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O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência da largura da área de controle de plantas daninhas sobre o desenvolvimento, produtividade e qualidade da laranjeira ‘Pera Rio’. O experimento foi conduzido em um pomar de três anos de idade, localizado no município de Monte Azul Paulista, SP, correspondendo a safra agrícola de 2015/2016. Os tratamentos constaram em larguras de áreas de controle ou convivência com as plantas daninhas, próximas à linha do plantio, e as plantas daninhas foram controladas por meio de capina manual ou herbicida. As larguras das áreas de controle ou convivência com as plantas daninhas foram faixas de 1,0, 2,0 e 3,0 metros; coroamento das plantas em raios de 0,5 e 1,0 metro e o correspondente à projeção da copa, e duas testemunhas: com e sem o controle das plantas daninhas, totalizando 12 tratamentos, em três repetições, dispostos em delineamento experimental em blocos casualizados. As variáveis foram: altura da planta, diâmetro da copa, comprimento do ramo, teor relativo de clorofila total, controle, produtividade e qualidade dos frutos. Os parâmetros de desenvolvimento vegetativo foram avaliados previamente à instalação do experimento e também aos 12 e 18 meses após a avaliação prévia; as notas de controle das plantas daninhas foram atribuídas aos 30 dias após a aplicação, em sete ocasiões, e ao final do ciclo produtivo avaliou-se a produtividade e a qualidade dos frutos. Os dados foram submetidos à análise de variância pelo teste F, sendo as médias comparadas pelo teste de Duncan a 10% de probabilidade. A área de controle influenciou negativamente sobre a parte vegetativa das plantas (exceto a altura da planta). Também influenciou sobre a produtividade, tendo os tratamentos testemunha com controle, o coroamento em um raio de 1,0 metro no limpo e as faixas no limpo de 1,0 e 3,0 metros proporcionados as maiores produtividades. O coroamento das plantas e a faixa tratada de no mínimo 1,0 metro proporcionaram frutos com maior massa, diâmetro (longitudinal e transversal), rendimento de suco e industrial. A convivência da cultura com as plantas daninhas interferiu negativamente no desenvolvimento, produtividade e qualidade dos frutos.

The objective of this study was to evaluate the influence of the width of the control area of weeds on the development, quality and productivity of the orange 'Pera Rio'. The experiment was conducted in an orchard of three years old, located in the municipality of Monte Azul Paulista, SP, corresponding to the season of 2015/2016. The treatments were in control areas widths or coexistence with weeds, near the line of planting, and weeds were controlled by hand weeding or herbicide. The widths of the areas of control or coexistence with the weeds were bands of 1,0; 2,0 and 3,0 meters; crowning of the radius in plant 0,5, 1,0 meters and corresponding to the projection of the crown, and two witnesses: with and without weed control, totaling 12 treatments in three replications in a randomized block . The variables evaluated were: plant height, canopy diameter,…

Advisors/Committee Members: Alves, Pedro Luís da Costa Aguiar [UNESP], Universidade Estadual Paulista (UNESP).

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Atualmente os maiores gastos da citricultura concentram-se na sanidade do pomar. Os custos fitossanitários, juntamente com fertilizantes, ultrapassam 60% do custo da produção. O controle de doenças como a Morte Súbita dos Citros (MSC), Declínio e o Greening, também conhecida como Huanglongbing, são feitos de forma visuais os que conferem ao método um elevado grau de subjetividade e imprecisão. O presente trabalho teve por finalidade desenvolver uma metodologia rápida e segura de diagnóstico para as doenças acima citadas utilizando espectroscopia de fluorescência e fluorescência induzida por laser (FIL). Foram utilizados neste estudo dois porta-enxertos, Cravo e Cleópatra, e quatro variedades de copa, Pêra, Natal, Valência e Hamilim. As doenças estudadas também foram classificadas em diferentes níveis de severidade. O índice 1 foi utilizado para baixa severidade da MSC, e 2 para o estágio mais avançado da doença. Para o Greening fez-se uma distinção entre folhas sintomáticas e assintomáticas. A doença Declínio dos Citros também fez parte deste estudo em função dos sintomas serem muito parecidos aos da fase inicial de MSC, sendo este um problema sério para as avaliações de contaminação no campo. Inicialmente, foram realizados estudos a respeito da emissão de fluorescência dos pigmentos fotossintéticos provenientes dos extratos de folhas doentes e sadias através de um fluorímetro de bancada. Para as análises foliares utilizou-se um sistema portátil de espectroscopia de fluorescência induzida por laser desenvolvido no LOLEIA. O estudo dos extratos revelaram que as maiores variações ocorrem nas concentrações de clorofila a e b e que os pigmentos acessórios como ? e ?- caretonos não fluorescem no comprimento de onda estudado. De uma maneira geral, é possível dizer que plantas doentes sofrem uma diminuição das clorofilas a e b. Os resultados das folhas foram analisados por um método estatístico de Análises de Componentes Principais (PCA) para facilitar a observação das alterações espectrais. Através da metodologia desenvolvida foi possível a identificação e a distinção das doenças com nível de acerto superior a 93%. Contudo, estes resultados contribuíram para o desenvolvimento de uma metodologia para diagnóstico das doenças de citros de uma forma rápida, precisa e economicamente viável.

Currently the largest portion of money applied to citriculture focus on health of the orchard. The phytosanitary costs, along with fertilizers, exceed 60% of the production cost. The control of diseases such as Sudden Death of Citrus (SDC), Decline and Greening, also known as Huanglongbing, is done by visual inspection, which confers to the method a high level of subjectivity and imprecision. This work was intended to develop a quick and safe methodology of diagnosis for the diseases mentioned above using fluorescence spectroscopy and laser-induced fluorescence (LIF). It was used in this study two rootstocks, Cravo and Cleopatra, and four varieties of crown: Pera, Natal, Valencia and Hamlin. The diseases studied were also classified…

Advisors/Committee Members: Milori, Debora Marcondes Bastos Pereira.

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Objetivou-se com este trabalho avaliar o potencial agroclimático e caracterizar áreas de riscos climáticos para a cultura de citros na Mesorregião Agreste do Estado de Pernambuco. Para realizar o Zoneamento Agroclimático foram utilizados dados climáticos distribuídos dentro e nas proximidades da área de estudo, fronteiras com Sertão e Zona da Mata do Estado. Foram utilizadas precipitações médias mensais de 100 postos com séries de dados acima de 20 anos de registros no período de 1911 a 1990. Locais que não dispunham de dados, estimou-se a temperatura média do ar utilizando o programa Estima_T versão 2.0 e na elaboração do balanço hídrico climatológico, foi empregado o método de Thornthwaite &Mather (1955), por meio do programa BHnorm 6.1, adotando-se uma capacidade de água disponível (CAD) de 50 e 100 mm, a partir da evapotranspiração estimada pelo método de Thornthwaite (1948). O Índice de Satisfação das Necessidades de Água (ISNA) foi utilizado para caracterização de riscos climáticos na região. Dados de produção de citros do IBGE disponível na Base de Dados de Pernambuco BDE foram comparados com áreas definidas pelozoneamento para validação dos resultados. A variação anual da temperatura na mesorregião Agreste de Pernambuco com mínima 16,4 C e máxima de 33,4 C não é considerada fator limitante para a produção de citros. No Agreste pernambucano 50 municípios estão na região agroclimática favorável, com pequeno risco climático, 16 na região agroclimática intermediária, com médio risco e 5 na região agroclimática desfavorável, com alto risco climático e elevado déficit hídrico. Agroclimaticamente são mais de 12 mil Km2 favorável para citros, um significativo território a ser explorado, tanto para ampliar áreas já produtivas que hoje somam menos de 0,5% desse total, como também para implantar novas áreas.

The objective of this work was to evaluate the agroclimatic potential and to characterize the climatic risks zoning for citros production in Agreste Pernambuco State. Climatics data inside and next to the area of study was been used. Monthly average precipitations of 100 weather station with series of data above of 20 years of registers was been used. Places that did not make use of data, average temperature was estimate for software Estima_T version 2.0. in the elaboration the water balance climatological, the method of Thornthwaite &Mather (1955) was used, being adopted a capacity of available water (CAD) of 50 and 100 mm, and by using the Thornthwaite method to estimate the evapotranspiration for the method of Thornthwaite (1948). The ISNA (crop water requirement index) was determined using a water balance software (BHnorm 6.1). Values of production of citrus of the available IBGE in the Base of Data of Pernambuco - BDE had been compared with areas defined for the zoning for results validation. The annual variation of the temperature with low 16.4 C and maxim of 33.4 C is not considered a limit factor for the production ofcitros in the region. In Agreste of Pernambuco State 50 counties are in the desirable…

Advisors/Committee Members: Tonny José Araújo da Silva.

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The objective of this work was to evaluate the agroclimatic potential and to characterize the climatic risks zoning for citros production in Agreste Pernambuco State. Climatics data inside and next to the area of study was been used. Monthly average precipitations of 100 weather station with series of data above of 20 years of registers was been used. Places that did not make use of data, average temperature was estimate for software Estima_T version 2.0. in the elaboration the water balance climatological, the method of Thornthwaite &Mather (1955) was used, being adopted a capacity of available water (CAD) of 50 and 100 mm, and by using the Thornthwaite method to estimate the evapotranspiration for the method of Thornthwaite (1948). The ISNA (crop water requirement index) was determined using a water balance software (BHnorm 6.1). Values of production of citrus of the available IBGE in the Base of Data of Pernambuco - BDE had been compared with areas defined for the zoning for results validation. The annual variation of the temperature with low 16.4 C and maxim of 33.4 C is not considered a limit factor for the production ofcitros in the region. In Agreste of Pernambuco State 50 counties are in the desirable region, with small climatic risk, 16 in the intermediate region, with average risk and 5 in the undesirable region, with high risk climatic and high water deficit. Agroclimatic more twelve thousand Km2 than are favorable for citros, a significant territory to be explored, so much to enlarge areas already productive that today they add less than 0,5% of that total, as also to implant new areas.

Objetivou-se com este trabalho avaliar o potencial agroclimático e caracterizar áreas de riscos climáticos para a cultura de citros na Mesorregião Agreste do Estado de Pernambuco. Para realizar o Zoneamento Agroclimático foram utilizados dados climáticos distribuídos dentro e nas proximidades da área de estudo, fronteiras com Sertão e Zona da Mata do Estado. Foram utilizadas precipitações médias mensais de 100 postos com séries de dados acima de 20 anos de registros no período de 1911 a 1990. Locais que não dispunham de dados, estimou-se a temperatura média do ar utilizando o programa Estima_T versão 2.0 e na elaboração do balanço hídrico climatológico, foi empregado o método de Thornthwaite &Mather (1955), por meio do programa BHnorm 6.1, adotando-se uma capacidade de água disponível (CAD) de 50 e 100 mm, a partir da evapotranspiração estimada pelo método de Thornthwaite (1948). O Índice de Satisfação das Necessidades de Água (ISNA) foi utilizado para caracterização de riscos climáticos na região. Dados de produção de citros do IBGE disponível na Base de Dados de Pernambuco BDE foram comparados com áreas definidas pelozoneamento para validação dos resultados. A variação anual da temperatura na mesorregião Agreste de Pernambuco com mínima 16,4 C e máxima de 33,4 C não é considerada fator limitante para a produção de citros. No Agreste pernambucano 50 municípios estão na região agroclimática favorável, com pequeno risco…

Advisors/Committee Members: Tonny José Araújo da Silva.

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COSTA, Paula de Souza Cabral. ExpressÃo de genes em Phytophthora nicotianae que codificam proteÃnas indutoras de respostas de defesa em plantas. 2007. 56p. Tese (Doutorado em Fisiologia Vegetal) â Universidade Federal de Lavras, Lavras, MG*. O estudo da interaÃÃo citros-Phytophthora nicotianae foi focalizado dentro do projeto MilÃnio de Citros, tendo sido gerado um banco de ESTs de Phytophthora nicotianae isolado IAC 095 (PP/CitEST) apÃs induÃÃo in planta e subcultivo in vitro por 40 vezes. Os objetivos deste trabalho foram adequar metodologia para cultivo e separaÃÃo de fases do ciclo de vida de Phytophthora nicotianae de citros e analisar a expressÃo de seus genes que codificam proteÃnas extracelulares indutoras de respostas de defesa em plantas, usando PCR quantitativo (qRT-PCR). Frutos de laranja foram inoculados com discos contendo micÃlio de P. nicotianae. ApÃs a infecÃÃo, o patÃgeno foi purificado em meio de cultura contendo antibiÃticos e 4 fases do seu ciclo de vida foram obtidas: ZoÃsporos, Hifa, Hifa com os esporÃngios cheios e Hifa com os esporÃngios vazios. cDNA foi sintetizado a partir de mRNA obtido das fases e a expressÃo gÃnica foi analisada por meio de qRT-PCR. A condiÃÃo adequada para o cultivo de P. nicotianae de citros in vitro, visando à separaÃÃo de fases do seu ciclo de vida, à em meio de cenoura lÃquido distribuÃdo em erlenmeyers, a 25 C sob luz constante. Para cinco dos oito genes estudados (CBEL, Ric1, Bip, Car e Transglutaminase) o perfil de expressÃo foi similar, apresentando maior expressÃo nas fases de hifa e hifa com esporÃngios vazios. A proteÃna Megaspermina foi mais expressa em zoÃsporos do que em hifa, esporÃngios cheios e vazios. Por outro lado, as proteÃnas 14-3-3 e Sintaxina foram mais expressos em hifa do que nas outras fases estudadas. * Comità Orientador: Prof. Dr. Luciano Vilela Paiva â UFLA (Orientador), Dr MagnÃlia de AraÃjo Campos â UFLA.

COSTA, Paula de Souza Cabral. Phytophthora nicotianae genes expression that encode induced-protein response defense in plants. 2007. 56p. Thesis (Doctor Science in Plant Physiology) â Federal University of Lavras, Lavras, MG*. The study of the Citros-Phytophthora nicotianae interaction was focused into the Citros Milenium project, and it has generated an ESTs database of Phytophthora nicotianae IAC 095 strain (PP/CitEST) after in planta induction and in vitro subculture for 40 times. The objectives of this study were to adequate the methodology to growth and citros Phytophthora nicotianae separation of life cycle phases and analyze its genes expression that codify extracellular proteins inductors of defense response in plants, using a quantitative PCR (RT-PCR). Orange fruits were inoculated with discs containing P. nicotianae mycelia. After infection, the pathogen was purified during the culture containing antibiotics and 4 phases of its life cycle it was obtained: Zoospores, mycelia, mycelia with empty sporangium. cDNA was synthesized from the mRNA obtained from the phases and the gene expression was analyzed by the qRT-PCR. The…

Advisors/Committee Members: MÃrio LÃcio Vilela de Resende, Alessandra Alves de Souza, MagnÃlia de AraÃjo Campos, Luciano Vilela Paiva.

▼ Phytophthora nicotianae Breda de Haan (Phytophthora parasitica Dastur) e Phytophthora citrophthora (Smith & Smith), agentes causadores da gomose e podridão radicular, têm trazido graves danos em viveiros e pomares de citros no mundo inteiro. O Centro de Citricultura Sylvio Moreira/IAC vem realizando um amplo programa de melhoramento genético de citros via cruzamentos dirigidos com relação ao patossistema Phytophthora-citros, em que já foram verificadas diferenças no nível de resistência na progênie do cruzamento entre tangerina Sunki (Citrus sunki) e trifoliata Rubidoux (Poncirus trifoliata), a partir da detecção de genes diferencialmente expressos utilizando microarranjos, identificando transcritos envolvidos na resistência à Phytophthora, e do mapeamento genético. Este trabalho teve como objetivo principal mapear nos grupos de ligação dos mapas de P. trifoliata e C. sunki as regiões genômicas associadas à resistência à Phytophthora parasitica por meio de análise fenotípica (QTLs) e de expressão (eQTLs). Uma população de 110 híbridos, seus genitores e dois porta-enxertos de referência para a citricultura (limão Cravo e citrumelo Swingle), foi enxertada em limão Cravo e estabelecida em casa de vegetação. Cada híbrido foi conduzido com uma única haste e a inoculação foi realizada pelo método do disco a partir do meio de cultura contendo o micélio de P. parasitica, a 10 cm e 15 cm acima da região da enxertia, totalizando duas inoculações por genótipo. As plantas foram mantidas em ambiente com iluminação artificial e fotoperíodo de 16 horas, temperatura de 25°C e umidade relativa (UR) de 85%, com irrigações diárias. As lesões decorrentes foram avaliadas após 60 dias da inoculação, medindo-se o comprimento da área lesionada (CL) após a remoção da casca do ramo. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado com duas repetições do mesmo genótipo e uma planta por parcela. Constataram-se diferenças entre os híbridos, com os CL variando de 1,15 a 11,13 mm. A herdabilidade do caráter foi de 65%. Para o mapeamento de QTLs e eQTLs (QTLs de expressão), mapas de ligação foram previamente construídos de Poncirus trifoliata (L.) Raf. cv. Rubidoux e Citrus sunki Hort. ex Tan. com o uso de marcadores DArT-seqTM e utilizando a estratégia pseudo-testcross. Foram detectados três QTLs associados à resistência à Phytophthora presentes nos grupos de ligação 2, 7 e 10 do mapa de P. trifoliata, e apenas um QTL no grupo de ligação 2 de C. sunki. A proporção da variação fenotípica, explicada pelo QTL, variou de 1,77% a 7,41% para o genitor trifoliata Rubidoux, enquanto que o QTL detectado no mapa da tangerina Sunki, explicou 16,8% do fenótipo. Esses resultados sugerem que há grande possibilidade de sucesso na seleção de híbridos resistentes dentro do experimento. Além disso, 19 genes possivelmente envolvidos em processo de respostas de defesa da planta à infecção do patógeno foram avaliados e validados na população de 51 híbridos selecionados e genitores. As análises dos dados de expressão gênica, bem como as correlações… Advisors/Committee Members: Machado, Marcos Antonio [UNESP], Cristofani-Yaly, Mariângela [UNESP], Universidade Estadual Paulista (UNESP).

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Neste trabalho estão descritas dezesseis substâncias isoladas de C. limonia: xantiletina, seselina, xantoxiletina, trans-kelactona, trans-decursidinol, junosmarina escopoletina, isoescopoletina, demetilsuberosina, xantoarnol, clausarina, limonianina, 5,4-diidróxi-6-(3-metil-2-butenil)-2,2-dimetilpirano(5,6-7,8) flavanona, β-sitosterol, estigmasterol e campesterol; sendo uma destacada, a 5,4- diidróxi-6-(3-metil-2-butenil)-2,2-dimetilpirano(5,6-7,8) flavanona, por ser inédita na literatura; e duas, a trans-kelactona e trans-decursidinol, não isoladas anteriormente em plantas da família Rutaceae, apenas na família Apiaceae. Uma comparação entre os constituintes químicos isolados da parte superior e inferior da planta enxertada C. sinensis sobre C. limonia e do C. limonia não enxertado foi realizada, indicando que a planta enxertada possui um processo de translocação metabólita. São relatadas as Concentrações Mínimas Inibitórias de diversas substâncias, todas isoladas de plantas da família Rutaceae, contra a bactéria causal da Clorose Variegada dos Citros, Xylella fastidiosa. As classes promissoras foram as piranocumarinas e flavanonas, sendo a Xantiletina e a Catequina, com MIC igual a 1,0 mg/mL. Foi realizado um estudo de interação planta-inseto, o qual indicou que a planta enxertada C. sinensis sobre C. limonia apresenta uma alteração na composição química dos seus voláteis e em seus óleos essenciais quando em contato com as cigarrinhas Oncometopia facialis, pertencentes a família Cicadellidae, as quais são transmissores de Xylella fastidiosa, correspondendo a uma resposta da planta ao ataque. A modificação dos constituintes químicos e suas porcentagens foi mais perceptível nos voláteis do que nos óleos essenciais das plantas. A planta enxertada também sofreu uma alteração em um metabólito secundário, a Hesperidina, quando foi feita a análise do teor desta substância em diferentes espécies de Citrus, C. limonia sem CVC, C. reticulata sem CVC, C. sinensis sobre C. limonia com e sem CVC. O C. limonia foi a espécie que apresentou menor quantidade de Hesperidina e C. sinensis sobre C. limonia foi o que apresentou o maior teor. O estudo comparativo da quantidade de Hesperidina da planta enxertada com e sem sintomas de CVC indicou que esta possui uma maior quantidade da substância quando doente, correspondendo a uma alteração metabólita que ocorre na planta quando infectada pela bactéria.

This work describes sixteen substances isolated by C. limonia: xanthyletin, seselin, xanthoxyletin, trans-kellactone, trans-decursidinol, junosmarin, scopoletin, isoscopoletin, demethylsuberosin, xanthoarnol, clausarin, limonianin, 5,4- dihydroxy-6-(3-methyl-2-buthenyl)-2,2-dimethylpyrano(5,6-7,8)flavanone, β- sitosterol, estigmasterol e campesterol. Three of them are especially important: 5,4-dihydroxy-6-(3-methyl-2-buthenyl)-2,2-dimethylpyrano(5,6-7,8)flavanone that was unknown in the literacy, trans-kellactone and trans-decursidinol that werent found previously in the Rutaceae family but at Apiaceae family. The chemical…

Advisors/Committee Members: Maria Fátima das Graças Fernandes da Silva.

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O cultivo de citros representa grande importância para Estado do Amazonas e pode gerar empregos e divisas para o estado. Neste estado, o manejo das plantas daninhas tem sido um dos principais fatores que onera o custo de produção da cultura. Atualmente, o uso do controle químico por meio da aplicação de herbicidas tem sido o mais utilizado no controle de plantas daninhas, entretanto apesar das vantagens desse controle, há necessidade de se conhecer as interações desses herbicidas com as propriedades do solo. Na produção de mudas de citros o substrato é um dos insumos de grande importante para produção de mudas sadias e vigorosas. Este trabalho objetivou quantificar a sorção dos herbicidas diuron e sulfentrazone em diferentes substratos usados em produção de mudas de citros. Dois experimentos foram realizados e adotou-se o delineamento inteiramente casualizado em arranjo fatorial 2x6x6 com quatro repetições, sendo dois herbicidas (diuron e sulfentrazone), seis doses de cada herbicidas de diuron (0; 250; 500; 1.000; 2.000 e 4.000 g do ia. ha-1) e sulfentrazone (0; 75; 150; 300; 600 e 1.200 g do ia. ha-1) e seis substratos: Fibra de coco; terriço; terra preta de índio e a misturas destes com areia lavada, no primeiro experimente. No outro experimento adotou-se o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x7, com quatro repetições, sendo dois herbicidas (diuron e sulfentrazone) e sete doses de cada herbicida, sendo as mesmas doses de ambos os herbicidas utilizados no substrato areia lavada (diuron 0; 2; 4; 8; 12;16 e 20 g do ia. ha-1 e sulfentrazone (0; 2; 4; 8; 12; 16 e 20 g do ia. ha-1). A planta indicadora utilizado foi o pepino (Cucumis sativus var. Aodai). As características avaliadas foram a determinação do valor de I50 da planta-teste para cada substrato em função das doses de cada herbicida e a estimativa da quantidade de diuron e sulfentrazone sorvido em cada substrato. Os resultados mostraram que a fibra de coco foi o substrato que apresentou maior sorção dos herbicidas seguido pela terra preta de índio e terriço e a matéria orgânica contribuiu como componente de importância do solo na sorção de herbicidas.

The citrus cultivation is very important for the state of Amazonas and can generate jobs and foreign exchange for the state. In this state, weed management has been one of the main factors that increases the production cost of the crop. Currently, the use of chemical control by the application of herbicides has been the most used in the control of weeds, however despite the advantages of this method, it is necessary to know the interactions of these herbicides with the properties of the soil. In the production of citrus seedlings the substrate is one of the important inputs for the production of healthy and vigorous seedlings. This work aimed to quantify the sorption of diuron and sulfentrazone herbicides in different substrates used in the production of citrus seedlings. Two experiments were carried out in a completely randomized design and 2x6x6 factorial…

Advisors/Committee Members: Silva, José Ferreira da, 193.507.246-34, http://lattes.cnpq.br/8760056168062986, Pinto, Ernesto Oliveira Serra, Fernandes, Rinaldo Senna, [email protected].

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A morte súbita dos citros (MSC) causou a morte ou erradicação de aproximadamente quatro milhões de plantas de laranja doce na principal região citrícola do Brasil. Embora sua etiologia ainda não esteja completamente resolvida, seus sintomas e distribuição (especial e temporal) indicam uma provável doença viral. Trabalhos anteriores associaram a MSC ao vírus da tristeza dos citros (CTV) e ao CSDaV (Citrus sudden death-associated virus), no entanto, os resultados obtidos destes trabalhos não são conclusivos. Afim de estudar as populações de vírus presentes em plantas de citros afetadas pela MSC, este trabalho realizou uma análise comparativa, através do sequenciamento de alta performance do transcriptoma e dos pequenos RNAs de plantas sintomáticas e assintomáticas para MSC. Os dados revelaram uma infecção viral mista, incluindo o CTV como vírus mais predominante, seguido do CSDaV, um pararetrovírus endógeno de citros (CitPRV) e dois possíveis novos vírus, putativamente denominados de Citrus jingmen-like virus (CJLV) e Citrus virga-like virus (CVLV). As análises de correlação com a MSC indicaram uma provável associação de plantas sintomáticas com o CitPRV, enquanto que os dois novos vírus mostraram estar mais associados com plantas assintomáticas. A associação mais evidente foi observada entre plantas sintomáticas e um genótipo específico de CSDaV, o que nos conduziu a um estudo mais específico de variabilidade genética de 31 isolados de CSDaV, obtidos de plantas MSC-sintomáticas e assintomáticas. As análises de cinco regiões genômicas parciais do CSDaV, que correspondem aos domínios da metiltransferase, região de múltiplos domínios (MDR), helicase, RNA-dependente de RNA polimerase e capa proteica, mostraram que a região MDR apresentou maior diversidade genética. A diversidade nucleotídica (π) foi baixa para os isolados de CSDaV, e as análises filogenéticas revelaram a predominância de dois grupos principais, sendo que um deles se mostrou mais associado às plantas sintomáticas, o que foi coerente com os resultados relatados anteriormente. Além disso, os isolados de plantas sintomáticas mostraram maior diversidade nucleotídica, maiores taxas da relação dN/dS, e maior número de aminoácidos alterados, principalmente nas regiões mais próximas da região 5' terminal. Este trabalho gerou informações novas e importantes sobre o patossistema MSC. Tais informações foram consideradas para construção de um clone de cDNA do CSDaV, que poderá ser utilizado em outros estudos de etiologia, e também devem ser consideradas em futuros estudos epidemiológicos.

Citrus sudden death (CSD) is a disease that caused death or eradication of approximately four million orange trees in a very important citrus region in Brazil. Although its etiology is still not completely clear, symptoms and distribution of affected plants indicate a viral disease. Previous works have associated Citrus trsiteza vírus (CTV) and Citrus sudden death-associated virus (CSDaV) with CSD, but all attempts to prove these association have failed so far. In attempting to…

Advisors/Committee Members: Machado, Marcos Antonio [UNESP], Universidade Estadual Paulista (UNESP).

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A cinza de bagaço de cana-de-açúcar, gerada pela queima do bagaço da cana-de-açúcar para produção de energia elétrica no setor sucroenergético, vem sendo aplicada ao solo sem critério técnico/científico. Desta forma, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da aplicação de cinza de bagaço de cana-de-açúcar, quando incorporada ao solo ou quando aplicada em superfície, nos atributos físicos e químicos de um Argissolo Vermelho, no crescimento das laranjeiras, na produção de frutas e na qualidade do suco, dois, três e quatro anos após a aplicação do resíduo no solo. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso, com cinco tratamentos e cinco repetições. As doses de cinza foram 0, 5, 10, 20 e 40 t ha-1 (base seca). Concluiu-se que a cinza de bagaço de cana-de-açúcar, até a dose de 40 t ha-1, pode ser distribuída em solos agrícolas, sendo esta, portanto, uma alternativa para o emprego deste resíduo, sem que o solo seja degradado física e quimicamente, e sem causar prejuízos ao desenvolvimento das laranjeiras, produção e qualidade do suco.

The ash generated by burning the sugarcane bagasse for electricity production on the sugar and ethanol industry, is being applied to the soil without technical/scientific criteria. Thus, the objective of this study was to evaluate the effect of application of sugarcane bagasse ash on soil physical and chemical attributes and on orange trees growth, and fruit and juice quality. The experimental design was randomized blocks, with five treatments and five replications. The ash doses were 0, 5, 10, 20 and 40 t ha-1 (dry basis). The results showed that application of sugarcane bagasse ash to the soil up to 40 ton ha-1 did not affect soil or plant attributes, being an alternative use of this residue on agricultural soils.

Advisors/Committee Members: Corá, José Eduardo [UNESP], Universidade Estadual Paulista (UNESP).

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Citrus crop activities have great economic relevance to the State of São Paulo, accounting for some 60% of the worlds orange juice production. However, an objective monitoring system has not yet been established for the citrus planted area, one supported by solid precepts of statistics and probability. Thus, the present study proposes a method to estimate the cultivated citrus area using a multistage, stratified probabilistic sampling design, tested in the leading producing regions of the State of São Paulo. The study methodology was divided into three parts. i) Data preparation: Pre-processing of satellite images, definition of sampling and non-sampling areas and selection of citrus reference area and control area. ii) Stratification and segment definition: Stratification of the study area and definition of the segment conducted in two stages. In the first, data from the citrus area of a 1998-2007 time series were analyzed to define the administrative regions that contained the study area. In the second, study area stratification was carried out by an area density indicator. A Monte Carlo simulation also was implemented to set the size of the regular segment through estimates of regional totals from a pilot study and iii) Estimates and inferences: the sampling size of the reference and control areas was defined and the draw of the samples carried out. A mapping of the area of citrus was conducted for each drawn segment (sampling unit). Interpretation results of the sampled citrus segments were used in the estimator of the direct expansion of the citrus area in the region studied. Finally, confidence intervals were calculated for the estimated totals and for the effect of the sample design. The estimated area under citrus was 527 thousand hectares. Thus, based on the objectives of this research, it is possible to conclude that: (i) The proposed model can reduce the variability of estimates by 80% when compared to a simple random sampling (SRS) model, (ii). By dividing the study area into sampling and non-sampling areas the heterogeneity of the study area was reduced, (iii) The best segment size for estimating the citrus area is 25 ha, based on the results of the Monte Carlo simulation, (iv) Although the optimal sample size was calculated according to the pilot estimates and a 5% variation coefficient, a Monte Carlo simulation with 10,000 random drawings of different sample sizes demonstrated the need to increase the number of samples and, (v) The procedure of obtaining the citrus area by mapping the sampling units was performed in a set of LANDSAT-5 TM imagery (10m) made it possible to output the estimates of the cultivated citrus areas, thereby reducing field visits. Therefore the data mining process to estimate the citrus area became more agile and less costly.

A atividade citrícola no Estado de São Paulo tem grande relevância econômica e é responsável por aproximadamente 60% da produção mundial de suco de laranja. Apesar disso, ainda não dispõe de um sistema objetivo de acompanhamento de sua área plantada…

Advisors/Committee Members: Bernardo Friedrich Theodor Rudorff, Maurício Alves Moreira, Antonio Roberto Formaggio, Francisco Alberto Pino.

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Atualmente o Brasil ocupa lugar de destaque entre os produtores de citros sendo o maior produtor de laranja doce do mundo. Entretanto, essa produção vem sendo gravemente afetada, por doenças como o huanglongbing (HLB), que tem causado perdas significativas para toda cadeia citrícola. O HLB está associado a bactérias Gram-negativas, restritas ao floema das plantas, denominadas Candidatus Liberibacter spp., que além de reduzir a produção de frutos, podem, em casos mais severos da doença, ocasionar a morte da planta. Uma importante estratégia para controle desta doença é a produção de plantas transgênicas expressando genes, especificamente no local de colonização do patógeno. O objetivo deste trabalho foi a obtenção de plantas transgênicas de Citrus sinensis cvs. \'Peraé \'Natal\', contendo o gene atacina A (attA) que codifica um peptídeo antibacteriano, dirigido por promotores preferencialmente expressos no floema: AtSuc2 (transportador de sacarose) ou AtPP2 (proteína de floema 2), clonados de Arabidopsis thaliana, ou CsPP2 (proteína de floema 2) clonado de Citrus sinensis. A identificação de 65 plantas transgênicas foi realizada, por meio da análise de PCR. Foi verificado um número menor de eventos transgênicos, utilizando-se a construção gênica pCAtSuc2/attA em relação ao número de eventos transgênicos obtidos com as construções gênicas pCCsPP2/attA e pCAtPP2/attA. Plantas identificadas como transgênicas pela análise de PCR, foram aclimatizadas e transferidas para casa-devegetação certificada para o cultivo de plantas transgênicas. Análises de Southern blot foram realizadas em plantas aclimatizadas que apresentaram desenvolvimento suficiente, confirmando-se a integração do gene attA. A expressão do gene attA foi confirmada pela análise de RT-qPCR. As plantas transgênicas obtidas neste trabalho, contendo o gene attA dirigido por promotores preferencialmente expressos no floema, serão avaliadas em uma etapa futura para resistência a Candidatus Liberibacter spp.

Currently, Brazil is a major citrus producer and the world\'s largest producer of sweet oranges. However, diseases, such as huanglongbing (HLB) have seriously affected this production, causing significant losses in citrus production chain. HLB is associated with Gram-negative bacterias, restricted to the phloem of plants, called Candidatus Liberibacter spp., which besides reducing fruit production, can lead to plant death. An important strategy to control this disease is the production of transgenic plants expressing genes, specifically at the region of pathogen colonization. The aim of this study was to obtain transgenic plants of Citrus sinensis cv. \'Natalánd \'Pera\', containing the gene attacin A (attA) that encodes an antibacterial peptide, driven by preferentially expressed in phloem promoters: AtSuc2 (sucrose transporter) or AtPP2 (phloem protein 2), cloned from Arabidopsis thaliana, or CsPP2 (phloem protein 2) cloned from Citrus sinensis. The identification of 65 transgenic plants was performed by PCR analysis. A lower number of transgenic…

Advisors/Committee Members: Mendes, Beatriz Madalena Januzzi.

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A citricultura brasileira destaca-se como a de maior expressão em nível mundial, com cerca de 27,9% da produção mundial de laranjas e 59% da produção global de suco concentrado congelado de laranja. No entanto, apresenta uma vulnerabilidade que é o predomínio de uma única espécie de porta-enxerto, o limão \'Cravo\', com aproximadamente 85% das plantas cítricas plantadas sobre ele. Assim, uma maior diversificação dos porta-enxertos é necessária mas isto depende também da obtenção e da disponibilização de variedades superiores ao limão Cravo. O porta-enxerto é de fundamental importância na formação da muda cítrica, visto que ele interfere em vários aspectos da planta enxertada, dentre eles o vigor da copa e o tamanho das plantas. Atualmente, devido ao surgimento de novas doenças e a necessidade de maximização dos recursos alocados na propriedade citrícola, tem sido utilizado o plantio de pomares mais adensados, com consequentemente aumento no interesse da produção de plantas com menor porte. Uma das possibilidades de se obter plantas de porte baixo é por meio do uso de portaenxertos ananicantes ou semi-ananicantes, sendo que alguns autores já verificaram que plantas autotetraplóides, quando usadas como porta-enxertos, induzem à formação de plantas de porte baixo. O objetivo inicial deste trabalho foi obter e identificar plantas autopoliplóides de limão Cravo, tangerinas Cleópatra e Sunki, utilizando-se o método de cultivo in vitro de segmentos de epicótilo temporariamente em meio de cultura contendo colchicina, seguido de regeneração das brotações em meio sem o alcalóide. A colchicina causou toxidez aos explantes, nos diversos tempos de cultivo e concentrações testadas. Várias plantas foram obtidas e dentre estas, 27 foram selecionadas por possuir características morfológicas semelhantes à plantas poliplóides. A seguir, foram realizados experimentos com seis plantas selecionadas (duas de cada espécie) visando confirmar a ploidia e a origem nucelar, além de caracterizar a morfologia das folhas, a densidade estomática e alguns parâmetros fisiológicos. Dentre as seis plantas, apenas quatro foram confirmadas como sendo autotetraplóides pelo método de citometria de fluxo. Estas, geralmente apresentaram folhas com comprimento significativamente menor, maior espessura do limbo foliar e menor densidade estomática nas folhas. Todas as seis plantas apresentaram alguma modificação em parâmetros fisiológicos, mas ainda não se pode determinar se estas modificações poderão afetar as taxas de crescimento.

The Brazilian citriculture stands out as the greatest expression worldwide, with about 27.9% of world production of oranges and 59% of global production of frozen orange juice concentrate. However, it presents a vulnerability that is the predominance of a single species of rootstock, the \'Cravoĺemon, with approximately 85% of citrus planted on it. Thus, greater diversification of rootstocks is necessary, which also depends on obtaining and provision of superior kind of lemon Cravo. The rootstock is of fundamental importance…

Advisors/Committee Members: Latado, Rodrigo Rocha.

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A citricultura brasileira é a maior produtora e exportadora de citros e tem sido afetada por doenças que causam sérios prejuízos a produção e a qualidade dos frutos. No entanto, a cultura apresenta grandes problemas, entre eles, os fatores fitossanitários, que vem dizimando milhares de plantas e afetando a produtividade e a competitividade do setor. Atualmente, o huanglongbing (HLB), associado às bactérias de floema Candidatus Liberibacter spp., é considerado uma das mais destrutivas doenças de citros. A inexistência de cultivares de laranja doce resistentes ao HLB torna a transformação genética de citros uma ferramenta importante no controle desta doença. Para se defender do ataque de pragas e patógenos as plantas desenvolveram, durante o processo evolutivo, uma série de mecanismos de defesa, no qual pode-se incluir a produção de peptídeos com atividade antimicrobiana. As defensinas vegetais são peptídeos pequenos relacionadas à patogênese (PR), que possuem atividade antimicrobiana associada aos mecanismos de defesa das plantas. Assim, o objetivo deste trabalho foi a obtenção de plantas transgênicas de laranja doce (Citrus sinensis L.) cvs. \'Hamlin\', \'Natal\', \'Valênciaé \'Pera\', via Agrobacterium tumefaciens, superexpressando o gene codificador de defensina (def), isolado de Citrus sinensis cv. \'Valência\', dirigido pelo promotor com expressão preferencial no floema AtSUC2 (transportador de sacarose, clonado de Arabidopsis thaliana) ou pelo promotor constitutivo CaMV 35S (clonado do vírus do mosaico da couve-flor). Os explantes utilizados na transformação genética foram segmentos de epicótilo obtidos de plantas germinadas in vitro. A identificação das plantas transgênicas foi realizada por meio da análise da PCR, utilizando-se primers para a detecção do fragmento do gene de seleção nptII. As plantas PCR+ foram aclimatizadas e transferidas para casa-de-vegetação. A análise de Southern blot confirmou a integração do transgene em 36 plantas. Foram obtidas 7 plantas transgênicas da cultivar \'Hamlin\', 9 da cultivar \'Natal\', 1 da cultivar \'Peraé 9 da cultivar \'Valênciaćontendo a construção gênica pC35S/def, e 3 plantas transgênicas da cultivar \'Hamlin\', 6 da cultivar \'Natalé 1 da cultivar \'Valênciaćontendo a construção gênica pcAtSUC2/def. Os resultados obtidos neste trabalho serão importantes para futura avaliação e estudo visando o controle de Candidatus Liberibacter spp..

The Brazilian citrus industry is the world\'s largest producer and exporter of citrus, however, it has been affected by diseases that cause serious production losses and damages to fruit quality. However, the culture faces problems, namely phytosanitary issues that have been damaging thousands of plants, affecting yield and competitiveness of the sector. Currently, Huanglongbing (HLB), associated with phloem bacteria Candidatus Liberibacter spp., is considered one of the most destructive citrus diseases. The lack of sweet orange cultivars resistant to HLB makes genetic transformation an important tool in the disease…

Advisors/Committee Members: Mendes, Beatriz Madalena Januzzi.

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O parasitoide Ageniaspis citricola Logvinovskaya é o principal agente de controle biológico do minador-dos-citros Phyllocnistis citrella Stainton. No entanto, com a detecção do huanglongbing houve um aumento no uso de inseticidas nos pomares cítricos e não se conhece seus efeitos à A. citricola. Desta maneira, estudou-se o efeito letal de cinco inseticidas e a persistência aos 3, 7, 10, 17 e 24 dias após a pulverização em mudas de citros mantidas em casa de vegetação ao parasitoide A. citricola, nas dosagens especificadas (g i.a. L-1): imidacloprido 0,04 (Provado® 200 SC), clorpirifós 0,72 (Lorsban® 480 BR), bifentrina 0,02 (Talstar® 100 EC), beta-ciflutrina 0,0125 (Turbo® 50 EC), abamectina 0,0054 (Vertimec®), bem como o efeito subletal no parasitismo em fêmeas expostas por 24 horas aos resíduos de abamectina. Imidacloprido, clorpirifós, bifentrina e beta-ciflutina foram considerados nocivos para adultos de A. citricola (M > 75%), enquanto que, abamectina foi considerado inócuo (M < 25%). Com base na duração do efeito nocivo, clorpirifós e beta-ciflutrina foram considerados de vida curta (< 5 dias), enquanto que, imidacloprido foi levemente persistente (5-15 dias) e bifentrina moderadamente persistente (16-30 dias). Abamectina não alterou a taxa de parasitismo de A. citricola, mas alterou substancialmente a razão sexual (0,11) quando comparado ao tratamento controle (0,5). Os resultados indicam que deve-se ter cautela em recomendar os produtos avaliados, observando-se o efeito residual daqueles produtos considerados nocivos à A. citricola, de forma a explorar a seletividade ecológica. Abamectina, embora inócua a adultos do parasitoide, pode levar a uma redução populacional de A. citricola, devendo-se realizar estudos de campo para elucidar essa questão.

Ageniaspis citricola Logvinovskaya is the main biological control agent of Phyllocnistis citrella Stainton. However, with the huanglongbing report, there was an increase in the use of insecticides in citrus orchards and the effects on A. citricola are not known. Thus, we studied the lethal effects of five insecticides and the persistence on 1, 3, 7, 10, 17 and 24 days post application in seedlings of citrus kept in greenhouse, using the specified dosages (g a.i. L-1): imidacloprid 0.04 (Provado® 200 SC), chlorpyriphos 0.72 (Lorsban® 48 BR), bifenthrin 0.02 (Talstar® 10 EC), beta-cyfluthrin 0.0125 (Turbo® 5 EC), abamectin 0.0054 (Vertimec® 18 EC), as well as the sublethal effect on the parasitism by females exposed to residues of 24 hours of abamectin. Imidacloprid, chlorpyriphos, bifenthrin and beta-cyfluthrin were considered harmful to A. citricola (M > 75%) and abamectin were considered harmless (M < 25%). Chlorpyriphos and beta-cyfluthrin were considered of short life (< 5 days), imidacloprid slightly persistent (5-15 days) and bifenthrin moderately persistent (16-30 days). Abamectin did not affect the parasitism by A. citricola, but the sex ratio, with a sex ratio of 0.11 against 0.5 of the control. The results indicate…

Advisors/Committee Members: Yamamoto, Pedro Takao.

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Na busca por compostos voláteis para utilização no manejo comportamental de Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae), a resposta destes insetos foi avaliada frente às substâncias liberadas por plantas de laranja, Citrus sinensis (L.) Osbeck, variedade \'Pêra\', enxertadas sobre limão-cravo, C. limonia Osbeck, sadias vs sintomáticas para Huanglongbing (HLB). Voláteis destas plantas, bem como seus extratos foram testados em olfatômetro \'Yé analisados por GC-MS. Somente fêmeas foram atraídas, tanto para os voláteis quanto para os extratos, e preferencialmente os de plantas doentes. Foram encontrados 47 compostos em extratos de plantas sadias e doentes, dos quais 11 [hexanal; α-tujeno; α-pineno; sabineno; β-mirceno; α-terpineno; limoneno; linalol; composto 37 (não identificado); β-elemeno e β-copaeno] presentes em maior quantidade nos extratos de plantas doentes, sendo que 3 desses compostos (sabineno, linalol e β -elemeno) foram majoritários nos extratos de ambas as plantas, doentes e sadias. Esses três compostos, bem como uma substância padrão para atração (salicilato de metila), foram testados em diferentes concentrações e misturas em laboratório, casa-de-vegetação e campo. O efeito destas substâncias foi dependente de sua concentração e, embora limoneno tenha alterado a resposta comportamental das fêmeas, apenas salicilato de metila e linalol foram atraentes. Em laboratório, a mistura desses dois compostos apresentou efeito sinérgico na atração de fêmeas e, em casa-de-vegetação, a adição de linalol junto a plantas de citros aumentou a atratividade das mesmas para insetos adultos, sugerindo importante participação desses compostos no processo de seleção hospedeira pelo inseto. Estes resultados acrescentam novas informações para a busca de um atraente para D. citri visando o manejo comportamental do inseto vetor das bactérias Liberibacter, associadas ao HLB, a mais importante doença dos citros no mundo.

With the aim of searching for volatile compounds to use in behavioral management of Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae), the response of these insects was assessed against the substances released by sweet orange [Citrus sinensis (L.) Osbeck], variety \'Pera\', grafted on Rangpur (C. limonia Osbeck), healthy and Huanglongbing (HLB) symptomatic plants. Plant volatiles as well as plant extracts were tested in Y-tube olfactometer assays and analyzed by GC-MS. Only females were attracted to plant volatiles and extracts and they preferred those from HLB-infected plants. A total of 47 compounds was found in the extracts from healthy and infected plants, from which 11 [hexanal; α-thujene; α-pinene; sabinene; β- myrcene; α-terpinene; limonene; linalool; compound37 (not identified); β-elemene; and β-coapene] were present in higher amounts in infected plant extracts. Three of these volatiles (sabinene, linalool and β-elemene) represented major compounds in both infected and healthy plant blend extracts. These three compounds, as…

Advisors/Committee Members: Bento, José Maurício Simões.

▼ A cultura de citros exige aplicações constantes de fertilizantes para atingir níveis satisfatórios de produtividade. Fertilizantes contêm outros elementos químicos além daqueles de interesse, como, por exemplo, os elementos terras raras (ETR). Estudos mostram que aplicações de ETR podem aumentar o crescimento e a produtividade das plantas como também causar efeitos nocivos ao ambiente e ao homem. No Brasil, não é prática comum a adição de ETR em fertilizantes, porém alguns insumos contêm em sua composição. Os objetivos deste trabalho foram quantificar os ETR nos compartimentos planta, solo e insumos de agroecossistemas citrícolas, avaliar o modelo de distribuição, identificar as principais fontes de ETR e estudar os efeitos desses elementos na planta cítrica. Para determinação dos ETR, utilizou-se da análise por ativação neutrônica instrumental (INAA) e espectrometria de massas com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS). Foram feitos experimentos no campo e em casa-de-vegetação. O experimento de campo foi realizado em quatro propriedades de citros, sendo duas sob sistema de produção orgânico e duas sob o sistema de produção convencional, na região de Borborema, SP, com a variedade Valência (Citrus sinensis L. Osbeck) enxertada sobre limão cravo (Citrus limonia Osbeck),. Amostraram-se 15 plantas em cada propriedade, sendo coletados folhas, frutos, solos e os principais insumos empregados. As concentrações de ETR nas folhas bem como o fator de transferência solo-planta foram semelhantes aos de plantas bioacumuladoras. As folhas assim como as partes do fruto apresentaram depleção de Ce. Na fruta cítrica, a concentração dos ETR apresentou a seguinte distribuição: casca > polpa > sementes = suco. As maiores concentrações de ETR nos insumos foram observadas para os fertilizantes fosfatados. O delineamento experimental utilizado nos dois experimentos em casa-de vegetação foi em blocos ao acaso. Nos experimentos em casa-de-vegetação com superfosfato simples e cloreto de lantânio realizou-se a semeadura de sementes de limão cravo em tubetes de polipropileno. Para o experimento com superfosfato simples, as plantas de limão cravo permaneceram nos tubetes por 6 meses e, a partir desse período, iniciou-se o transplante para sacos plásticos. Os tratamentos constituíram-se de diferentes doses de superfosfato simples (50 g, 100 g, 200 g, 400 g) aplicadas ao substrato. Após 2 meses, coletaram-se as plantas de limão cravo e analisaram-se as folhas e o caule. No experimento com cloreto de lantânio, a aplicação dos tratamentos (50 mg, 100 mg, 200 mg, 400 mg) deuse após 98 dias da semeadura. Três semanas após, coletaram-se as plantas. A planta de citros do estudo pode ser considerada uma bioacumuladora de ETR. Houve discriminação entre os sistemas de produção em 2005, 2006 e 2007 para Eu, Tb, Yb e Sc nos compartimentos solo e folha, com uma concentração significativamente (p<0,05) maior no sistema de produção orgânico. O limão cravo absorve ETR do fertilizante superfosfato simples. A planta de citros teve sua fisiologia alterada com a… Advisors/Committee Members: Fernandes, Elisabete Aparecida De Nadai.

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O Brasil é o maior produtor mundial de citros, com aproximadamente 455 milhões de caixas por ano. No país os principais problemas da cultura estão relacionados a fitopatologias e ataques de fitófagos, que diminuem a produtividade e afetam os preços do produto no mercado. Nesse contexto, o controle desses insetos se faz necessário para que sejam evitadas perdas econômicas e produtivas. Assim, as aranhas surgem como potenciais agentes de controle, devido à estratégia trófica que adotam, sendo completamente dependentes da predação, auxiliando na regulação de espécies-praga em cultivos comerciais. O presente trabalho teve como finalidade lançar mão da análise dos isótopos estáveis 13C e 15N, para determinar as principais fontes de carbono e nível trófico das principais famílias e grupos de aranhas presentes em cultivos de citros no município de Gavião Peixoto - SP. Foram coletados 4.832 indivíduos, distribuídos em 17 famílias, das quais 12 eram comuns às duas áreas estudadas; as famílias foram classificas em sete guildas funcionais. Através análise dos isótopos 13C e 15N foi possível determinar o percentual de carbono dos citros presente na alimentação das principais famílias e grupos amostrados, além do nível trófico médio. Os resultados indicaram que as famílias diferem na dependência de teias alimentares baseadas nos citros. Além disso, os dados coletados sugerem que a estrutura do ambiente, a arquitetura vegetal, o estado fenológico dos citros, as práticas de manejo e variações sazonais do clima, podem ter sido os principais fatores de variação na abundância das famílias e dependência do carbono dos citros por parte das aranhas. Salticidae e Theridiidae foram as principais famílias amostradas, por apresentarem maior abundância relativa e estarem presentes ao longo de todo o período de coletas.

Brazil is the world largest citrus producer, with about 455 million boxes per year. In the country the main problems faced by the planters are related to phytopathologies and phytophagous attacks that reduce productivity and can affect the prices of the product in the market. In this scenario, the control of phytophagous is necessary to avoid economic and productivity losses. Thus, spiders populations emerge as a potential control agent, due to the trophic strategy, completely dependent upon predation, therefore assisting in the regulation of pest species in the field. This study aimed to determine, through the analysis of 13C and 15N isotopes, the main sources of carbon and the trophic level of the most abundant families of spiders collected in two citrus orchards in the municipality of Gavião Peixoto - SP. 4832 spiders distributed among 17 families were collected, of which 12 were common to the two studied areas. The families were assembled into 7 functional guilds. By analyzing the isotopes 13C and 15N it was possible to measure the percentage of carbon coming from the citrus, present in tissues of the main spider families and groups sampled, plus the average trophic level. The results indicated that families differ in…

Advisors/Committee Members: Moreira, Marcelo Zacharias.

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The current trend adopted by the lawmaking agencies of food production and consumers has demanded a progressive removal of chemical additives in food production. The essential oils found in medicinal, aromatic and seasoning plants have interested to the food industries as an alternative to synthetic additives. Essential oils present an antimicrobial activity against a great number of decaying and/or pathogenic bacteria, including species resistant to antibiotics and antifungal. Lemon production, in addition to destined to âin naturaâ consumption and juice industry, meant also for the extraction of the essential oil. With the purpose of evaluating the inhibitory effect of essential oils of the rind and leaf of e Citrus limonia Osbeck (Cravo-lemon), Citrus aurantifolia (Chrst.) Swingle (Galego-lemon) and Citrus latifolia Tanaka (Tahiti-lemon), experiments were accomplished in laboratory by utilizing the agar dish hole diffusion method with bacteria Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa and with yeast Candida utilis For the fungus Penicillium expansum, important food âdecaying pathogens. In the results of the in vitro tests, essential oils tested promoted the inhibition of all the tested microorganisms; but, they presented the best formation of inhibition haloes on yeast Candida utilis. For the bacteria, the oils promoted better inhibition on Staphylococcus aureus than on Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. The inhibitory effect of the citros oils was effective on fungus Penicillium expansum; but the essential oil of the Cravo-lemon rind stimulated the mycelial growth of the fungus. It was possible to verify that the oils in study possess inhibitory effect on the studied microorganisms, which enables to corroborate that essential oils are an alternative in the biologic control of microorganisms, its being an alternative to obtaining natural foods.

A atual tendÃncia dos ÃrgÃos legisladores de produÃÃo de alimentos e dos consumidores tem exigido uma progressiva retirada de aditivos quÃmicos na produÃÃo de alimentos. Os Ãleos essenciais encontrados em plantas medicinais, aromÃticas e condimentares tÃm interessado Ãs indÃstrias alimentÃcias como uma alternativa aos aditivos sintÃticos. Os Ãleos essenciais apresentam atividade antimicrobiana contra um grande nÃmero de bactÃrias deterioradoras e ou patogÃnicas, incluindo espÃcies resistentes a antibiÃticos e antifÃngicos. A produÃÃo de limÃo, alÃm de destinar-se ao consumo âin naturaâ e à indÃstria de sucos, destina-se tambÃm à extraÃÃo do Ãleo essencial. No intuito de avaliar o efeito inibitÃrio dos Ãleos essenciais da casca e da folha de Citrus limonia Osbeck (limÃo-cravo), Citrus aurantifolia (Chrst.) Swingle (limÃo-galego) e Citrus latifÃlia Tanaka (limÃo-tahiti), experimentos foram realizados, em laboratÃrio, utilizando-se o mÃtodo de difusÃo cavidade placa Ãgar com as bactÃrias Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa e com a levedura Candida utilis. Para o fungo Penicillium expansum, foi observado o…

Advisors/Committee Members: Luiz Ronaldo de Abreu, Maria das GraÃas Cardoso, Roberta Hilsdorf Piccoli.

▼ O Brasil à o maior produtor de citros do mundo, sendo responsÃvel por mais de 20% da produÃÃo mundial. No entanto, a produÃÃo ainda à baixa devido a muitos problemas fitossanitÃrios, a exemplo do DeclÃnio dos Citros. O DeclÃnio dos Citros à uma anomalia cuja causa ainda nÃo foi determinada. As Ãrvores que comeÃam a declinar nÃo se recuperam, chegam a um estÃgio de declÃnio crÃnico, mas raramente morrem. Embora o DeclÃnio dos Citros tenha sido descrito hà mais de 100 anos, sua etiologia ainda à desconhecida. Consequentemente, nÃo existem medidas de controle para minimizar as perdas na produÃÃo, fato esse que piora, considerando que os sintomas sà sÃo detectados apÃs 3 anos, quando as plantas entram em produÃÃo. O uso de variedades resistentes à considerada a medida de controle mais adequada. Contudo, pouco se conhece sobre os genes envolvidos na resposta de defesa das plantas a essa anomalia. Considerando que muitas alteraÃÃes fisiolÃgicas associadas com respostas a estresses em plantas sÃo controladas ao nÃvel transcripcional, neste estudo objetivou-se a identificaÃÃo e caracterizaÃÃo de produtos de expressÃo gÃnica expressos diferencialmente na resposta ao DeclÃnio dos Citros. Para isso, foi utilizada a tÃcnica de biblioteca subtrativa supressiva (Supression Subtractive Hybridization) utilizando de mRNAs isolados de raÃzes de limoeiro âCravoâ (Citrus limonia L. Osbeck) sob laranja âPeraâ (Citrus sinensis L. Osbeck) com e sem o DeclÃnio. A identificaÃÃo da possÃvel funÃÃo dos genes/ESTs isolados foi realizada por comparaÃÃo de seqÃÃncia com outros genes descritos em bancos de dados de genes. Adicionalmente, a presenÃa da anomalia DeclÃnio foi confirmada mediante anÃlise eletroforÃtica do perfil protÃico em gel âSDS-PAGEâ (Sodium Dodecyl Sulfate polyacrylamide Gel Eletrophoresis) das proteÃnas de raÃz de limÃo âCravoâ (Citrus limonia Osbeck). Foram construÃdas duas bibliotecas subtrativas de cDNAs, uma enriquecida com cDNA diferencialmente de Ãrvores com alto grau do DeclÃnio (forward) e outra enriquecida com genes expressos em plantas amostradas como sadias (reverse). Foram obtidos 129 clones de genes diferencialmente expressos, dos quais 38 representam a biblioteca forward e 91, a biblioteca reverse. ApÃs anÃlise, constatou-se que 45% dos clones da biblioteca subtrativa supressiva vindas de mRNA isolados de Ãrvores com alto grau do DeclÃnio estavam associados a proteÃnas de senescÃncia, enquanto somente 20% desses clones foram identificados na biblioteca subtrativa supressiva vindas de mRNA isolados de plantas sadias. Outros genes foram isolados, apresentando funÃÃes similares relacionadas a proteÃnas, como: LEA do tipo dehidrina, citocromo P450 tipo TBP, provÃvel germina, proteÃna do tipo metalotioneÃna, hidrolase, ubiquitina, proteÃna 14-3-3, que tÃm a funÃÃo de responder a uma gama de estÃmulos e/ou fatores ambientais biÃticos ou abiÃticos e principalmente o de estresse hÃdrico, tambÃm aquelas com funÃÃes hipotÃticas e as que nÃo tiveram nenhuma similaridade com proteÃnas depositadas em banco de dados. Pelos… Advisors/Committee Members: Antonio Chalfun Junior, Miguel Dita Angel Rodriguez, Luciano Vilela Paiva, CustÃdio Donizete dos Santos.

▼ Os protocolos utilizados para transformação genética de citros têm resultado numa baixa eficiência de transformação, com obtenção de pequeno número de plantas transgênicas, além de utilizarem material juvenil como fonte de explantes necessitando de um longo período para frutificação e conseguinte avaliação de uma característica de interesse introduzida. Um protocolo ideal para a transformação de citros seria baseado na utilização de tecido adulto como fonte de explantes, que reduziria o longo período de juvenilidade, e abreviria o tempo para a análise da característica transgênica incorporada. O objetivo inicial do presente trabalho foi o estabelecimento de um sistema de regeneração in vitro a partir de segmentos internodais de plantas adultas de três variedades de laranja doce (Citrus sinensis L. Osb.) e limão Cravo (Citrus limonia Osb.), visando à otimização da metodologia de transformação. Para a indução de organogênese, investigamos diferentes meios de cultura associados a reguladores de crescimentos (BAP e ANA) e antibióticos β- lactâmicos (timentim, cefotaxima, meropenen e augmentina), utilizados na supressão do crescimento bacteriano e na resposta morfogênica de tecidos adultos de C. sinensis e C. limonia. Demonstrou-se que a indução in vitro de brotações em tecidos adultos de citros foi afetada pelo genótipo, reguladores de crescimento, formulação do meio e a pela incorporação de antibióticos no meio de cultura. Além disso, foram adequados protocolo otimizados para a transformação genética de segmentos de epicótilo e cotilédones imaturos via Agrobcaterium tumefaciens. Para a otimização do protocolo envolvendo explantes provenientes de segmentos de epicótilo, alguns fatores foram investigados, como; o uso de sonicação, infiltração a vácuo e sonicação associada com infiltração a vácuo, comparando-se ao método tradicional de transformação envolvendo Agrobacterium (co- cultivo ou imersão na solução bacteriana) durante o co- cultivo de explantes de laranja doce Pineapple, e citrumelo Swuingle. A utilização de sonicação por 2 segundos, seguidos por 10 minutos de infiltração a vácuo, teve efeito positivo na eficiência de transformação (8.4%) para laranja Pineapple. Para citrumelo Swuingle a eficiência de transformação também foi aumentada com a combinação de sonicação e infiltração a vácuo (9,6%), mas não foi suficiente para obter uma percentagem maior que a utilização somente da metodologia tradicional de co-cultivo, com eficiência de transformação de 11,2%. Finalmente, estudou- se fatores que pudessem influenciar o processo de indução da morfogênese e a eficiência de transformação em cotilédones imaturos de grapefruit Duncan. Para a indução da organogênese a combinação de 2 mg l-1 BAP, 1 mg l-1 KIN and 1 mg l-1 AIA promoveu a maior freqüência de cotilédones produzindo brotações (96%) e número de brotações por explante (5,8), utilizando explantes cultivados dorsalmente em contato com o meio de cultura por 3 semanas no escuro, seguido por mais 3 semanas em regime de 16/8 horas (luz/ escuro). Os parâmetros… Advisors/Committee Members: Márcio Gilberto Cardoso Costa, José Maria Moreira Dias, Fernando Luiz Finger, Edgard Augusto de Toledo Picoli, Sérgio Yoshimitsu Motoike, Wagner Campos Otoni.

▼ A classificação do gênero Hortia dentro da família Rutaceae é duvidosa. Hortia, que já foi posicionada em Cusparieae por De Candolle em 1824, na mais recente classificação morfológica de Engler em 1931 pertence a Toddalieae. Mais recentemente da Silva e colaboradores voltam a propor Hortia em Cusparieae. Contudo, o estudo fitoquímico das espécies do gênero Hortia ainda não permitem classificá-la corretamente dentro da família. Desta forma, o estudo fitoquímico de Hortia descrito neste trabalho, visa contribuir com a quimiossistemática da família Rutaceae e também com a melhor classificação do gênero dentro da mesma. O estudo das espécies H. oreadica, H. brasiliana e H. superba levou ao isolamento e identificação de 11 substâncias, sendo os alcalóides N-metil-4-metoxi-2-quinolona (01), integriquinolona (02), inédita no gênero Hortia e a rutaecarpina (03), as cumarinas escoparona (04), xantotoxina (05), sendo estas descritas pela primeira vez na espécie H. superba, isopimpenilina (06), inédita no gênero Hortia, 5-cloro-8-metoxi-furanocumarina (07), inédita na literatura, prangol (08) e heraclenol (09), e os flavonóides isosakuranetina (10) e neoponcirina (11), sendo este último inédito no gênero Hortia. A presença de metabólitos como alcalóides, cumarinas e flavonóides vêm a confirmar que Hortia pertence à família Rutaceae, embora não esteja claro seu exato posicionamento dentro da mesma. Alguns dos compostos isolados foram avaliados frente à inibição do desenvolvimento de Guignardia citricarpa, seguindo duas metodologias de ensaios de inibição, uma baseada no ensaio de inibição de G. citricarpa in vitro frente ao crescimento micelial, pelo método de incorporação ao meio de cultura e a outra, baseada no ensaio de inibição de G. citricarpa in vitro frente à germinação de esporos e formação de apressórios, pelo método de germinação de esporos em placa de poliestireno. Foram submetidas à ambos os ensaios de inibição as substâncias: N-metil-4-metoxi-2-quinolona, escoparona, prangol e isosakuranetina, as quais foram avaliadas quanto sua atividade antifúngica, porém a primeira metodologia avaliou a inibição apenas da formação de micélios, e estes não estão envolvidos diretamente com o processo de infecção das plantas, já a segunda metodologia avaliou a inibição de estruturas reprodutivas do microrganismo (os esporos), responsável pelo processo de infecção. Foram calculadas as médias de crescimento micelial para todas as substâncias testadas, revelando o alcalóide Nmetil- 4-metoxi-2-quinolona (100 μg.mL-1) como o mais eficaz dentre todas as substâncias ensaiadas. Quanto a inibição frente à germinação de esporos e formação de apressórios, os resultados foram bastante satisfatórios, a cumarina escoparona (100 μg.mL-1) apresentou inibição de 96% para a germinação de esporos e 99% para a formação de apressórios, o alcalóide N-metil-4-metoxi-2- quinolona (100 μg.mL-1) com 83% e 91%, e o flavonóide isosakuranetina (100 μg.mL-1) com 71,4% e 80%, respectivamente. Portanto, a partir deste trabalho verificou-se que… Advisors/Committee Members: Maria Fátima das Graças Fernandes da Silva.

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ESTUDO QUÍMICO EM PATÓGENOS E VETORES DE DOENÇAS DE CITROS: Xylella fastidiosa e Diaphorina citri. Historicamente, a citricultura nacional sofreu profundas mudanças devido a problemas fitossanitários, e hoje, dentre as principais ameaças à citricultura, destacam-se o Huanglongbing (HLB) ou Greening e a Clorose Variegada dos Citros (CVC). A bactéria X. fastidiosa é o agente etiológico causador da clorose variegada dos citros (CVC). O HLB está associado a bactérias do gênero Candidatus Liberibacter e sua disseminação se dá por enxertia de material infectado ou por psilídeos. Neste sentido a presente tese descreve o estudo químico da bactéria Xylella fastidiosa e resposta olfatométrica de Diaphorina citri frente a espécies de Citrus. A X. fastidiosa (9a5c) foi cultivada em meio PW. No estudo químico da bactéria X. fastidiosa foram utilizados as técnicas de identificação CG-EM, LC-MS e LC-SPE-NMR. Estas técnicas permitiram a identificação de derivados de ácidos graxos e alcalóides dicetopiperazínicos. Este é o primeiro estudo químico em X. fastidiosa o qual foi abordado a produção dos alcalóides, ciclo (Pro-Val), ciclo (Val-Phe), ciclo (Tyr-Tyr), ciclo (Phe-Tyr), ciclo (Pro-Phe), ciclo (Leu-Leu), ciclo (Leu-Ile), ciclo (Val- Leu), ciclo (Ala-Leu), ciclo (Ala-Pro) ciclo (Pro-Leu), ciclo (Pro-Tyr), ciclo (Tyr-Pro), ciclo (Tyr-Val), ciclo (Pro-Ile), ciclo (Phe-Ile), ciclo (Arg-Val), ciclo (Leu-phe), ciclo (Gly-Phe). Através de SPME dos voláteis produzidos pela bactéria X. fastidiosa foram identificadas metil cetonas e álcoois. O estudo comportamental com o psilídeo D. citri frente aos óleos essenciais de espécies de citrus, utilizando ensaios olfatomêtricos, mostrou os maiores índices de atratividade para as espécies Citrus reticulata Blanco, Citrus paradisi Macfad., Citrus medica L. e o padrão Murraya paniculata. Contudo, foi observada uma menor atratividade de D. citri frente aos híbridos tangor Murcott, citrumelo Swingle e citrange Trover, que apresentaram um percentual elevado de compostos sesquiterpênicos em sua composição. Como subsídios complementares à compreensão das interações D. citri-hospedeiros também foi realizada análise de componentes principais (PCA) e a análise por agrupamentos hierárquicos (HCA), os quais demonstraram um agrupamento entre os híbridos tangor Murcott e citrumelo Swingle, indicando semelhança química.

CHEMICAL STUDY OF PATHOGENS AND VECTORS DISEASE OF CITRUS: Xylella fastidiosa &Diaphorina citri. Historically the national citriculture suffered great changes because of phytosanitary problems, and nowadays among the main threats to citruculture are the Huanglongbing (HLB) or Greening and the Citrus Variegated Chlorosis (CVC). The bacteria Xylella fastidiosa is the etiologic agent of Citrus Variegated Chlorosis. The HBL is associated to a bacterium that belongs to the Candidatus Liberibacter genera and its dissemination is by grafting of infected material or by psyllids. This work describes the chemical study of bacteria Xylella fastidiosa and the olfatometric response of Diaphorina citri to…

Advisors/Committee Members: Maria Fátima das Graças Fernandes da Silva.

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O setor citrícola enfrenta sérios problemas representados por doenças que, além de diminuírem a produtividade, depreciam os frutos pelo aspecto que conferem aos mesmos. Dentre tais doenças encontra-se a mancha preta dos citros, causada por Guignardia citricarpa. A medida predominante de controle desta doença corresponde às aplicações com produtos químicos. Considerando-se os custos financeiros, ambientais e de saúde pública destas aplicações, as crescentes restrições à presença de resíduos em frutas frescas e, a possibilidade de seleção de linhagens resistentes dos patógenos aos fungicidas, faz-se necessário o estudo de novas alternativas de controle. Portanto, este trabalho teve por objetivo estudar a utilização de diferentes agentes de biocontrole, sob condições de campo, através de aplicações de Bacillus subtilis, Trichoderma spp., uréia e combinação dos produtos comerciais Soil-Set + Compostaid sobre as folhas de citros caídas ao solo, visando reduzir a produção de ascósporos direta e, indiretamente, pela aceleração da decomposição das mesmas. Os resultados encontrados neste trabalho mostraram a viabilidade de tais aplicações, como medida auxiliar no manejo de controle da mancha preta dos citros

The citrus industry faces serious problems represented by diseases that reduce the productivity and depreciate the fruits that give the appearance thereof. Among these diseases the citrus black spot caused by Guignardia citricarpa is one of the most important. As the predominant control of this disease is related to the chemical application, the financial costs, environmental and public health of these applications, as well as the increasing restrictions on the presence of residues in fresh fruits, and the possibility of emergence of resistant strains of pathogens to fungicides, it is necessary to study new control alternatives. Therefore, this work aimed to investigate the use of biocontrol agents, under field conditions, by applications of Bacillus subtilis, Trichoderma spp., uréia e combinação dos produtos comerciais Soil-Set + Compostaid on the citrus leaves that fallen to the ground, in order to reduce the production of ascospores directly and, indirectly, by acceleration of the decomposition of citrus leaves. The results of this work showed the viability of such applications as a help during the disease management to control of citrus black spot.

Advisors/Committee Members: Katia Cristina Kupper.

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Brazil is the largest producer of sweet orange, but the productivity is not the highest due to disease problems. A major problem is the Citrus Variegated Chlorosis (CVC) caused by the bacterium Xylella fastidiosa, which promotes obstruction of the xylem, causing physiological disorders in plant and in advanced cases, affecting fruits, leading to production losses. In this study, hybrids obtained from controlled crosses between Murcott tangor [Citrus reticulata Blanco x Citrus sinensis (L.) Osbeck] and Pera sweet orange [Citrus sinensis (L.) Osbeck] were evaluated by analysis of symptoms, diagnosis through conventional and real time PCR (Polymerase Chain Reaction) , showing seven resistant hybrids, twenty-four tolerant hybrids and six susceptible hybrids. The expressions of thirteen genes [NBS-LRR - RGH1, Abscisic Acid (ABA), Thaumatin, Chitinase, Xa21 Kinase, Kinase CHRK1, Isoflavone Synthase, Protein Defense-Related Resistance - DRRP, No Product Set - SPD, Isoflavone Reductase, HCr2-0A, Ankyrin, Glutathione GST-22 associated with resistance were evaluated, and it was possible to relate the resistance to X. fastidiosa with gene expression. QTL (Quantitative Trait Loci) were mapped through the quantification of symptoms and bacterial concentration and expression QTL (eQTL) of genes were carried out with the evaluation of thirty-seven hybrids.

O Brasil é o maior produtor mundial de laranja, mas não apresenta maior produtividade devido a problemas fitossanitários. Um dos principais problemas é a Clorose Variegada dos Citros (CVC) causada pela bactéria Xylella fastidiosa, que promove a obstrução do xilema, causando desordens fisiológicas na planta e em casos avançados, afetando os frutos. A CVC acomete as variedades de Citrus sinensis (L.) Osbeck, conhecidas como laranjas-doce, sobre diferentes porta-enxertos, todavia não são encontrados sintomas em tangerinas e híbridos comerciais. Neste estudo, os híbridos obtidos a partir de cruzamentos controlados entre tangor Murcott [Citrus reticulata Blanco x Citrus sinensis (L.) Osbeck] com laranja Pera [Citrus sinensis (L.) Osbeck] foram avaliados através da análise dos sintomas, o diagnóstico por meio de PCR (Polymerase Chain Reaction) convencional e em tempo real, mostrando sete híbridos resistentes, vinte e quatro híbridos tolerantes e seis híbridos suscetíveis. As análises de expressões dos genes (NBS-LRR RGH1, Ácido Abscísico, Taumatina, Quitinase, Quinase Xa21, Quinase CHRK1, Isoflavone Sintase, Proteína de Defesa Relacionada com Resistência - PDRR, Sem Produto Definido - SPD, Isoflavona Redutase, HCr2- 0A, Anquirina e GST22) possibilitaram entender a relação entre a resistência a X. fastidiosa e a expressão gênica. Foram mapeados QTLs (Quantitative Trait Loci) através da quantificação de sintomas, concentração de bactérias. Baseados em um conjunto de resultados, foram detectados eQTLS (QTLs de expressão) de genes avaliados em trinta e sete híbridos.

Advisors/Committee Members: Ane Hackbart de Medeiros.

▼ Clorose Variegada dos Citros (CVC), causada pela bactéria Xylella fastidiosa Wells et al., tem causado grandes perdas na citricultura do estado de São Paulo, afetando cerca de 40% das plantas de laranja doce. A bactéria é transmitida por 12 espécies de cigarrinhas sugadoras de xilema (Hemiptera: Cicadellidae) da subfamília Cicadellinae. O manejo da CVC é baseado no plantio de mudas sadias, poda ou eliminação de árvores infectadas no campo, assim como o controle químico dos vetores. No entanto, as cigarrinhas vetoras possuem hábitats e hospedeiros alternativos que servem como refúgio, particularmente na vegetação adjacente aos pomares cítricos. Esta característica ecológica explica a rápida reinfestação dos pomares de laranja pelas cigarrinhas após a aplicação de inseticidas. O uso de plantas hospedeiras atrativas às cigarrinhas em uma estratégia de plantio-isca poderia reduzir a imigração de vetores da vegetação adjacente. O objetivo deste trabalho foi selecionar plantas hospedeiras adequadas para serem usadas neste tipo de estratégia, assim como testar a eficácia do plantio-isca em reduzir a população de cigarrinhas em um pomar de laranja. Experimentos de livre escolha foram conduzidos sob condições de casa-de-vegetação para avaliar a preferência de dois importantes vetores, Bucephalogonia xanthophis (Berg.) e Oncometopia facialis (Signoret) por plantas hospedeiras alternativas em relação à Citrus sinensis (L.) Osbeck (laranja doce). As espécies vegetais preferidas por B. xanthophis foram Baccharis dracunculifolia DC., Duranta repens L., Eupatorium maximiliani Shrad., E. laevigatum Lam. e Vernonia condensata Baker, enquanto que O. facialis apresentou preferência por D. repens e Lantana camara L. Um segundo estudo em casa-de-vegetação foi conduzido para avaliar o efeito da fertilização com níveis variados de nitrogênio sobre a preferência de B. xanthophis por uma das plantas hospedeiras selecionadas, V. condensata. Maiores porcentagens de adultos de B. xanthophis selecionaram plantas que haviam sido tratadas com doses mais elevadas de nitrogênio, até um limiar máximo. Em condições de campo (Fazenda Oxford, Gavião Peixoto, SP), 14 espécies de hospedeiros alternativos de cigarrinhas, incluindo plantas preferidas nos testes de livre escolha, foram avaliadas com respeito ao desenvolvimento vegetativo e incidência natural de cigarrinhas. Essas espécies foram plantadas em cinco linhas de 50 m (com espaçamento de 1 m entre linhas e 1 m entre plantas) entre um pomar de laranja doce e uma área de brejo (fonte de vetores) de maneira a formar um plantio-isca. Para avaliar o efeito do plantio-isca na migração de cigarrinhas de cigarrinhas da área de brejo, a população de vetores foi monitorada por armadilhas adesivas amarelas no interior de dois subtalhões no mesmo pomar de laranja, um separado do brejo pelo plantio-isca e outro sem esta barreira. Este monitoramento foi conduzido por vários meses antes e depois que o plantio-isca foi tratado com inseticidas sistêmicos. A população de vetores foi significantemente reduzida no… Advisors/Committee Members: Lopes, Joao Roberto Spotti.

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Cerca de 38% das árvores cítricas do Estado de São Paulo são afetadas pela Clorose Variegada dos Citros - CVC, causando perdas anuais de cerca de 100 milhões de dólares para as indústrias citrícolas. O agente causal da CVC é uma bactéria gram-negativa, fastidiosa e habitante dos vasos de xilema denominada Xylella fastidiosa, transmitida por cigarrinhas pertencentes à família Cicadellidae, subfamília Cicadellinae. Já foi observado que laranjas doces jovens, na faixa de 3 a 4 anos de idade, são mais sensíveis à CVC do que as plantas adultas. A doença é mais severa em regiões onde estresses adicionais ocorrem, como alta demanda atmosférica por água (decorrente do aumento da temperatura e do déficit de pressão de vapor) e déficit hídrico no solo. Os mecanismos fisiológicos e químicos que caracterizam o estabelecimento da CVC ainda não foram totalmente compreendidos, especialmente sob condições de estresse. Sendo assim, estudos que consideram a interação entre época do ano, regime hídrico e o estabelecimento da CVC em plantas jovens são necessários para auxiliar na elaboração de programas de manejo da doença. O presente trabalho avaliou a sobrevivência de infecções iniciais de X. fastidiosa em plantas cítricas jovens no campo, mantidas com e sem irrigação, 6, 12 e 18 meses após inoculações mecânicas realizadas no verão (mês de janeiro) e inverno (mês de julho). Visando analisar a influência do regime hídrico isoladamente foram realizadas, na época do outono (final de maio e início de junho), inoculações mecânicas e inoculações com as cigarrinhas vetoras Bucephalogonia xanthophis e Dilobopterus costalimai em plantas cítricas jovens mantidas em capacidade de campo e déficit hídrico em casa-de-vegetação; as plantas inoculadas mecanicamente foram avaliadas 5 meses após a data de inoculação, enquanto que as plantas inoculadas com insetos foram avaliadas 10 meses após a data de inoculação. Em condições naturais, foram observadas, 6 meses da data de inoculação, maiores taxas de sobrevivência de infecções iniciais de X. fastidiosa em plantas jovens inoculadas na época de inverno na ausência de estresse hídrico; no entanto, 12 meses da data de inoculação, as plantas inoculadas mantidas com e sem irrigação apresentavam médias populacionais bacterianas estatisticamente iguais. As plantas mantidas em casa-devegetação e inoculadas mecanicamente apresentaram resultados semelhantes àqueles obtidos 6 meses da data de inoculação em condições naturais; no caso da inoculação com cigarrinhas vetoras, foi detectada a presença da bactéria apenas em plantas em capacidade de campo. Estes resultados indicam que o déficit hídrico é um fator desfavorável para o estabelecimento de infecções primárias de X. fastidiosa em plantas cítricas jovens. Os resultados obtidos 12 meses após a inoculação mecânica em condições naturais, logo após a estação de chuva, indicam que, uma vez retirado o estresse hídrico, tal influência negativa deixa de existir e a bactéria readquire sua capacidade de infecção e colonização do hospedeiro.

In Brazil, about 38% of…

Advisors/Committee Members: Bergamin Filho, Armando.

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Atualmente o diagnóstico da morte súbita dos citros (MSC) é realizado através de inspeção visual e coleta do material do porta-enxerto o que confere ao método elevado grau de subjetividade e imprecisão, além de demandar muito tempo para o levantamento de dados de infestação. Este trabalho pretende estudar as mudanças nas propriedades físicas e químicas acarretadas pela MSC em folhas e porta-enxertos de laranjeira doces (Citrus (L.) Osbeck), e desenvolver uma nova metodologia de diagnóstico da doença. Para tanto, folhas, porta-enxertos e seus extratos foram analisados através das seguintes técnicas espectroscópicas: absorção de luz uv-visível, absorção de infravermelho com transformada de Fourier, fluorescência e fluorescência induzida por laser. Além do estudo utilizando técnicas espectroscópicas foram realizados estudos utilizando técnicas de imagem de fluorescência de folhas saudáveis e doentes. Foram coletadas amostras de folhas saudáveis, doentes com a MSC e doentes com o declínio dos citros (DC). A comparação entre estas doenças é primordial visto que no campo os sintomas são muito parecidos, confundindo muito o sistema de avaliação de contaminação. Foram observadas mudanças significativas nos espectros de emissão de fluorescência para os três tipos de amostras e baseados nestas diferenças foi definido um índice capaz de diagnosticar a MSC e o DC. A técnica de imagens de fluorescência também trouxe informações importantes permitindo diferenciar plantas saudáveis e doentes de uma forma muito rápida. A junção da técnica de imagens com as espectroscópicas deu origem a uma nova metodologia de diagnóstico da MSC com potencial de ser muito mais rápida, precisa e não invasiva permitindo análises da folha in natura.

Currently, the diagnosis of citrus sudden death (CSD) is carried out by visual inspection and collection of the rootstock, which causes the method to be inaccurate and allows for much subjectivity, besides demanding much time to examine the infestation data. The present work intends to study changes in the physical and chemical properties resulting in CSD of leaves and rootstock material of sweet orange trees (Citrus (L.) Osbeck), as well as developing a new diagnosis methodology of the disease. Thus, leaves, rootstock and their extracts were analyzed by means of the following spectroscopic techniques: absorption of uv-visible light, absorption of infrared with Fourier transform, fluorescence and laser-induced fluorescence. Besides employing spectroscopic techniques, studies using fluorescence images of healthy and sick leaves were carried out. Samples of healthy leaves, sick leaves with CSD and sick leaves with citrus decline (CD) were collected. Comparison of these diseases is primordial since in the field the symptoms are similar, causing much confusion in the evaluation system of contamination. Significant changes were observed in the spectra of fluorescence emissions for the three types of samples and based on such differences an index capable of diagnosing CSD and CD was defined. The fluorescence…

Advisors/Committee Members: Milori, Debora Marcondes Bastos Pereira.

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Este trabalho apresenta um mapeamento sobre a evolução da exploração das tradicionais atividades agrícolas no estado de São Paulo, representadas pela cana-de-açúcar, café e citros, a partir das variáveis produção, área, produtividade e número de empregos formais nestas atividades entre 1997 e 2006. Assim, a questão principal foi identificar o padrão da evolução destas variáveis nos municípios. Através de dados secundários, obtidos de órgãos governamentais foram gerados grupos de municípios por meio da análise de cluster, de acordo com as similaridades na produção, área, produtividade e emprego formal. Como subsídio a este trabalho foi discutido o cenário sobre a situação do Agronegócio brasileiro, com destaque o cenário paulista, envolvendo a cana-de-açúcar, café e citros. Os resultados obtidos permitiram identificar grupos de municípios com os maiores crescimentos em determinadas variáveis, sobretudo a grande expansão da produção de cana-de-açúcar, alavancada pelo aumento da área e produtividade, o aumento da produção de café, via elevação de produtividade e o grande aumento do emprego formal na citricultura.

This work show a mapping about the evolution of the exploration of traditional activities in Sao Paulo state, represented by sugar-cane, coffee and citrus fruits, using the variables production, area, productivity and the number of formal employees in these activities between 1997 and 2006. So, the main issue was to identify the pattern of evolution of these variables in the municipalities. Through secondary data, obtained from government institutions groups of counties were generated through the analysis of clusters according to similarities in production, area, productivity and the number of employees. Subsidiary was debated the scenery of the situation of Brazilian Agribusiness, with focus in the State of Sao Paulo and mainly involving sugar cane, coffee and citrus fruit. The results have identified groups of counties with the largest increases in certain variables, especially the great expansion of production of sugar cane, leveraged by the increase in area and productivity, increase the production of coffee, by increased productivity and large increase in formal employment in citrus cultivation.

Advisors/Committee Members: Camargo Júnior, Alceu Salles.

▼ A interação bactéria-planta é um processo complexo que envolve diversos fatores bióticos e abióticos, podendo resultar em interações neutras, benéficas ou patogênicas. O gênero Methylobacterium tem sido descrito como endófito em diferentes plantas hospedeiras, podendo beneficiá-las por meio da promoção de crescimento vegetal e do controle de fitopatógenos. Em citros, este endófito coloniza o mesmo nicho que patógenos, e, assim, muitas espécies desse gênero são interessantes candidatas ao controle simbiótico contra Xylella fastidiosa. É conhecido que o processo de interação Methylobacterium-bactéria é coordenado por genes cuja expressão é regulada pelo sistema Quorum Sensing (QS), o qual utiliza N-acil-homoserina lactonas (AHLs) como moléculas sinalizadoras, importantes, entre outras coisas, para a formação de biofilme, encontrado em muitas plantas como estratégia de colonização bacteriana. No entanto, os mecanismos envolvidos na interação Methylobacterium-planta são ainda pouco compreendidos. Dessa forma, o presente trabalho buscou estudar, de diferentes maneiras, a interação entre Methylobacterium spp. e citros, avaliando os efeitos dessas bactérias sobre o crescimento de plântulas e a variação da expressão gênica. Neste contexto, foi verificado que a especificidade da interação bactéria-planta e a escolha do método de inoculação das bactérias são importantes para a geração de resultados benéficos sobre a germinação de sementes e o desenvolvimento da planta hospedeira. Possivelmente, a produção de AIA e a fixação biológica de nitrogênio foram os mecanismos envolvidos na promoção de crescimento de citros por Methylobacterium spp. neste estudo. Com relação à origem, essas bactérias parecem ser transmitidas horizontalmente em plantas cítricas. Visando empregar Methylobacterium spp. no controle de fitopatógenos em citros, M. extorquens AR1.6/2 foi geneticamente modificada para expressar uma endoglicanase A (EglA). Por meio de microscopia eletrônica de varredura, foi verificado que a bactéria modificada colonizou a superfície e o interior de Catharanthus roseus, planta modelo para experimentos com bactérias endofíticas e X. fastidiosa. Além disso, quando inoculada junto com X. fastidiosa, essas bactérias compartilharam o xilema das plântulas, sugerindo que durante a colonização e estabelecimento no hospedeiro estas bactérias poderiam interagir. Estudando a ação de uma AHL sobre a expressão de genes envolvidos na interação entre M. mesophilicum SR1.6/6-planta, foi observado que a presença dessa molécula foi importante na ativação da expressão dos genes mxaF, relacionado ao estabelecimento e metabolismo metilotrófico da bactéria; pat, relacionado a vantagens adaptativas e competitivas durante a colonização da planta; e acdS, envolvido com o metabolismo bacteriano e modulação de níveis hormonais na planta. A expressão dos genes crtI e sss, envolvidos com respostas a estresse e transporte de compostos, respectivamente, e do gene phoU, relacionado com patogenicidade, não foram alterados na presença da AHL nas condições… Advisors/Committee Members: Araujo, Welington Luiz de.