23885

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