▼ 

Leveduras do gênero Candida podem colonizar canais radiculares portadores de periodontite apical primária. A capacidade de aderir às estruturas dentárias, tigmotropismo, secreção de proteinases, formação de biofilme e o pleomorfismo conferem a esses microrganismos habilidades para se estabelecerem no espaço pulpar, podendo penetrá-lo, sobretudo, através de túbulos dentinários. O presente trabalho teve como objetivo principal avaliar parâmetros relacionados à virulência de amostras leveduriformes obtidas do dorso lingual e canais radiculares necróticos portadores de periodontite apical primária. O método de detecção de proteinase em placa foi utilizado para indicar atividade enzimática. Independente do sítio primário de isolamento, todas as leveduras da espécie C. albicans avaliadas foram capazes de degradar a albumina contida no meio de cultura, indicando atividade proteásica positiva. No entanto, entre as amostras obtidas dos canais radiculares, foram revelados os maiores halos de precipitação ao redor das colônias. A expressão de genes codificadores das proteinases Sap-1, Sap-2 e Sap-4 foi identificada pelo método de RT-PCR. O gene codificador de Sap-2 foi preferencialmente expresso por leveduras do dorso lingual enquanto para aquelas dos canais radiculares, destacou-se a expressão do gene codificador de Sap-4. Os resultados obtidos sugerem que a expressão concomitante de Sap-2 e Sap-4 seja necessária à permanência das leveduras no ambiente endodôntico. A microscopia de fluorescência foi utilizada para avaliar a adesão microbiana ao acrílico e à dentina. As maiores médias de adesão foram verificadas no substrato dentina, todavia, a capacidade de adesão à dentina e ao acrílico não apresentou correlação com a hidrofobicidade dos microrganismos. A formação de biofilme foi mensurada em função da intensidade de reação com o XTT. Fatores como pH, disponibilidade de carboidratos, saliva e presença de outros grupos microbianos parecem influenciar a formação de biofilme na dentina uma vez que neste substrato foram verificadas as menores intensidades de reação. Foi observado que a direção de colonização dos túbulos dentinários por leveduras da espécie C. albicans não é influenciada pela topografia do substrato. Entretanto, o pleomorfismo revelou-se importante uma vez que leveduras da espécie C. glabrata não foram capazes de colonizar camadas internas da dentina.

Yeasts from the genus Candida can be commensal members of the oral microbiota, and can also colonize the endodontic environment. These microorganisms can penetrate the pulp space through dentinal tubules. The ability to adhere to dentinal structures, thigmotropic responses, secretion of proteases, formation of biofilm and pleomorphism is related to this penetration capacity. This study aimed to evaluate this virulence parameters of yeast samples from the tongue dorsum and necrotic root canals. The method for detecting protease in plate was used to indicate enzyme activity. Regardless of the primary isolation site, C. albicans samples were able to degrade the…

Advisors/Committee Members: Ary Correa Junior, Carlos Augusto Rosa, Ary Correa Junior, Daniel de Assis Santos, Maria Auxiliadora R de Carvalho, Milton de Uzeda, Celuta Sales Alviano.

▼ 

Ultimamente muitos países, assim como o Brasil, assistem a um aumento significativo das infecções fúgicas nosocomiais invasivas. Devido a avanços tecnológicos na medicina nas duas últimas décadas como o uso do cateter, sondas, novas técnicas cirúrgicas e outros, aumentaram de forma expressiva a qualidade de vida de pacientes críticos. Em contrapartida, infecções fúngicas invasivas surgiram como complicação nestes pacientes. Dentre os diversos agentes etiológicos encontrados no ambiente hospitalar o gênero Candida é o patógeno mais isolado e está associado a altas taxas de morbidade e mortalidade. O presente trabalho recuperou 100 cepas já isoladas de diferentes estabelecimentos de saúde do Rio de Janeiro no período de 2013 a 2014, essas amostras foram submetidas a provas cromógenas, tubo germinativo, produção do clamidósporos, espectrometria de massas e Provas de Sensibilidade a antifúngicos. Essas cepas foram encontradas em vários sítios anatômicos, onde 44% desses isolados foram obtidos por urinocultura, e o setor com maior incidência foi Centro de Tratamento Intensivo (CTI) com 40% das amostras isoladas. A região de Niterói foi o município com maior percentual de isolados fúngicos (52%). Foramidentificadas as seguintes espécies: Candida tropicalis, C. albicans, C. parapsilosis sensu stricto, C. guilliermondii, C. glabrata,C. krusei, C. metapsilosis e C. dubliniensis. Espéciesnão-albicans apresentaram se mais resistente aos antifúngicos usados neste trabalho e a anfotericina B mostrou ser o antifúngico mais eficaz nesta pesquisa principalmente em relação às cepas de C. albicans.A Candida tropicalisfoi a espécie mais isolada neste trabalho superando a Candida albicans na maioria dos setores e nos sítios anatômicos. Sendo assim, a identificação dessas cepas fúngicas é fundamental para localizar a fonte da infecção e acompanhar o tratamento clínico tornando-o mais assertivo e assim evitando uma estada mais longa dos pacientes no ambiente hospitalar e diminuindo gastos mais expressivos com esse tipo de infecção.

Lately very countries, like Brazil, attends a significant increase in nosocomial invasive fungal infections. Due to technological advances in medicine in the last two decades as the use of catheters, probes, and other new surgical techniques, increased significantly the quality of life of critically ill patients. Conversely invasive fungal infections have emerged as a complication in these patients. Among the various microorganisms found in the hospital environment the genus Candida is the most isolated pathogen and is associated with high morbidity and mortality. This work has already recovered 100 strains isolated from different health facilities in Rio de Janeiro in the period 2013 to 2014, the samples have been submitted chromogenic tests, germ tube, production of chlamydospores and mass spectrometry. These strains were found in various anatomical sites, where 44% of these isolates were obtained from urine culture, and the sector with the highest incidence was the intensive care unit (ICU) with 40% of…

Advisors/Committee Members: Paulo Murillo Neufeld, José Firmino Nogueira Neto, Ana Cristina Rivas da Silva.

▼ As enzimas proteolíticas são de grande valor comercial, sendo amplamente utilizadas nas indústrias, representando 59% de todas as enzimas comercializadas no mundo. Elas têm uma grande variedade de aplicações industriais, sendo utilizado na fabricação de alimentos, bebidas, papel, detergentes, nos produtos farmacêuticos e no processamento de couros, além de ter um importante papel em pesquisas básicas. Para as várias aplicações industriais, tem-se utilizado proteinases de microrganismos. Neste trabalho foi estudada a produção, purificação e caracterização da proteinase extracelular PI da levedura Candida krusei AP176 isolada de frutos do amapá (Parahancornia amapa) uma árvore da floresta amazônica. C. krusei AP176 produziu quatro proteinases extracelulares em meio líquido YCB (Yeast Carbon Base) suplementado com caseína 0,01%. As proteinases foram denominadas de PI, PII, PIII e PIV. A proteinase PI foi selecionada para este estudo, a qual foi purificada do sobrenadante do meio de cultivo em dois passos, utilizando-se de cromatografia em coluna de gel filtração e coluna de troca iônica. A enzima apresentou massa molecular de aproximadamente 36 KDa, estimada em eletroforese de gel de poliacrilamida na presença de SDS (SDS-PAGE). A proteinase PI apresentou atividade proteolítica na faixa de temperatura e pH que variaram de 10 a 50 e 2,0 a 9,0 respectivamente. A enzima apresentou boa estabilidade térmica mantendo 98,5% de atividade entre 15 e 30 °C, quando mantida por 2 horas, antes da determinação da atividade enzimática. Aproximadamente 98,6% da sua atividade foi mantida quando incubada em pH 4,0 (tampão citrato de sódio 50 mM) por um período de 12 horas em temperatura ambiente (24 °C 2 °C). O valor ótimo de pH e temperatura de atividade proteolítica da proteinase produzida por C. krusei AP176 foi de 4,0 e 25 °C, respectivamente. Os maiores valores de atividade foram em valores de pH ácido (pH 3,0 a 5,0) em uma faixa de temperatura de 20 a 30 °C. As propriedades físico-químicas apresentadas pela proteinase PI podem, favorecer possíveis aplicações desta enzima nos diversos processos biotecnológicos para os quais as enzimas proteolíticas são utilizadas. Advisors/Committee Members: Valter Roberto Linardi, Valter Roberto Linardi, Jacques Robert Nicoli, Marcelo Matos Santoro, Vera Lucia dos Santos, Rachel Passos Rezende.

▼ 

Tese de mestrado. Biologia (Microbiologia Aplicada). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2010

As infecções fúngicas invasivas provocadas por Candida spp. constituem uma importante causa de morbilidade e mortalidade em doentes críticos. Apesar de actualmente estarem disponíveis novos fármacos, como as equinocandinas e os azoles de espectro alargado, que aumentaram as opções terapeuticas, a resistência em ambos os grupos tem sido reportada. A associação de antifúngicos com diferentes mecanismos de acção tem sido utilizada como terapêutica de salvamento, mesmo sem a existência de suporte científico. Os estudos para avaliação destas associações sao escassos, as metodologias propostas sao trabalhosas e morosas e os resultados sao por vezes contraditorios. Neste trabalho, e proposto um protocolo citometrico para avaliar o efeito das associações equinocandinas/anfotericina B e equinocandinas/azoles, sobre espécies de Candida. A susceptibilidade aos antifúngicos, isolados e em associação, foi determinada com recurso a dois marcadores fluorescentes: DiBAC4(3) (anidulafungina/anfotericina B) e FUN-1 (anidulafungina/fluconazole). A soma das razões entre a intensidade de fluorescência das células tratadas com os antifúngicos em associação e a intensidade de fluorescência das células tratadas com o antifúngico isolado, resultou num Índice de fluorescência (IF). Pela correlação com o método clássico foi possível classificar a associação como: antagonista quando IF <1, indiferente quando 1≤ IF ≤2, aditiva quando 2< IF <4 e sinérgica quando IF ≥4. Esta metodologia mostrou uma correlação estatisticamente significativa com os métodos clássicos: checkerboard e determinação de unidades formadoras de colónias. Adicionalmente, revelou ser uma técnica simples e rápida, de elevada sensibilidade e especificidade para detecção de efeitos sinérgicos e antagonistas, mostrando-se uma excelente alternativa no estudo de associações entre antifúngicos. Os casos de antagonismo foram raros, mas o facto de poderem ocorrer independentemente da espécie levam a recomendação da sua avaliação in vitro, previamente a sua prescrição clínica. Assim, encontra-se disponível um novo método para avaliação das associações entre antifúngicos, representando um avanço significativo relativamente às metodologias existentes.

Invasive fungal infections caused by Candida spp. represent an important cause of morbidity and mortality in critically ill patients. Although at present novel drugs, such as echinocandins and extended-spectrum azoles, have widened the range of available therapeutic options, resistance to both these groups has been reported. The combination of drugs with different mechanisms of action emerged as a salvage therapy, even though the lack of scientific support. Studies validating such combinations are scarce, and the methods of assessment are laborious, time-consuming, and often provide contradictory results. In the present study a flow cytometric protocol is proposed to evaluate the effect of the combination of…

Advisors/Committee Members: Vaz, Cidália Irene Azevedo Pina, Tenreiro, Ana Maria Moura Pires de Andrade, 1952-.

▼ 

Dentre as várias espécies fúngicas descritas na literatura, as leveduras do gênero Candida são os agentes de infecção hospitalar de maior importância em Unidade de Terapia Intensiva (UTI), representando um desafio à sobrevida dos pacientes com graves doenças de base, devido à suscetibilidade destes pacientes à invasão fúngica. A identificação fenotípica das leveduras assim como levantamentos periódicos podem revelar tendências importantes ou mesmo o surgimento de novas espécies, auxiliando o desenvolvimento de medidas preventivas direcionadas. Os objetivos deste trabalho foram realizar um levantamento epidemiológico das leveduras encontradas em ponta de cateter e hemoculturas de pacientes de uma UTI oncológica e comparar espécies isoladas, verificando diferenças de frequência em relação ao local isolado. Trata-se de um estudo observacional retrospectivo analítico-descritivo realizado na UTI de um instituto oncológico, no período de janeiro de 2010 a dezembro de 2013, a partir do banco de dados do Laboratório de Microbiologia e da Comissão de Controle de Infecção Hospitalar (CCIH), coletados em formato eletrônico e processados para análise estatística para avaliar correlação de espécies pelo programa SPSS 20.0 e medida de tendências. Os resultados foram, para ponta de cateter, 40 foram positivas, sendo 15 para C. albicans (37,5%), 13 para C. parapsilosis (32,5%), 05 para C. tropicalis (12,5%) e 07 para outras leveduras (17,5%). Quanto às hemoculturas 58 foram positivas, sendo 18 para C. albicans (31,0%), 17 para C. tropicalis (29,3%), 10 para C. parapsilosis (17,2%), 05 para C. krusei (8,6%) e 08 para outras leveduras (13,9%). Foram encontradas diferenças quanto à frequência das espécies em relação a topografia estudada.

Among the many fungal species described in the literature, yeasts of the genus Candida are the nosocomial infection agents of greater importance in the Intensive Care Unit (ICU), representing a challenge to the survival of patients with severe underlying diseases, due to susceptibility of these patients to fungal invasion. The phenotypic identification of yeast as well as periodic surveys can reveal important trends or even the appearance of new species, supporting the development of more assertive preventive measures. The objectives of this study were perform an epidemiological survey of yeasts found in catheter tip and blood cultures from patients of an oncology ICU and compare the isolated species, checking out differences of frequency in the isolation place. This is an analytical-descriptive retrospective observational study conducted in the ICU of a cancer institute, from January 2010 to December 2013 from the Microbiology Laboratory Database and Hospital Infection Control Commission (CCIH), electronically collected and processed for statistical analysis to assess correlation of species by SPSS 20.0 program and measure trends. The results were, for Catheter tips, 40 were positive, 15 for C. albicans (37.5%), 13 to C. parapsilosis (32.5%), 05 to C. tropicalis (12.5%) and 07 for other yeasts…

Advisors/Committee Members: Alexandre Ribeiro Bello, Paulo Murillo Neufeld, Jeferson Carvalhaes de Oliveira.

▼ 

Com o número crescente de pacientes sob imunossupressão induzida por doenças ou fármacos, as infecções fúngicas disseminadas estão se tornando problemas sérios de saúde, principalmente em ambiente hospitalar, e novas abordagens para a terapia antifúngica precisam ser investigadas. Grande parte das infecções disseminadas é provocada pela espécie Candida albicans sendo o fluconazol o fármaco de escolha, mas o surgimento de fenômenos de resistência fúngica tem sido relatado. Com o intuito de investigar o efeito do fluconazol associado a nanoestruturas sobre espécies de Candida, neste trabalho foram desenvolvidas nanoemulsões e nanocápsulas de poli-e- caprolactona contendo fluconazol. Análises morfológicas e físico-químicas das nanoestruturas foram realizadas revelando formato esférico e tamanho médio variando de 136,5 a 180,2 nm para as nanoemulsões (NE) e de 203,6 a 213,6 nm para as nanocápsulas (NC). Ambas as dispersões apresentaram características homogêneas e demonstraram estruturas monodispersas. O percentual de encapsulação do fluconazol nas NE e NC foi de 49,2 0,65 e 45,6 0,52, respectivamente. Procedimentos de purificação por diálise direta foram efetuados e as nanoestruturas foram testadas contra suspensões celulares de Candida albicans e Candida parapsilosis e seus efeitos avaliados por turbidimetria, contagem de células, teste de viabilidade celular por colorimetria com o reativo Brometo de 3-[4,5-dimetiltriazol-2-il]-2,5 difeniltetrazólio (MTT) e por quantificação de ergosterol utilizando fármaco livre, nanoemulsões e nanocápsulas de fluconazol submetidas ou não aos procedimentos de purificação. Os resultados demonstraram diferentes efeitos ocasionados pela presença das nanoestruturas contra C. albicans e C. parapsilosis quando comparados aos efeitos do fármaco livre. As nanoestruturas purificadas por diálise apresentaram um efeito com perfil de dose dependência frente à inibição do crescimento de Candida. Os resultados variaram segundo os métodos e as análises estatísticas não demonstraram correlação entre as diferentes metodologias. As duas espécies de Candida parecem se comportar de forma diferente quando expostas às nanoestruturas de fluconazol ou à presença de nanoestruturas livres de fármaco. Entretanto, muitos estudos ainda são necessários para se evidenciar o efeito das nanopartículas sobre o fenômeno de resistência das espécies de Candida testadas frente às nanoemulsões e nanocápsulas de fluconazol.

Nosocomial fungal infections are becoming serious health problems due to the growing number of patients under natural or induced immunossupression and there is a need for new approaches on antifungal therapy. The great part of disseminated fungal infections is related to Candida spp. and in many cases the drug of choice is fluconazole, which broad use has been related to fungal resistance emergence. Little is known about the activity of antifungal drugs associated to drug delivery systems in resistance phenomena. In this work we developed fluconazole nanoemulsions and poly-e- caprolacton nanocapsules…

Advisors/Committee Members: Rogélio Lopes Brandão, Rachel Basques Caligiorne, Vanessa Carla Furtado Mosqueira, Maria Lucia Pedrosa.

▼ 

Tese de mestrado integrado em Engenharia Biomédica e Biofísica , apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2015

Candida é uma família de fungos, normalmente, presente na flora gastrointestinal, nos orgãos genitais, no sistema respiratório e na pele de pessoas saudáveis e, até determinada quantidade, não trazem nenhum risco. Apenas 17 espécies de Candida podem ser consideradas como patogénicas para o ser humano e, dentro deste grupo, Candida albicans é a espécie mais comum e pode ser facilmente encontrada em ambiente hospitalar, comida, solo e outros animais, sendo, por isso, a probabilidade de adquirir este fungo elevada. Candida albicans é unicelular e com forma ovóide, tendo entre 4 e 6 μm de diâmetro. Esta espécie reproduz-se produzindo blastoconídios (ou gêmulas) e quando o processo de divisão não está completo produz pseudo-hífas ou, dependendo das condições, pode mesmo produzir hífas. O nível de desenvolvimento de hífas promove a patogenicidade deste tipo de fungos. C. albicans cresce aerobicamente em ambientes com temperaturas entre 25 e 37ºC e formam colónias redondas e brancas após 48 - 72h de incubação em pratos de agar. Como foi referido, C. albicans é geralmente inofensiva. No entanto, certas alterações no corpo, como variações de pH, podem provocar o crescimento excessivo deste fungo, potenciando a sua patogenicidade e tornando-se a causa de uma série de condições médicas incluindo infecções vaginais ou orais. Estas infecções podem ter também fontes exógenas, como uso de catéteres ou transmissão entre pessoas. Quando a infecção por C. albicans, designada por Candidíase, atinge a corrente sanguínea facilmente se dissemina para outros orgãos internos. Este é o estágio de infecção mais grave pois o seu diagnóstico é difícil e, caso não seja feito em tempo útil, pode ter consequências graves. Este fungo pode atingir a corrente sanguínea quando o sistema imunitário do doente se encontra comprometido. O uso excessivo de antibióticos, o crescimento do números de tratamentos invasivos aplicados (como quimioterapia e o transplante de órgãos) que comprometem o sistema imunológico dos doentes, juntamente com o aumento de portadores de HIV faz com que o grupo de risco seja elevado e tem provocado um aumento do número de casos de Candidíase Invasiva. As espécies de Candida são a causa de 70-80% de infecções do sangue causadas por fungos, e 45-65% destes casos são causados por Candida albicans. Para além dos custos médicos que estes casos representam, 40% deles levam os pacientes à morte, sendo as infecções causadas por Candida albicans consideradas um problema de saúde pública. A principal razão para a elevada taxa de mortalidade referida deve-se ao facto deste tipo de infecções gerarem sintomas que são comuns a outros tipos de problemas, como febre ou outro tipo de sintomas dependendo do orgão atingido. Caso o organismo não responda ao tratamento utilizado, os órgãos do paciente podem parar de funcionar. Outra razão que contribui para dificultar o tratamento eficiente deste tipo de…

Advisors/Committee Members: Ferreira, Hugo Alexandre, Kwasny, Dorota.

▼ 

A Neuromielite Óptica (NMO), anteriormente considerada como um subtipo de Esclerose Múltipla, é uma doença autoimune, inflamatória do sistema nervoso central, na qual o sistema imune ataca a mielina dos neurônios localizados nos nervos ópticos e medula espinhal, produzindo, então, mielite e neurite óptica simultânea ou sequenciais. A patogênese da neuromielite óptica é influenciada pela combinação de fatores genéticos e ambientais, incluindo agentes infecciosos. Diferentes doenças infecciosas podem tanto desencadear como exacerbar a autoimunidade. Portanto, o objetivo do presente estudo foi de analisar a responsividade imune in vitro a Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Candida albicans em pacientes com NMO recorrente-remitente, e a correlacionar ao nível de incapacidade neurológica. Nesse contexto, a extensão da linfoproliferação e perfil de citocinas em resposta a S. aureus e C. albicans, em culturas de células mononucleares do sangue periférico (CMSP) foram similares entre pacientes com NMO e indivíduos saudáveis. Entretanto, maior proliferação de células T associada à elevada liberação de IL-1β, IL-6 e IL-17 foi observada em culturas de células derivadas de pacientes com NMO quando estimuladas com E. coli. Ademais, nessas culturas, a produção de IL-10 foi significativamente menor quando comparada ao grupo controle. Ensaios conduzidos em culturas de CMSP depletadas de diferentes subtipos de linfócitos demonstraram que, enquanto células T CD4+ e T CD8+ produzem IL-6 em resposta a E. coli, a produção de IL-17 foi praticamente restrita às células T CD4+. Os níveis de IL-6 e IL-17 in vitro induzidos por E. coli foram correlacionados positivamente às incapacidades neurológicas. Essa maior tendência a produzir citocinas relacionadas ao perfil Th17 foi diretamente associada aos níveis de IL-23 produzidos por monócitos ativados com LPS. De modo interessante, níveis elevados de LPS foram quantificados no plasma de pacientes com NMO e estes foram correlacionados aos níveis plasmáticos de IL-6. Em conclusão, nossos resultados sugerem que uma maior responsividade a E. coli poderia estar envolvida na patogênese da NMO. Esse tipo de investigação é muito importante pois inibidores da ligação ou sinalização do TLR poderiam ser considerados terapias com grande potencial como adjuvantes no tratamento de pacientes com NMO.

Neuromyelitis optica (NMO), once considered as a subtype of Multiple Sclerosis, is an autoimmune, inflammatory disorder of the central nervous system in which the immune system attacks myelin of the neurons located at the optic nerves and spinal cord, thus producing a simultaneous or sequential optic neuritis and myelitis. The pathogenesis of neuromyelitis optica (NMO) is influenced by a combination of genetic and environmental factors, including infectious agents. Different infectious diseases can both trigger or exacerbate autoimmunity. Therefore, the objective of the present work was to evaluate the in vitro immune responsiveness to Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Candida albicans in…

Advisors/Committee Members: Cleonice Alves de Melo Bento, Carmem Soares de Meirelles Saramago, Elizabeth de Andrade Marques, Landi Veivi Guillermo Costilla, Arnaldo Feitosa Braga de Andrade.

▼ 

Tese de mestrado em Microbiologia Aplicada, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, em 2018

Candida glabrata é um fungo patogénico que emergiu nas últimas décadas como a segunda causa mais comum de candidíase em todo o mundo. O género Candida compreende quase duzentas espécies, a maioria das quais são omnipresentes em numerosos habitats naturais e artificiais. As espécies patogénicas de Candida são encontradas como comensais no trato oral, gastrointestinal e genital de hospedeiros saudáveis e têm a propensão de se tornar patogénicas quando o hospedeiro se torna imunodeprimido. As infeções causadas por esta levedura são caracterizadas por uma elevada mortalidade e morbilidade. Entre outros fatores de virulência, as espécies do género Candida exibem, em comparação com espécies não patogénicas, uma expansão de famílias de transportadores de enzimas extracelulares e transmembranares, bem como um enriquecimento em transportadores de superfície celular com o potencial de conferirem resistência aos fármacos por funcionarem como bombas de efluxo de drogas, prejudicando a eficácia das terapias antifúngicas. C. glabrata é filogeneticamente mais próxima da levedura modelo - Saccharomyces cerevisiae do que das outras espécies do género Candida. No entanto, é frequentemente a segunda ou terceira causa mais comum de infeções fúngicas, sendo que em populações como diabéticos e idosos chega a ser o fungo patogénico dominante. Em comparação com outras espécies, C. glabrata fornece um modelo promissor para o estudo da base genética da resistência a múltiplos antifúngicos. A resistência a múltiplos fármacos é definida como a aquisição simultânea de resistência a um grande espectro de substâncias químicas citotóxicas estrutural e funcionalmente não relacionadas, às quais o organismo nunca tinha sido exposto. Este fenómeno está a tornar-se um problema clínico crescente, uma vez que compromete a eficácia da terapêutica antimicrobiana. Para diminuir com sucesso o número de agentes patogénicos resistentes a múltiplos fármacos, é fundamental adquirir um conhecimento extenso dos mecanismos moleculares subjacentes à resistência aos fármacos antimicrobianos. Esta resistência a fármacos pode ser adquirida através de vários mecanismos: (I) alteração dos níveis de expressão e atividade de proteínas da membrana plasmática ou canais e transportadores de membrana; (II) degradação enzimática ou inativação dos fármacos; (III) ativação de sistemas de replicação e reparação de DNA; (IV) impedimento da entrada do fármaco na célula e/ou extrusão ativa do mesmo catalisada por transportadores transmembranares; (V) sequestro do fármaco em vesículas intracelulares; (VI) alteração ou modificação do alvo do fármaco. A ação de transportadores de membrana, incluindo bombas de efluxo da superfamília ATP-Binding Cassette (ABC) e transportadores da família Drug:H+ Antiporter (DHA), é fundamental para a resistência a múltiplos fármacos. Os transportadores ABC obtêm energia por hidrólise de ATP, enquanto que os transportadores DHA…

Advisors/Committee Members: Teixeira, Miguel Nobre Parreira Cacho, Tenreiro, Ana Maria Moura Pires de Andrade,1952-.