▼ O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro e in situ os efeitos de um agente de limpeza cavitÃria a base de digluconato de clorexidina a 2% (CHX) na desinfecÃÃo de dentina cariada, bem como determinar a susceptibilidade de diferentes espÃcies a este agente antimicrobiano. Setenta blocos de dentina humana foram distribuÃdos de forma aleatÃria e submetidos a desafio cariogÃnico por um mÃtodo microbiolÃgico in vitro (n=15), bem como um in situ (n=20). No estudo in vitro, 30 blocos de dentina foram imersos por 5 dias, em caldo BHI inoculado com Streptococcus mutans, para induÃÃo de cÃrie. No estudo in situ, 20 voluntÃrios usaram dispositivos palatinos contendo dois blocos de dentina, que foram gotejados com soluÃÃo de sacarose 40%, 10 vezes ao dia, durante 14 dias. Ao final de cada perÃodo experimental, os blocos de dentina foram divididos aleatoriamente em dois grupos: Controle (soluÃÃo de NaCl a 0,9%) e CHX. Amostras de dentina infectada foram coletadas antes e 5 min apÃs cada tratamento, em seguida, as bactÃrias foram cultivadas e os microorganismos contados. Foram avaliados os seguintes microorganismos: estreptococos mutans in vitro e in situ, estreptococos totais, microorganismos viÃveis totais e lactobacilos, in situ. A reduÃÃo microbiana promovida por cada tratamento foi calculada e comparada entre os grupos pelo teste t, a susceptibilidade dos microorganismos isolados in situ foi comparada pela anÃlise de variÃncia ANOVA (= 5%). A reduÃÃo microbiana promovida pela CHX foi significativamente maior quando comparada ao grupo controle para todos os microorganismos avaliados tanto in vitro quanto in situ. No entanto, nÃo houve diferenÃa na susceptibilidade dos vÃrios microorganismos avaliados. Desta forma, a CHX foi capaz de reduzir a populaÃÃo microbiana em dentina infectada, sugerindo que esta abordagem pode ser uma ferramenta auxiliar para desinfecÃÃo de dentina cariada residual suprimindo o crescimento de microorganismos associados ao desenvolvimento de cÃrie. Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues.

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O benefÃcio de restauraÃÃes de cimento de ionÃmero de vidro modificado por resina (RMGIC) na inibiÃÃo de cÃries pode ser questionado na presenÃa de dentifrÃcio fluoretado e de restauraÃÃes envelhecidas. Objetivo: Avaliar o efeito do processo de envelhecimento em cÃries ao redor de restauraÃÃes na junÃÃo amelo-cementÃria, na presenÃa de flÃor proveniente de RMGIC ou dentifrÃcio. MÃtodos: Um estudo in situ randomizado duplo cego e cruzado foi realizado em duas fazes de 14 dias. Desesseis voluntÃrios utilizaram um dispositivo intraoral contendo blocos de dentes restaurados com resina composta (CR) ou RMGIC, tendo sofrido ou nÃo o processo de envelhecimento. Os blocos foram expostos a uma soluÃÃo de 20% de sacarose, 10x/dia e os voluntÃrios usaram dentifrÃcio com ou sem flÃor 3x/dia. O biofilme formado sobre os blocos foi analizado para determinar a contagem de streptococos totais, estreptococos mutans e lacatobacilos, assim como a concentraÃÃo de flÃor. Resultados: A desmineralizaÃÃo do esmalte foi determinada por meio de microdureza longitudinal na margem da restauraÃÃo. Foram utilizados os testes de KruskalâWallis e ANOVA fatorial, seguidos pelo teste de Tukey (p<0.05). NÃo foram encontradas diferenÃas estatisticamente significantes na microbiota cariogÃncia. A concentraÃÃo do flÃor no biofilme foi maior para restauraÃÃes de RMGIC. Para o esmalte, independente do uso do dentifrÃcio ou do processo de envelhecimento, houve maior desmineralizaÃÃo ao redor de restauraÃÃes de CR. Para a dentina, na ausÃncia do dentifrÃcio fluoretado, houve maior desmineralizaÃÃo ao redor de restauraÃÃes de resina composta envelhecidas. ConclusÃo: Os resultados sugerem que restauraÃÃes RMGIC promovem proteÃÃo contra cÃrie em esmalte e dentina, enquanto que o processo de envelhecimento afeta o desenvolvimento de cÃrie em dentina, aumentando a progressÃo da cÃrie.

The beneficial of resin modified glass ionomer cement (RMGIC) restorations in caries inhibition may be questioned due to F-dentifrice use and ageing of the restorations. Objective: To evaluate the effect of an ageing process on caries around cemento-enamel junction restorations in the presence of fluoride from RMGIC or dentifrice. Methods: A randomized double-blind crossover in situ study was performed in 2 phases of 14 days. Sixteen volunteers wore palatal devices containing dental slabs restored with composite resin (CR) or RMGIC, either aged or unaged. The slabs were exposed to a 20% sucrose solution, 10x/day and the volunteers used a non-F or an F-dentifrice 3x/day. The biofilm formed over the slabs was analyzed to determine the counts of total streptococci, mutans streptococci and lactobacilli as well as F-concentration. Results: Enamel demineralisation was determined by cross-sectional microhardness (CSMH) at the margin of the restoration. KruskalâWallis and factorial ANOVA, followed by Tukey test, were used to data evaluation (p<0.05). No statistically significant differences were found in the cariogenic microbiota. F-concentration in biofilm was higher for RMGIC…

Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues.

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CÃries secundÃrias podem desenvolver-se na interface dente-restauraÃÃo diante da presenÃa de fendas marginais, mas este processo poderia ser inibido pela presenÃa de flÃor. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar, in situ, atravÃs de um delineamento cruzado, aleatorizado, boca dividida e duplo-cego, a influÃncia do flÃor proveniente de sistema adesivo autocondicionante ou dentifrÃcio no desenvolvimento de cÃrie secundÃria em esmalte e dentina radicular ao redor de restauraÃÃes de resina composta com ou sem fenda marginal. Durante duas fases de 14 dias, 16 voluntÃrios utilizaram dispositivos intra-orais palatinos contendo 4 blocos de dente humano compostos por uma porÃÃo de esmalte e dentina e restaurados com resina composta FiltekTM Z-250. Os blocos foram aleatoriamente divididos em 8 grupos experimentais para cada substrato (esmalte e dentina) restaurado com um dos seguintes adesivos: All Bond SETM (nÃo fluoretado - ANF) e One Up Bond F Plus (fluoretado - AF), com a presenÃa de fendas marginais (G+) ou nÃo (G-), e com o uso de dentifrÃcio fluoretado (DF) ou placebo (DP). Os procedimentos restauradores foram realizados seguindo as instruÃÃes dos fabricantes e a fenda foi criada com a utilizaÃÃo de matrizes metÃlicas. Cada voluntÃrio foi instruÃdo a gotejar sobre os blocos uma soluÃÃo de sacarose a 20%, 10 vezes ao dia e a usar o dentifrÃcio padronizado 3 vezes ao dia. Ao final de cada fase clÃnica, os blocos dentais foram removidos e o biofilme foi coletado para a contagem de estreptococos do grupo mutans, lactobacilos e microrganismos totais, assim como para a anÃlise da quantidade de flÃor presente. A perda mineral foi analisada pelo teste de microdureza em corte longitudinal no esmalte e na dentina. A profundidade da lesÃo e a presenÃa de lesÃo da parede foram determinadas por microscopia de luz polarizada. Os resultados foram analisados por anÃlise de variÃncia (ANOVA) seguindo um delineamento fatorial 2x2x2. O flÃor do adesivo nÃo ofereceu proteÃÃo contra o desenvolvimento de cÃrie secundÃria em esmalte e dentina para nenhuma das variÃveis de resposta estudadas (p > 0,05). O flÃor do dentifrÃcio mostrou leve proteÃÃo contra a desmineralizaÃÃo em dentina (p < 0,05). Houve uma maior presenÃa de lesÃo de parede, tanto em esmalte quanto em dentina (p< 0,05), em restauraÃÃes com fenda independente da presenÃa de flÃor. No entanto, em restauraÃÃes com fenda, uma maior profundidade de lesÃo foi observada em dentina (p <0,05). Estes resultados sugerem que o flÃor do adesivo nÃo foi capaz de inibir a desmineralizaÃÃo ao redor de restauraÃÃes mesmo com a presenÃa de flÃor no dentifrÃcio. No entanto, a presenÃa de fenda visÃvel afeta o desenvolvimento de cÃrie secundÃria, principalmente na dentina radicular, aumentando a progressÃo da lesÃo cariosa.

Secondary caries may be developed between tooth and restoration when marginal gaps are present, however this process could be inhibited by fluoride presence. This research had as the main objective to evaluate, in situ, through a randomized, split-mouth and double-blind,…

Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues.

▼ A clorexidina (CLX) à o agente antimicrobiano que mais tem sido investigado no controle do biofilme e sua incorporaÃÃo em cimento de ionÃmero de vidro (CIV) tem sido proposta para reduzir o nÃmero de micro-organismos em pacientes com alta atividade de cÃrie. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da adiÃÃo de sais de CLX, em suas formas livres (diacetato - DA ou digluconato â DG) e incorporada em micropartÃculas polimÃricas de Poli (Ãcido lÃctico-co-glicÃlico) (PLGA), nas propriedades fÃsico-quÃmicas e antibacterianas de um CIV ativado quimicamente. Materiais e mÃtodos: MicropartÃculas de PLGA contendo diacetato (MPDA) ou digluconato de CLX (MPDG) foram obtidas atravÃs da tÃcnica de secagem por pulverizaÃÃo. Os grupos experimentais foram preparados com a adiÃÃo de 1% de CLX nas suas formas livres ou microencapsuladas em CIV, no grupo controle do experimento nÃo houve incorporaÃÃo de CLX, constituindo os seguintes grupos: CIV (controle), DA, DG, MPDA e MPDG. Realizaram-se anÃlises qualitativas de estabilidade da CLX livre, espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR), liberaÃÃo cumulativa de CLX (%) e imagens em microscopia eletrÃnica de varredura (MEV), seguidas de testes de tempo de presa, escoamento e resistÃncia à compressÃo. Para a anÃlise do efeito antibacteriano, foi utilizado inÃculo de S. mutans em meio de cultura triptona de soja (TSB) enriquecido com extrato de levedura e 1% de sacarose, submetendo os espÃcimes à formaÃÃo de biofilme por atà 5 dias. ApÃs 24 h da adesÃo inicial e com intervalos subseqÃentes de 1 dia, foi determinado o nÃmero de unidades formadoras de colÃnia (UFC/ml) do biofilme formado sobre espÃcimes recÃm preparados (apÃs 24 h de tempo de presa - Grupo imediato) e espÃcimes envelhecidos em Ãgua em 37 ÂC por 15 dias (Grupo envelhecido). A anÃlise estatÃstica para os testes fÃsico-quÃmicos e efeito antibacteriano foi realizada atravÃs da anÃlise de variÃncia (ANOVA) e Mann Whitney, ambos seguidos por testes de comparaÃÃo de mÃdias aos pares, com nÃvel de significÃncia prÃ-estabelecido em 5%. Resultados: O DG em soluÃÃo na presenÃa do CIV apresentou maior estabilidade em temperatura ambiente e a 37 ÂC quando comparado ao DA. A anÃlise de FTIR nÃo mostrou indicativos de reaÃÃo quÃmica entre o CIV e a CLX nas concentraÃÃes testadas. As formulaÃÃes microencapsuladas aumentaram, enquanto que o DG diminuiu o tempo de presa (p<0,05). A inclusÃo de DG aumentou a resistÃncia à compressÃo (p<0,05) e o escoamento foi diminuÃdo pela inclusÃo das formas livres de CLX (p<0,05). Os grupos microencapsulados mostraram um perfil de liberaÃÃo mais tardio e gradual quando comparado aos grupos com incorporaÃÃo de CLX livre. A incorporaÃÃo de CLX mostrou efeito antibacteriano significativo quando comparado ao CIV puro, porÃm sem diferenÃa estatÃstica significativa quando se compara os grupos com as formas livres ou microencapsuladas, bem como imediatos e envelhecidos. ConclusÃo: A incorporaÃÃo de CLX resultou em cimentos ionomÃricos com efeito antibacteriano e… Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Juliano Sartori MendonÃa, Simone Duarte.

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Preparos cavitÃrios dentÃrios confeccionados com laser de Er:YAG podem resultar em uma maior conservaÃÃo de tecidos sadios, maior abertura dos tÃbulos dentinÃrios sem presenÃa de lama dentinÃria, menor nÃmero de microrganismos na cavidade, alÃm de menor sensibilidade dolorosa durante sua confecÃÃo. Considerando que a irradiaÃÃo a laser pode diminuir a resistÃncia de uniÃo de materiais restauradores à dentina, esse estudo analisou o efeito da viscosidade de um sistema adesivo de condicionamento total de dois passos, em dentina irradiada com laser de Er:YAG. A dentina preparada foi testada em 2 tipos de preparo de superfÃcie (ponta diamantada e laser de Er:YAG) e a viscosidade do adesivo em 3 diferentes diluiÃÃes (Adperâ Single Bond 2 [SB], SB+10% e SB+20% de etanol). Sessenta terceiros molares humanos foram cortados e polidos, expondo superfÃcies de dentina oclusal. Foi utilizado o sistema adesivo SB para preparar as formulaÃÃes com diferentes viscosidades. As superfÃcies de dentina foram condicionadas com Ãcido fosfÃrico e os adesivos foram aplicados de acordo com as instruÃÃes do fabricante. PlatÃs de resina composta (Filtekâ Z250 XT) de 5 mm foram confeccionados. Os dentes preparados foram estocados em Ãgua destilada (37ÂC) por 24 h. Os espÃcimes foram seccionados em palitos de cerca de 1 mm de Ãrea transversal, os quais foram submetidos ao teste de microtraÃÃo. Propriedades fÃsico-mecÃnicas como Ãngulo de contato, taxa de evaporaÃÃo, grau de conversÃo, sorÃÃo/solubilidade de Ãgua e viscosidade dos adesivos foram definidas. Todos os resultados foram analisados com Two-way ANOVA e teste de comparaÃÃes mÃltiplas de Tukey (α=0.05). NÃo houve diferenÃa estatÃstica entre os valores de microtraÃÃo para todos os grupos. Os nÃveis de viscosidade nÃo afetaram a resistÃncia de uniÃo da dentina irradiada com laser de Er:YAG ou tratada com ponta diamantada.

Dental cavities prepared with Er:YAG laser may result in greater conservation of sound tissue, further opening of dentinal tubules without the presence of smear layer, few microorganisms in the cavity, and lower pain sensitivity during operative procedure. Whereas laser irradiation may decrease the bond strength of resin materials to dentin, this study examined the effect of viscosity of a two-step total-etch adhesive system on the bonding to dentin irradiated with Er:YAG laser. The prepared dentin was tested in 2 types of surface preparation (diamond tip and Er:YAG laser) and the viscosity of the adhesive at 3 different dilutions (Adperâ Single Bond 2 [SB], SB+10% e SB+20% de ethanol). Sixty human third molars were sectioned and polished, exposing dentin occlusal surfaces. SB adhesive system was used to prepare formulations with different viscosities. The dentin surfaces were acid etched and the adhesives were applied according to the manufacturer's instructions. Composite resin buildups (Filtekâ Z250 XT) of 5 mm were made. Prepared teeth were stored in distilled water (37 °C) for 24 h. Specimens were sectioned into sticks (1 mm of cross sectional area), which…

Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Haroldo CÃsar Pinheiro BeltrÃo, Vanara FlorÃncio Passos.

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Tooth structure immediately adjacent to restorations is susceptible to secondary caries, which may be caused by imperfect adaptation of restorative materials and subsequent microorganism colonization. Therefore, in order to identify methods of preventing secondary caries and increasing clinical dental restoration durability, different restorative dental materials have been introduced and applied in dental clinics. Thus, this in situ study assessed the effects of different restorative materials on the microbiological composition of dental biofilm and evaluated their ability of protecting the adjacent enamel against acid attacks from bacterial activity. A double-blind, split-mouth design was performed in one phase of 14 days, during which, 20 volunteers wore intra-oral palatal devices with five human enamel slabs, which were extra-orally restored according to the manufacturerâs specifications, using one of the following materials: Filtek Z 250/Single Bond composite resin; Permite amalgam; Fuji II encapsulated resin-modified glass ionomer; Vitremer resin-modified glass ionomer and Ketac Molar conventional glass ionomer.. During the experimental period, all subjects used fluoride-containing dentifrice 3x/day and a 20% sucrose solution was dripped onto the slabs 8x/day in predetermined times. The biofilm formed on the slabs was analyzed to determine total and mutans streptococci as well as lactobacilli counts. Demineralization (delta S) was determined on enamel by cross-sectional microhardness at 20 and 70 -Âm from the restoration margin. In order to verify the differences among the treatments, Kruskal-Wallis and ANOVA followed by Minimum Squares test were applied for cariogenic microbiota and delta S, respectivly. No statistically significant differences were found in the cariogenic microbiota grown on the slabs. At 20-Âm distance, only Fuji II statistically differed from the other groups presenting the lowest demineralization. At 70-Âm, Fuji II significantly inhibited demineralization when compared to Permite, Filtek-Z-250 and Ketac Molar. Concluding, in the background of fluoride dentifrice and under the cariogenic exposure condition of this study, only the encapsulated resin-modified glass ionomer material provided additional protection against secondary caries.

A estrutura dentÃria imediatamente adjacente a restauraÃÃes à suscetÃvel ao surgimento de cÃrie secundÃria, que pode ocorrer devido a imperfeiÃÃes na adaptaÃÃo de materiais restauradores e subseqÃente colonizaÃÃo por microrganismos. Logo, com o objetivo de identificar os mÃtodos de prevenÃÃo da cÃrie secundÃria e aumentar a longevidade das restauraÃÃes, diferentes materiais restauradores tÃm sido introduzidos e usados na clÃnica odontolÃgica. Desta forma, este estudo in situ avaliou os efeitos de diferentes materiais restauradores na composiÃÃo microbiolÃgica do biofilme dental bem como a habilidade destes materiais em proteger o esmalte adjacente dos ataques Ãcidos provenientes da atividade bacteriana. Foi empregado um delineamento duplo-cego,…

Advisors/Committee Members: Haroldo CÃsar Pinheiro BeltrÃo, Jaime Aparecido Cury, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues.

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A hiperestesia dentinÃria à um fenÃmeno sensorial complexo e de difÃcil soluÃÃo na clÃnica odontolÃgica. Apesar da grande diversidade de tratamentos propostos, ainda nÃo existe uma terapia considerada ideal para eliminar essa situaÃÃo desconfortÃvel. Esta dissertaÃÃo, constituÃda por dois artigos cientÃficos, teve por objetivos: (1) revisar criticamente a literatura disponÃvel sobre os principais aspectos relacionados à etiologia e ao tratamento da hiperestesia dentinÃria; (2) avaliar clinicamente a eficiÃncia de agentes anti-hiperestÃsicos no tratamento da hiperestesia dentinÃria. No estudo 1, a literatura cientÃfica pertinente ao assunto foi analisada atravÃs dos resultados de investigaÃÃes clÃnicas e laboratoriais pesquisadas usando a base de dados medline e busca manual de referÃncias citadas em artigos cientÃficos. No estudo 2, um total de 164 dentes, provenientes de 30 pacientes com diagnÃstico de hiperestesia dentinÃria moderada ou severa, foi dividido aleatoriamente em trÃs grupos e avaliado clinicamente de acordo com o tratamento administrado: aplicaÃÃo de laser de arseniato de gÃlio-alumÃnio (AsGaAl), aplicaÃÃo de gel de oxalato de potÃssio a 3% e aplicaÃÃo de gel placebo. As aplicaÃÃes dos tratamentos foram realizadas em intervalos semanais, durante o perÃodo de quatro semanas consecutivas e o grau de sensibilidade foi mensurado para cada dente atravÃs de uma escala visual analÃgica em resposta aos estÃmulos tÃtil (sonda exploradora) e evaporativo (jato de ar) antes da primeira aplicaÃÃo (baseline), imediatamente apÃs e trÃs meses apÃs a Ãltima aplicaÃÃo dos tratamentos. Os dados foram submetidos à anÃlise estatÃstica pelo teste de Kruskal-Wallis (p=0,05) e o grau de reduÃÃo da hiperestesia dentinÃria foi avaliado para cada um dos perÃodos observacionais em relaÃÃo ao baseline. A anÃlise crÃtica apresentada no artigo 1 mostrou que a literatura apresenta diversos tipos de tratamento para a hiperestesia dentinÃria, que variam desde procedimentos simples, que podem ser executados pelo prÃprio paciente, atà procedimentos complexos, que envolvem a combinaÃÃo de diferentes terapias. Os resultados do artigo 2 demonstraram que a aplicaÃÃo dos tratamentos propostos, inclusive o placebo, proporcionou reduÃÃo estatisticamente significante, imediata e mediata, da sensibilidade em resposta aos estÃmulos tÃtil e evaporativo (p<0,05). No entanto, nÃo houve diferenÃa estatisticamente significante entre os trÃs grupos estudados, independentemente do estÃmulo aplicado, tanto na avaliaÃÃo imediata quanto na mediata (p>0,05). Em conclusÃo, os resultados desses estudos indicam que o conhecimento acerca do mecanismo de ocorrÃncia da hiperestesia dentinÃria e dos agentes anti-hiperestÃsicos disponÃveis à indispensÃvel para a elaboraÃÃo de um tratamento eficiente. AlÃm disso, concluiu-se que os trÃs tratamentos utilizados no estudo clÃnico sÃo eficientes para a reduÃÃo da hiperestesia dentinÃria e que existe grande influÃncia do efeito placebo na reduÃÃo da sensibilidade dolorosa

Dentinal hypersensitivity is a complex…

Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Josà Carlos Pereira, SÃrgio Lima Santiago.

▼ O nÃmero de estudos que correlacionam proteÃnas salivares e cÃrie dentÃria tÃm aumentado consideravelmente, no entanto, nÃo hà elementos suficientes que permitam qualificÃ-las como biomarcadores especÃficos para a doenÃa. O objetivo do estudo foi realizar uma anÃlise comparativa das proteÃnas da saliva de pacientes com cÃrie precoce da infÃncia (CPI) em diferentes nÃveis de severidade, visando à identificaÃÃo de potenciais biomarcadores salivares especÃficos para diagnÃstico desta patologia. Metodologia: 1) busca eletrÃnica foi realizada na base de dados PubMed Medline aplicando os termos: "cÃrie" e "proteÃnas e peptÃdeos salivares". Cento e vinte estudos foram identificados e 10 selecionados para a revisÃo; 2) Cento e vinte e seis crianÃas (24-71 meses de idade) foram selecionadas. As crianÃas foram examinadas de acordo com o Ãndice visual ICDAS II e divididas em 3 grupos (n = 42): Grupo livre de cÃrie (CF) (ICDAS 0), Grupo cÃrie de esmalte (EC) (ICDAS 1, 2 e 3) e Grupo cÃrie dentina (DC) (ICDAS 5 e 6). As amostras foram digeridas e analisadas por espectrometria de massa de varrimento multiplexado alternativo (MSE). As anÃlises foram realizadas com TransOmics Software, Anova e Volcano plot v-plot (p<0,05). Resultados: 1) Noventa por cento de artigos mostraram uma relaÃÃo entre proteÃnas salivares e presenÃa ou ausÃncia de cÃries; 2) Trezentos e uma proteÃnas foram identificadas e quantificadas. Destas, 122 proteÃnas foram expressas com diferenÃa estatÃstica significante em pelo menos um grupo: 84 foram identificados nos 3 grupos; uma proteÃna foi expressa apenas no CF e outro no EC; 11 foram expressas apenas no CF e EC, 15 no CF e DC, 10 no EC e DC. Das 122 proteÃnas, 54 proteÃnas foram, pelo menos, 5 vezes mais expressas na comparaÃÃo entre os grupos e foram consideradas como candidatas a biomarcadores. Destas 54, 18 proteÃnas com potencial mecanismo de aÃÃo relacionado a cÃrie dentÃria foram selecionadas e analisadas. ConclusÃo: A relaÃÃo entre proteÃnas salivares e presenÃa ou ausÃncia de cÃrie à notÃria e jà està estabelecida. Neste estudo,18 proteÃnas apresentaram uma relaÃÃo com a CPI, e a SAA1, AIMP1, IL36A, IL36G e CAH1 possuem um maior potencial para serem consideradas biomarcadores da cÃrie dentÃria. No entanto, estudos longitudinais ainda precisam ser realizados, a fim de estabelecer o papel de cada uma das proteÃnas estudadas e consolidar o seu papel como um biomarcador. Advisors/Committee Members: Arlindo de Alencar Araripe Noronha Moura, Simone Duarte, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues.

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The elimination of bacteria inside the demineralized dentin layer might contribute for a more conservative approach in the restorative treatment of deep dentin caries lesions. This way, this in vitro study aimed to establish safe and effective parameters for using an LED (λ = 620-660 nm) associated to the photosensitizer toluidine blue O (TBO) in the disinfection of artificially produced dentin caries lesions. For this, slabs with 25 mm2 of flatted occlusal human dentin were immersed for 5 days in BHI broth inoculated with Streptococcus mutans for caries induction. After demineralization, the slabs were randomly allocated to 10 experimental groups (n=15), as follows Control5; Control10; Control15; TBO; LED5; LED10; LED15; PDT5; PDT10 and PDT15, which were treated with TBO (0.1 mg.ml-1 for 5 min) or 0.9% NaCl solution for 5, 10 or 15 min, and submitted or not to LED irradiation for 5, 10 or 15 min (47, 94, and 187 J/cm2). Dentin samples from caries lesions were collected before and after treatments and bacteria were then cultured for Streptococcus mutans counts. In addition, using a type K thermometer, the temperature inside the pulp and in periodontal area was monitored for the groups PDT5, PDT10 and PDT1510 in 10 teeth with deep occlusal cavities. Paired t test/Wilcoxon matched pairs test (=5%) were used to determine differences between microbial population before and after treatments, and ANOVA followed by Tukey test for comparing data of temperature and log reductions. Statistically significant differences in Streptococcus mutans viability were found for the groups: Control15; LED15; PDT5; PDT10 and PDT15. The temperature from intrapulpal and periodontal area were lower than 2 °C, being higher inside the pulpal chamber for group PDT15 when compared to group PDT5. Thus, it the experimental conditions used in the study, photodynamic therapy may be a safe and effective treatment to be used for disinfecting carious dentin, however the influence of time of irradiation/exposition it the Streptococcus mutans viability should be better investigated.

A eliminaÃÃo de bactÃrias presentes na camada de dentina desmineralizada poderia contribuir para uma abordagem mais conservadora no tratamento restaurador de lesÃes de cÃrie dentinÃria profundas. Desta forma, este estudo in vitro objetivou estabelecer parÃmetros eficazes e seguros para a utilizaÃÃo de um LED (λ = 620-660 nm) associado ao fotossensibilizador azul de orto-toluidina (TBO) na desinfecÃÃo de lesÃes de cÃrie dentinÃria produzidas artificialmente. Para tal, blocos com 25 mm2 de dentina oclusal planificada foram imersos por 5 dias em BHI caldo inoculado com Streptococcus mutans para induÃÃo de cÃrie. Depois da desmineralizaÃÃo, os blocos foram aleatoriamente distribuÃdos em 10 grupos experimentais (n=15), a saber: Controle5; Controle10; Controle15; TBO; LED5; LED10; LED15; TFD5; TFD10 e TFD15, que foram tratados ou nÃo com TBO (0,1 mg.ml-1 por 5 minutos) ou soluÃÃo de NaCl a 0,9% por 5, 10 ou 15 minutos, e submetidos ou nÃo a irradiaÃÃo com LED por…

Advisors/Committee Members: Eduardo Bedà Barros, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Iriana Carla Junqueira Zanin, Jaime Aparecido Cury.

▼ O presente estudo avaliou a aÃÃo de catequinas do chà verde em dentina humana sob situaÃÃo de desafio erosivo e originou trÃs capÃtulos. Nos dois primeiros, blocos de dentina humana (n=10) coronÃria ou radicular (4x4x2mm) foram imersos em saliva (2h) para formaÃÃo de pelÃcula adquirida. Foram submetidos de forma cÃclica (3x/dia-3 dias) ao desafio erosivo pela imersÃo em Ãcido cÃtrico (60s), seguido pelos tratamentos: G1-Ãgua destilada (AD), G2-SoluÃÃo de gluconato de clorexidina 0,12% (CLX), G3-InfusÃo de chà verde (CV). Os espÃcimens permaneciam em saliva artificial entre os desafios e sob agitaÃÃo (37ÂC). A microdureza de superfÃcie e perfilometria dos blocos foram analisadas diariamente. O estudo in situ foi randomizado, cego, cruzado e 20 voluntÃrios utilizaram dispositivo intra-oral, contendo 4 blocos de dentina humana, por trÃs fases de 5 dias cada. Foi realizada imersÃo extra-oral do dispositivo em 50 mL de Coca-Cola (4x/dia-1min), seguida por gotejamento (1mL, 4x/dia) sobre os blocos: G1-soluÃÃo de fluoreto de sÃdio (NaF) 0,05%, G2-epigalocatequina-3-galato (EGCG) 0,1%, G3-CV. Foram realizadas anÃlises de microdureza de superfÃcie, perfilometria e microscopia eletrÃnica de varredura. Para anÃlise da inibiÃÃo enzimÃtica, blocos de dentina humana foram congelados, moÃdos, submetidos à erosÃo por Ãcido cÃtrico (24h) e extraÃÃo de proteÃnas solÃveis. O pool de proteÃnas extraÃdo foi utilizado como fonte de metaloproteinases (MMPs), foi tratado: G1-sem tratamento, G2-CLX 0,12%, G3-NaF 0,05%, G4-CV, G5-EGCG 0,1% e foi submetido ao ensaio colorimÃtrico de inibiÃÃo enzimÃtica. Foi realizada a eletroforese das enzimas extraÃdas em gel de acrilamida sob condiÃÃes nÃo redutoras. O gel foi encubado por 3h em tampÃo de renaturaÃÃo modificado pelo acrÃscimo das soluÃÃes: G1-sem modificaÃÃo, G2-CLX 0,12%, G3-NaF 0,05%, G4-CV e G5-EGCG 0,1%, e corado em soluÃÃo contendo 0,025% Comassie blue e descorado com soluÃÃo de Ãcido acÃtico (10%). O padrÃo de normalidade dos dados foi analisado pelo teste de Kolmogorov-Smirnov, seguido por AnÃlise de variÃncia e teste de Tukey (α=5%). Foi observada reduÃÃo na perda de dureza da dentina coronÃria in vitro com o uso de CLX e CV em comparaÃÃo com o controle. O tratamento com CV reduziu significativamente o desgaste e a rugosidade da dentina coronÃria in vitro. O tratamento in vitro com CV reduziu estatisticamente o desgaste e a rugosidade da dentina radicular quando comparado ao controle e à CLX. NÃo houve diferenÃa estatisticamente significante entre os grupos em relaÃÃo à perda de dureza de superfÃcie de dentina radicular in vitro. Quanto ao estudo in situ, os tratamentos com EGCG e CV reduziram a perda de dureza da dentina significativamente. Por outro lado, nÃo houve diferenÃa estatÃstica nos valores de desgaste e rugosidade. A zimografia demonstrou que a CLX 0,12%, o CV e o EGCG 0,1% apresentaram aÃÃo inibitÃria sobre as MMPs, enquanto que no ensaio colorimÃtrico o CV apresentou inibiÃÃo enzimÃtica. A soluÃÃo de CV reduz in vitro o desgaste e a rugosidade da dentina coronÃria… Advisors/Committee Members: SÃrgio Lima Santiago, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Vanara FlorÃncio Passos, Paula Borges Jacques, Linda Wang.

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Sealants are materials applied to scars and fissures to prevent onset the onset of the caries process or interrupt its progression. Chlorhexidine (CLX) is a broad spectrum antimicrobial agent whose incorporation has been tested in various dental materials. The objective of this study was to evaluate the in vitro effect of the incorporation of chlorhexidine digluconate (DC) at 0.5% on the properties of a resinous sealant (SR) and a chemically activated ionomeric sealant (SI). The effect of the incorporation of CLX on the roughness of the materials was also evaluated. (BiosealÂ-control group), SRDC (Bioseal + 0.5% DC), SI (Riva ProtectÂ) and SIDC (Riva ProtectÂ) + 0.5% of DC). For an enamel caries induction, a microbiological model of S. mutans biofilm formation was used for five days, three blocks of each group for each experimental triplicate. The antimicrobial effect was evaluated by counting UFCs (colony forming units), dry weight analysis and confocal microscopy. To evaluate the demineralization, the blocks were analyzed by longitudinal microhardness of the enamel at 50 μm and 100 μm of the restoration margin. In addition, for each experimental group, test specimens from all groups were analyzed for their surface roughness pattern. Data were analyzed using ANOVA (two factors), with significance level of 5%. SR presented fewer CFUs when compared to SI (p = 0.004). Regarding dry weight, SR was lower than SI (p = 0.006). In the analysis of hardness at 50 μm, lower demineralization was observed for groups with ionomer when compared to those with resin (p <0.001), as well as between groups with CLX when compared to groups without CLX (p = 0.026). In the distance of 100 μm, the groups with ionomer showed a lower demineralization when compared to those with resin (p <0.001). The roughness in SI was superior to SR, both before (p = 0.032) and after exposure to cariogenic biofilm (p <0.001). In general, confocal laser microscopy (MCLS) data provided information consistent with the efficiency of CLX incorporation favoring the antimicrobial activity of resinous sealants when compared to ionomeric sealants. The ionomeric materials have a higher anticaryeffect, however the incorporation of DC seems to be more effective and necessary when using resinous sealants.

Os selantes sÃo materiais adesivos aplicados em cicatrÃculas e fissuras para prevenir in loco o inÃcio do processo de cÃrie ou interromper sua progressÃo. A clorexidina (CLX) Ã um agente antimicrobiano de amplo espectro, cuja incorporaÃÃo tem sido testada em diversos materiais odontolÃgicos. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito in vitro da incorporaÃÃo de digluconato de clorexidina (DC) a 0,5% sobre as propriedades anticÃrie de um selante resinoso (SR) e um selante ionomÃrico quimicamente ativado (SI). O efeito da incorporaÃÃo de CLX na rugosidade dos materiais tambÃm foi avaliado. Blocos de esmalte dentÃrio bovino (8x8x4 mm) com preparos cavitÃrios foram restaurados utilizando o selante, de acordo com os grupos: SR (BiosealÂ-grupo…

Advisors/Committee Members: Pierre BasÃlio Almeida Fechine, DÃbora Castelo Branco de Souza Collares Maia, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues.

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Ãcido anacÃrdico à um composto extraÃdo do lÃquido da castanha de caju (LCC) e tem emergido como um composto promissor devido a sua variedade de propriedades biolÃgicas. Este estudo està dividido em trÃs capÃtulos, cujos objetivos foram: capÃtulo 1) investigar a atividade antibacteriana de uma emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos, extraÃdos do LCC, e de uma emulsÃo sintÃtica do Ãcido anacÃrdico, em culturas planctÃnicas de Streptococcus mutans, bem como avaliar sua citotoxicidade in vitro; capÃtulo 2) avaliar o efeito de diferentes concentraÃÃes de uma emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos extraÃdos do LCC em biofilmes maduros de S. mutans; e capÃtulo 3) avaliar o efeito da aplicaÃÃo Ãnica versus aplicaÃÃo duas vezes ao dia de diferentes concentraÃÃes de uma emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos em biofilmes de S. mutans. A atividade antibacteriana das emulsÃes foi determinada atravÃs da concentraÃÃo inibitÃria mÃnima (CIM) e concentraÃÃo bactericida mÃnima (CBM), e a citotoxicidade foi mensurada atravÃs do reagente CellTiter Blue (capÃtulo 1). Biofilmes foram crescidos em discos de hidroxiapatita imersos em caldo de peptona caseÃna soja e extrato de levedura com 1% sacarose por cinco dias. Biofilmes foram tratados com a emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos por um minuto no Ãltimo dia do experimento para avaliar seu efeito em biofilme maduro; viabilidade bacteriana e mensuraÃÃo de peso seco foram realizadas (capÃtulo 2). Diferentes concentraÃÃes da emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos foram aplicadas apenas no Ãltimo dia do experimento e duas vezes ao dia durante cinco dias para avaliar o efeito de diferentes aplicaÃÃes da emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos em biofilmes de S. mutans; viabilidade bacteriana, mensuraÃÃo de peso seco e quantificaÃÃo de polissacarÃdeos foram realizados (capÃtulo 3). A CIM e CBM da emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos (LCC) em cultura planctÃnica foram 0,48 μg/ml; e a CIM da emulsÃo sintÃtica do Ãcido anacÃrdico foi 4,38 μg/ml, mas sua CBM nÃo pÃde ser determinada (> 3.200 μg/ml) (capÃtulo 1). Observou-se uma reduÃÃo significante na viabilidade bacteriana de biofilmes maduros apÃs tratamento com as concentraÃÃes da emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos, mas estas nÃo alteraram o peso seco do biofilme (capÃtulo 2). O tratamento diÃrio com diferentes concentraÃÃes da emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos reduziu a viabilidade bacteriana do biofilme e modificou os nÃveis de polissacarÃdeos intracelular e extracelulares (capÃtulo 3). Pode-se concluir que a emulsÃo de Ãcidos anacÃrdicos apresenta-se como um promissor agente antibacteriano, tendo a capacidade de reduzir a viabilidade do S. mutans tanto em culturas planctÃnicas quanto em biofilmes.

Anacardic acid is an extract from processing of cashew nut shell liquid (CNSL) and it has been recognized to have several biological activities. This study is divided into three chapters, whose aims were: chapter 1) to investigate the antibacterial activity of an anacardic acids emulsion, from CNSL, and a synthetic emulsion of anacardic acid on planktonic cultures of S. mutans as well as to…

Advisors/Committee Members: Iriana Carla Junqueira Zanin, Josà Jeovà Siebra Moreira Neto, Maria Izabel Florindo Guedes, Gislaine Cristina Padovani, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues.

▼ Early childhood caries (ECC) is considered a serious public health issue among children all over the world. However, many aspects should be explored about the oral microbiota related to the ECC progression and how the bacterial community modifies according to the dentine lesion activity. This thesis, composed by two chapters, aimed to investigate and quantify with quantitative polymerase chain reaction (qPCR) the following bacteria Actinomyces naeslundii, Bifidobacterium spp., Lactobacillus acidophilus, Streptococcus gordonii, Streptococcus mutans, as well as members of the groups Lactobacillus casei and Mitis on biofilm from pre-school children with different stages of early childhood caries progression (Chapter 1) and on active and inactive dentine carious lesions (Chapter 2), and also to verify the association of these microorganisms on the process of health or disease. The sample consisted on preschool children aged between 2 and 5 years from nurseries and public preeschools in Fortaleza-CE. The children were examined for caries diagnosis with ICDAS II index (International Caries Detection Assessment System), and the Nyvad criteria, in order to evaluate prevalence and caries activity. The supragingival biofilm collection was taken from 75 children, who were divided in three groups according to the ICDAS II: CF (caries free) (n=20), ECL (presence of enamel caries lesion) (n=17) and DCL (presence of dentine caries lesion) (n=38). Samples of carious dentine were collected under rubber dam isolation of 56 lesions of dentine affected by caries, being 17 inactive and 39 active. The DNA of all the collected samples was extracted and purified, then tested for the presence of the formerly mentioned bacterial species/groups through qPCR. The quantity of bacteria was compared through the Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests. Besides, the association between the presence of bacteria and ECC was analyzed through the Chi-square test, with a 5% significance level and the multiple logistic regression was applied. Bacteria from the group L. casei and L. acidophilus presented low detection on biofilm of all evaluated groups. The presence of S. mutans and Bifidobacterium spp. showed a strong association with dental caries progression on the biofilm from children with dentine lesions with odds ratio of 21,5 and 5,9; respectively. On active dentine lesions, concentrations of Bifidobacterium spp. and species from the Lactobacillus casei group were significantly higher when compared to the inactive lesions (p<0.05). The levels of Actinomyces naeslundii, Streptococcus gordonni and species from Mitis group were not significantly different among biofilm groups as well as comparing dentine lesions. In conclusion, the microbial profile from biofilm samples presented differences on the proportion of acidogenic and aciduric bacteria with dental caries progression. The presence of Bifidobacterium spp. and S. mutans presented a strong association with the development of the more advanced stages of ECC. Regarding the activity of dentine… Advisors/Committee Members: Maria Izabel Florindo Guedes, Nadia Accioly Pinto Nogueira, Francisco Cesar Barroso Barbosa, Paula Borges Jacques, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues.

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A cÃrie precoce da infÃncia (CPI) à caracterizada pela presenÃa de uma ou mais lesÃes em superfÃcie dentÃria de crianÃas menores de 6 anos de idade, sendo considerada um problema de saÃde pÃblica. Streptococcus mutans (SM) à considerado o principal agente etiolÃgico da doenÃa e possui vÃrios atributos de virulÃncia que permitem sua sobrevivÃncia na cavidade oral e, portanto, sua seleÃÃo em situaÃÃes de estresse nesse ambiente. Neste contexto, este trabalho teve por objetivos: (a) padronizar um mÃtodo de extraÃÃo e purificaÃÃo de RNA total para viabilizar estudos de expressÃo gÃnica bacteriana de lesÃes de cÃrie dentinÃria in vivo (capÃtulo 1); (b) identificar e quantificar SM metabolicamente ativo e analisar a expressÃo dos genes de virulÃncia atpD, fabM, nox, pdhA e aguD em lesÃes dentinÃrias ativas e inativas (capÃtulo 2). Foi realizada a coleta de 29 amostras de dentina cariada ativa e de 16 amostras de lesÃes dentinÃrias inativas de crianÃas com CPI. As amostras foram submetidas à extraÃÃo e purificaÃÃo do RNA total por um mÃtodo padronizado, com base no uso de lise mecÃnica e kit de extraÃÃo comercial e, em seguida, submetidas Ãs reaÃÃes de transcriÃÃo reversa (RT) para obtenÃÃo do DNA complementar (cDNA). Com o intuito de comprovaÃÃo da especificidade dos primers para os genes de virulÃncia de SM em amostras in vivo, 06 amostras de cDNA foram amplificadas e submetidas ao sequenciamento de Sanger para cada primer. ApÃs verificaÃÃo da especificidade, reaÃÃes em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real da transcriÃÃo reversa (RT-qPCR) foram executadas para todas as amostras. Os resultados obtidos mostraram que o RNA bacteriano pÃde ser extraÃdo em adequada quantidade e qualidade pelo protocolo padronizado, viabilizando seu uso em estudos de expressÃo de genes bacterianos em dentina cariada (CapÃtulo 01). Os resultados da RT-qPCR mostraram que, apesar da baixa quantificaÃÃo em relaÃÃo aos estreptococos e bactÃrias totais, SM viÃveis foram detectados com quantificaÃÃo semelhante em lesÃes ativas e inativas (p>0.05). Apesar disso, maior expressÃo dos genes de virulÃncia pdhA e aguD foi detectada nas lesÃes inativas (p≤0,05) (CapÃtulo 02). Concluiu-se que, apÃs padronizaÃÃo de uma tÃcnica eficaz de extraÃÃo de RNA, reaÃÃes de RT-qPCR foram executadas com eficiÃncia para identificaÃÃo, quantificaÃÃo e expressÃo gÃnica de SM em amostras de dentina humana cariada. SM estavam viÃveis nos dois grupos de lesÃes, porÃm sà nas lesÃes dentinÃrias inativas mostraram maior expressÃo dos genes pdhA e aguD, provavelmente para viabilizar sua atividade metabÃlica nas condiÃÃes menos favorÃveis à sua sobrevivÃncia, inerentes a este substrato.

Early childhood caries (ECC) is characterized by the presence of one or more lesions on dental surface of children under 6 years old, being considered a public health issue. Streptococcus mutans (SM) is considered the main etiologic agent of the disease and has several virulence features that allow its survival in the oral cavity and, therefore, its selection under environmental…

Advisors/Committee Members: Nadia Accioly Pinto Nogueira, Marlise InÃs Klein, Maria Izabel Florindo Guedes, Rodrigo Maranguape Silva da Cunha, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues.

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A terapia fotodinÃmica antimicrobiana (TFDA) e o plasma de baixa temperatura e pressÃo (PBTP) surgem como tratamentos coadjuvantes à terapia endodÃntica convencional, diante do surgimento de cepas resistentes e complexidades anatÃmicas do canal radicular. Esse estudo foi dividido em 4 capÃtulos, cujos objetivos foram: CapÃtulo 1) avaliar o efeito da TFDA mediada pelo TBO em diferentes concentraÃÃes e tempos de exposiÃÃo à luz na produÃÃo de EROS e a viabilidade celular em culturas planctÃnicas de E. faecalis. CapÃtulo 2) avaliar os efeitos da TFDA realizada com AOT e fonte de luz vermelha, em trÃs diferentes tempos de exposiÃÃo na viabilidade de biofilmes maduros de E. faecalis e C. albicans. CapÃtulo 3) avaliar os efeitos do PBTP, em trÃs diferentes tempos de exposiÃÃo, na viabilidade de biofilmes maduros de E. faecalis. CapÃtulo 4) comparar o efeito da TFDA e do PBTP em canais radiculares infectados com biofilmes maduros de E. Faecalis, nos mesmos tempos de exposiÃÃo para as duas terapias. Nos capÃtulos 2 e 3, os biofilmes foram crescidos em discos de hidroxiapatita, imersos em Brain-heart infusion broth (E. faecalis por 15 dias) ou RPMI 1640 medium (C. albicans por 72 horas). Os biofilmes maduros foram submetidos à TFDA mediada pelo fotossentitizador AOT (100 μg/mL) e fonte de luz vermelha (LumaCareÂ, 630 nm, 2 mm de distÃncia), com densidades de energia de 118,9 J/cm2, (1 min) 237,8 J/cm2 (2 min) e 594,5 J/cm2 (5 min) (capÃtulo 2). Nas mesmas condiÃÃes, biofilmes maduros de E. faecalis foram tambÃm submetidos à aÃÃo do PBTP (capÃtulo 3). Tanto a TFDA como PBTP apresentaram-se eficazes como agentes antimicrobianos em um efeito dose- dependente. No capÃtulo 4, 96 dentes unirradiculares foram preparados com instrumentaÃÃo mecanizada. Os espÃcimes foram divididos em 8 grupos: 1-3 â dentes submetidos à TFDA; 4-6 dentes submetidos ao PBTP e dois grupos-controle â hipoclorito de sÃdio a 2,5% (positivo) e dentes sem tratamento (negativo). Os dados foram tabulados e tratados estatisticamente pelo mÃtodo ANOVA (p<0,05). Houve uma reduÃÃo da microbiota em todos os grupos de tratamento, com diferenÃa estatisticamente significante entre os grupos tratados pelo PBTP e TFDA, no tempo de exposiÃÃo de 5 minutos. Conclui-se entÃo que a TFDA e o PBTP, nos parÃmetros testados, apresentaram atividade antimicrobiana eficaz contra os biofilmes estudados, nos dois modelos in vitro apresentados.

Photodynamic Antimicrobial Therapy (PACT) and Low Pressure Cold Plasma emerged as an effective adjunctive procedure to conventional endodontic treatment, especially in case of persistent infection. This study was divided into four chapters, which objectives were: Chapter 1) investigate the antibacterial effects of photodynamic antimicrobial chemotherapy (PACT), with different concentrations of toluidine blue-O (TBO), at three different exposure times, over suspensions of Enterococcus faecalis, using a fluorescence probe â Dihydrorhodamine 1, 2,3 for detecting the release of ROS. Chapter 2) study the antimicrobial effect of PACT mediated…

Advisors/Committee Members: Nadia Accioly Pinto Nogueira, MÃnica Sampaio do Vale, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Flaviana Bombarda de Andrade, Simone Duarte, Danna Mota Moreira.

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A aplicaÃÃo da Terapia FotodinÃmica Antimicrobiana - TFA na Odontologia surge como um tratamento eficaz na reduÃÃo das populaÃÃes microbianas presentes nos biofilmes orais e nas lesÃes de cÃrie dental. Nesse contexto, os objetivos desse trabalho sÃo: a)comparar o potencial antimicrobiano da TFA utilizando diferentes fotossensibilizadores e determinar a capacidade de produÃÃo de oxigÃnio singlete para cada um deles (capÃtulo 1); b) determinar o grau de penetraÃÃo do corante azul de orto toluidina em dentina desmineralizada in vitro e in situ utilizando a microscopia confocal Raman (capÃtulo 2); c) avaliar o potencial antimicrobiano da TFA e sua habilidade de alterar a expressÃo dos genes gtfB, gtfC, gbpB e luxSem biofilmes orais de Streptococcus mutans formados in vitro (capÃtulo 3); d) investigar, atravÃs de um ensaio clÃnico, a performance da TFA utilizando a associaÃÃo do azul de orto toluidina e um diodo emissor de luz (capÃtulo 4). Como abordagens metodolÃgicas foram realizados estudos in vitro, in situ e um ensaio clÃnico. Como resultados, observou-se que o azul de orto toluidina foi o Ãnico fotossensibilizador que reduziu significantemente as contagens de S. mutans (p<0,05). Contudo, a geraÃÃo de oxigÃnio singlete nÃo teve relaÃÃo direta com a atividade bactericida da TFA (capÃtulo 1). Hà difusÃo do azul de orto toluidina em dentina sadia e desmineralizada in vitro e in situ, embora o grau de desmineralizaÃÃo nÃo tenha alterado o nÃvel de penetraÃÃo do fotossensibilizador (capÃtulo 2). Embora a TFA tenha sido efetiva na morte de biofilmes de S. mutans formados in vitro, a alteraÃÃo nos genes de virulÃncia foi somente observada para luxS, um gene relacionado ao estresse oxidativo (capÃtulo 3). Finalmente, os resultados do ensaio clÃnico demostraram que lesÃes de cÃrie dentinÃria profundas apresentam diminuiÃÃo na microbiota cariogÃnica quando tratadas com a TFA (capÃtulo 4). Em resumo, a terapia antimicrobiana fotodinÃmica à efetiva em cultura planctÃnica e biofilmes de S. mutans, o fototossensibilizador utilizado à capaz de penetrar em dentina desmineralizada in vitro e in situ, a TFA altera a expressÃo de gene relacionado à formaÃÃo de biofilme e reduz significativamente a microbiota in vivo. Contudo protocolos clÃnicos seguros devem ser estabelecidos para que sua utilizaÃÃo clÃnica possa ser indicada.

The  application  of  Antimicrobial  Photodynamic  Therapy   (PACT)  in  dentistry  emerged  as  an  effective  treatment  in  reducing  microbial  populations  present  in  oral  biofilms Âand Âdental Âcaries Âlesions. ÂIn Âthis Âcontext, Âthe Âobjectives Âof Âthis Âwork Âare: Âa) Âto  compare  the  antimicrobial  effect  of  photodynamic  therapy  using  different  photosensitizers  and  evaluate  the  production  of  singlet  oxygen  for  each  of  them  (chapter Â1), Âb) Âto Âdetermine Âthe Âpenetration Âdegree Âof Âtoluidine Âblue Âortho Âdye Â(TBO)  in Âin Âvitro Âand Âin Âsitu Âdemineralized Âdentin Âusing Âconfocal ÂRaman Âmicrospectroscopy  (chapter Â…

Advisors/Committee Members: Nadia Accioly Pinto Nogueira, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, MÃrcia Maria de Negreiros Pinto Rocha, Cristiane Tomaz Rocha, Rafael Nobrega Stipp.

▼ A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) surge como um tratamento alternativo ao uso de antimicrobianos tradicionais diante da emergência de cepas resistentes a estes agentes. Este estudo está dividido em três capítulos, cujos objetivos foram: Capítulo 1) Comparar o efeito antimicrobiano da TFDA realizada com o fotossensibilizador azul de orto-toluidina (TBO) e duas diferentes fontes de luz vermelha {Laserbeam (LB) ou LumaCare (LC)} em biofilmes maduros de Streptococcus mutans; Capítulo 2) Quantificar as espécies reativas de oxigênio (ERO) encontradas a nível intracelular em biofilmes de S. mutans como resultado da TFDA realizada com TBO e a fonte de luz vermelha LC; e Capítulo 3) Avaliar os efeitos da TFDA realizada com TBO e a fonte de luz vermelha LC na viabilidade microbiana, na matriz de polissacarídeos extracelulares (PEC) e na topografia de biofilmes de S. mutans maduros e em formação. Biofilmes foram crescidos em discos de hidroxiapatita imersos em caldo de peptona caseína soja e extrato de levedura com 1% de sacarose por cinco dias. No capítulo 1, biofilmes maduros foram submetidos à TFDA utilizando o fotossensibilizador TBO (100 g/mL) e duas fontes de luz diferentes: LB (56,6 J/cm2) e LC (56,6 J/cm2; 158,5 J/cm2; 317,0 J/cm2; 475,6 J/cm2). No capítulo 2, os biofilmes foram expostos a terapia usando o LC nas densidades de energia 211.37 J/cm2 e 422.74 J/cm, e a produção de ERO como consequência da terapia foi determinada utilizando o marcador dihidrorodamina 123. No capítulo 3, as mesmas densidades de energia do capítulo 2 (211.37 J/cm2 e 422.74 J/cm2) foram testadas em biofilmes maduros e em formação. Verificamos que não existe diferença na redução da viabilidade bacteriana quando LB e LC são utilizados na mesma dose de energia, porém LC é superior nas exposições 317,0 J/cm2 e 475,6 J/cm2 (capítulo 1). A TFDA gerou 3x mais ERO que o grupo controle negativo. A TFDA nas densidades de energia 211.37 J/cm2 e 422.74 J/cm2 obteve reduções da viabilidade bacteriana de 2 a 5 logs, respectivamente, em biofilmes maduros, e de 6 a 6,5 logs em biofilmes em formação. A TFDA aplicada sobre biofilmes em formação, além de promover redução da viabilidade bacteriana, também reduziu a formação de PEC e o número de conglomerados bacterianos, além de promover a perda de estruturas de conexão dos PEC. (capítulo 3). Conclui-se que TFDA, nos parâmetros utilizados, apresenta-se como uma promissora abordagem terapêutica na inibição da formação de biofilmes de S. mutans e na inativação de biofilmes já estabelecidos. Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Iriana Carla Junqueira Zanin, Francisco Cesar Barroso Barbosa, Simone Duarte, Marco Aurelio Benini Paschoal.

▼ Nos Ãltimos anos, diversos estudos tÃm considerado os fungos do gÃnero Trichosporon como patÃgenos oportunistas emergentes em pacientes imunocomprometidos. Embora a dinÃmica nÃo seja bem compreendida, sabe-se que eventos associados à formaÃÃo de biofilme nestes fungos tÃm papel importante no processo infeccioso. Desta forma, o presente estudo analisou aspectos morfofisiolÃgicos dos biofilmes produzidos por T. inkin, bem como o papel de um inibidor de proteases sobre as cÃlulas e biofilmes de T. asahii e T. inkin. Na primeira parte da pesquisa, foi investigada a formaÃÃo de biofilmes de T. inkin (n=7) nos meios RPMI, Caldo CLED e Caldo Sabouraud, em pH 5,5 e pH 7,0, com inÃculos iniciais de 1x104, 1x105 e 1x106 cÃlulas/mL, incubados a 28ÂC e 35ÂC, de forma estÃtica ou agitaÃÃo a 80 rpm, por 48h. Os biofilmes formados foram avaliados quanto à biomassa e atividade metabÃlica, contagem de cÃlulas viÃveis, quantificaÃÃo de Ãcidos nuclÃicos e atividade proteÃsica. Investigou-se ainda a sensibilidade dos biofilmes frente à anfotericina B, caspofungina, fluconazol, itraconazol e voriconazol. Para avaliaÃÃo da atividade inibitÃria do ritonavir sobre a estrutura e o funcionamento dos biofilmes de T. asahii e T. inkin, biofilmes foram formados na presenÃa de ritonavir e avaliados quanto à adesÃo celular, desenvolvimento estrutural e atividade proteÃsica. Adicionalmente, o ritonavir foi avaliado sobre biofilmes maduros, composiÃÃo de matriz e alteraÃÃes estruturais. CÃlulas planctÃnicas de T. asahii e T. inkin (n=2 cada) tambÃm foram investigadas quanto à sensibilidade ao ritonavir isolado e em combinaÃÃo com antifÃngicos. Por fim, cÃlulas planctÃnicas foram prÃ-expostas ao ritonavir e avaliadas quanto à capacidade de formaÃÃo de biofilmes, sensibilidade a antifÃngicos e alteraÃÃo na hidrofobicidade de suas superfÃcies. A produÃÃo de biofilmes foi mÃxima em RPMI pH 7,0, em inÃculo de 1x106 cÃlulas/mL, e incubaÃÃo a 35ÂC, sob agitaÃÃo. Os biofilmes produzidos nessas condiÃÃes sÃo formados por comunidades dinÃmicas, associadas a uma matriz extracelular, e mostram aumento da atividade metabÃlica e biomassa ao longo do tempo, atingindo estabilidade apÃs 48 h de cultivo. Durante o desenvolvimento dos biofilmes, ocorre liberaÃÃo de cÃlulas viÃveis e Ãcidos nuclÃicos para o ambiente circundante. Os biofilmes de T. inkin produzem mais proteases e toleram maiores concentraÃÃes de antifÃngicos que as cÃlulas planctÃnicas relacionadas. Dada à presenÃa de proteases durante o desenvolvimento do biofilme de T. inkin, foi hipotetizado que essas enzimas poderiam ser consideradas alvos importantes no controle dos biofilmes. Os resultados mostraram que o ritonavir diminuiu a adesÃo celular e formaÃÃo de biofilmes maduros, alÃm de reduzir a atividade proteÃsica e alterar a estrutura dos biofilmes. O ritonavir nÃo interferiu na atividade metabÃlica de biofilmes maduros, mas alterou a composiÃÃo da matriz extracelular dos biofilmes, as quais apresentaram diferentes espectros protÃicos em comparaÃÃo com o grupo controle. O ritonavir inibiu o… Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Cristiane Yumi Koga-Ito, Lucas Pereira de Alencar, DÃbora Castelo Branco de Souza Collares Maia, Rossana de Aguiar Cordeiro.

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Early Childhood caries (ECC) is the most prevalent disease in children between three and five years old. The use of index with technical advantages over historically used, such as International Caries Detection and Assessment System (ICDAS II), it is imperative for the management and early diagnosis of CPI. The CPI is avoidable and the topical application of fluoride is recommended as its progression control measure. The objectives of this thesis, formatted in two chapters were: 1) to investigate the correlation between dietary habits, oral hygiene and socioeconomic factors and the development stages of CPI. 2) conduct a systematic review of the literature on the effectiveness of professional topical fluoride application in control of CPI. In the first study, 163 children were examined according to the criteria of ICDAS II and divided into three groups: caries-free (n = 59), enamel caries lesions (n = 55) and dentin caries lesions (n = 49). The presence of clinically visible plaque was recorded, as well as the daily frequency of meals which contain sugar. Social factors were assessed by a questionnaire sent to those responsible. Data were analyzed by chi-square test, followed by multiple logistic regressions, considering p <0.05 and confidence interval = 95%. To the second proposition of the thesis, we proceeded to a systematic review of the literature held in electronic databases: Google Scholar, LILACS, IBECS, MEDLINE, Cochrane Library, SciELO and PubMed, from August 2015 to March 2016. The descriptors used in Portuguese and English were: tooth decay; child; primary tooth; efficacy and topical fluorides. Nine studies were critically evaluated for meeting the selection criteria. Of this total, five were excluded, resulting in four articles included in this systematic review qualitatively evaluated under the criteria of the PEDro scale (Physioterapy Evidence Database) and CONSORT (Consolidated Standards of Reporting Trials). Study 1 showed that age (OR = 3.67), use of dental services (OR = 3.44), motherâs literacy (OR = 4.55) and daily consumption of sugar (OR = 2.58) were associated significant with carious lesions in enamel. Age (OR = 3.26), visible plaque index (OR = 3.49) and frequency of brushing (OR = 4.55) were significantly associated with carious lesions in dentin. In the review, one trial indicated that professional application of fluoride varnish used in children significantly reduced the average increase of the group, but there is no agreement observed in other trials evaluated in this review. The conclusions is that cariogenic diet, hygiene and socioeconomic factors are associated with dental caries and caries prevalence increased with age of the individual, its percentage of visible dental plaque, as well as higher sugar consumption to six daily servings, the care provided by unschooled mothers and difficulty in accessing dental services. There is no scientific evidence attesting to the effectiveness of professional topical fluoride application in control of CPI.

A cÃrie da primeira infÃncia (CPI) Ã…

Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Juliana Paiva Marques Lima, Ana Karine Macedo Teixeira, Beatriz GonÃalves Neves, Renata Mota Rodrigues Bitu Sousa.

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The Low temperature plasma is a promising technology that has being studied in dentistry for its various properties, among them, for their ability to destroy bacteria present in mature biofilm and also destroying the polymeric matrix of oral biofilms. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial effect of argon plasma on oral biofilms formed in situ and also verify if this treatment damages the structure of the treated enamel. For that, twenty-two volunteers used palatine intraoral devices containing 6 to bovine enamel slabs that were dripped sucrose 10 times a day with 10% sucrose. The intraoral period was 7 days. At the 7th day, enamel slabs were treated for 5 minutes with plasma, argon flow, 0.12% chlorhexidine, or 0.89% NaCl solution. Thus, biofilms samples were collected, weighed, serial diluted and plated in culture medium for the growth of total microorganisms, total streptococci, mutans streptococci and lactobacilli. In order to analyze whether the treatments damaged the enamel structure, the slabs were analyzed by scanning electron microscopy (SEM) and Raman spectroscopy. Low temperature plasma treatment showed a significant reduction in the viability of the total microorganisms (p <0.001), total streptococcus (p = 0.037) and mutans streptococci (p = 0.004). Argon flow also significantly reduced the mutans streptococci counts. The plasma treatment did not influence on the viability of the lactobacilli under the conditions tested (p = 0.497). SEM revealed smooth and homogeneous regions on the enamel surface, unobserved topographical differences between the glazes in biofilms subjected to different treatments. In Raman spectroscopy, we identified four major bands present in the inorganic phase: 324 (V1), 582 (V2), 960 (V3) e 1045 (V4) cm-1 and other 4 identified in the organic layer 1448 (V5), 1465 (V6), 1653 (V7) 2943(V8) cm-1. No statistical differences in the Raman spectra were observed for enamel of different treatments. In conclusion, the plasma was effective in reducing viable bacteria present in mature oral biofilms produced in situ and not alter in the enamel surface treated biofilms.

O plasma de baixa temperatura à uma tecnologia promissora que vem sendo estudada na odontologia por suas vÃrias propriedades, dentre elas, por sua capacidade de destruir bactÃrias presentes em biofilme maduro destruindo a matriz do biofilme oral. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial antimicrobiano do plasma de argÃnio de baixa temperatura em biofilmes orais formados in situ e verificar se o tratamento proposto danifica a estrutura do esmalte tratado. Para tanto, vinte e dois voluntÃrios utilizaram dispositivos intraorais palatinos contendo 6 blocos de esmalte bovino que foram gotejados sacarose 10 vezes ao dia uma soluÃÃo de sacarose a 10%, durante 7 dias. Ao final do perÃodo intraoral, os biofilmes formados sobre os blocos de esmalte receberam tratamento durante 5 minutos com plasma de argÃnio, gÃs argÃnio, clorexidina a 0,12%, ou soluÃÃo salina de NaCl a 0,89%. As amostras dos biofilmes foram…

Advisors/Committee Members: Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Thereza Cristina Farias Botelho Dantas, Francisco Cesar Barroso Barbosa, Juliana Paiva Marques Lima, Iriana Carla Junqueira Zanin.

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A aplicaÃÃo da nanotecnologia na Odontologia pode promover a otimizaÃÃo de caracterÃsticas estÃticas e mecÃnicas de materiais odontolÃgicos bem como propiciar uma aÃÃo anticÃrie pelo menor acÃmulo de biofilme oral sobre estes materiais e liberaÃÃo de compostos antimicrobianos ou remineralizantes. Os objetivos de cada capÃtulo sÃo: 1) revisar a literatura concernente ao uso de nanopartÃculas em materiais odontolÃgicos com implicaÃÃes diretas ou indiretas no controle de lesÃes de cÃrie (capÃtulo 1); 2) investigar in vitro a liberaÃÃo de flÃor e o potencial inibitÃrio de cimento ortodÃntico nanoparticulado fluoretado na desmineralizaÃÃo do esmalte (capÃtulo 2); 3) estudar o efeito in situ de resina composta fluoretada contendo nanopartÃculas na liberaÃÃo de flÃor e na capacidade inibitÃria da desmineralizaÃÃo em esmalte (capÃtulo 3); 4) avaliar o efeito da incorporaÃÃo de nanopartÃculas de prata (NAg) e fosfato de cÃlcio amorfo (NACP) em sistema adesivo comercial (capÃtulo 4); 5) avaliar o efeito da incorporaÃÃo de monÃmero associado a quaternÃrio de amÃnio (QADM), NAg e NACP em sistema adesivo experimental (capÃtulo 5) e 6) estudar o efeito in situ de resina composta contendo NACP no biofilme oral e em lesÃes de cÃries em esmalte (capÃtulo 6). Como abordagens metodolÃgicas foram realizadas: uma revisÃo de literatura, 3 estudos in vitro com induÃÃo de cÃrie por modelo microbiolÃgico e 2 estudos in situ relacionados aos objetivos citados. Como resultados, o desenvolvimento de materiais nanomÃtricos anticÃrie ainda necessita de um melhor conhecimento dos mecanismos de aÃÃo, seguranÃa e eficÃcia das nanopartÃculas (capÃtulo 1). A liberaÃÃo de flÃor e o potencial inibitÃrio na desmineralizaÃÃo do esmalte de cimento ortodÃntico nanoparticulado fluoretado foi inferior ao apresentado por cimento de ionÃmero de vidro modificado por resina (capÃtulo 2). Resina composta nanoparticulada apresentou pequena atividade anticÃrie in situ sem detrimento de sua lisura de superfÃcie (capÃtulo 3). A inclusÃo de NAg e NACP em sistema adesivo apresentou significativo efeito antimicrobiano in vitro sem diminuiÃÃo da resistÃncia de uniÃo quando comparado ao controle (capÃtulo 4). A atividade metabÃlica, produÃÃo de Ãcido lÃtico e nÃmero de unidades formadoras de colÃnias foram menores em biofilmes formados sobre sistemas adesivos experimentais contendo QADM, NAg e NACP sem diminuiÃÃo da resistÃncia de uniÃo quando comparado ao controle (capÃtulo 5). CompÃsito com NACP liberou mais cÃlcio e fÃsforo em biofilme cariogÃnico formado in situ e propiciou menores lesÃes de cÃrie em esmalte ao redor das restauraÃÃes que o compÃsito controle (capÃtulo 6). Em resumo, a presenÃa de nanopartÃculas de carga na composiÃÃo bÃsica de materiais odontolÃgicos nÃo garante por si sà uma atividade anticÃrie efetiva. A incorporaÃÃo de QADM, NAg e NACP em materiais odontolÃgicos pode permitir a promoÃÃo de um efeito anticÃrie, apresentando-se como uma promissora abordagem no desenvolvimento de materiais restauradores diretos.

The application of nanotechnology in…

Advisors/Committee Members: SÃrgio Lima Santiago, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Haroldo CÃsar Pinheiro BeltrÃo, MarinÃs Nobre dos Santos UchÃa, Alessandro Dourado Loguercio.

▼ O aumento gengival à uma condiÃÃo bucal cuja origem à atribuÃda à interaÃÃo de mÃltiplos fatores, dentre eles susceptibilidade genÃtica, influÃncia de hormÃnios na puberdade e na gravidez, uso de medicamentos como Ãs fenitoÃna, ciclosporina, diltiazen e anfetamina, aÃÃo das citocinas prÃ-inflamatÃrias como o TNF-α, e atà causas neoplÃsicas. Embora o acÃmulo excessivo da placa dentÃria e a inflamaÃÃo crÃnica gengival, tambÃm, estejam relacionados como provÃveis fatores predisponentes ao aumento gengival, à controverso se a inflamaÃÃo prÃ-existente estimula o crescimento gengival por dificultar a higienizaÃÃo dentÃria, ocasiona o acÃmulo da placa bacteriana e conseqÃente processo inflamatÃrio, predispondo o indivÃduo à destrutiva doenÃa do periodonto. Desta forma, o presente estudo teve o objetivo de avaliar se a gengivite està presente em todos os pacientes com aumento gengival, e se a evoluÃÃo do processo inflamatÃrio responde satisfatoriamente ao tratamento com a clorexidina. Quatorze pacientes portadores de crescimento gengival, que se submeteram voluntariamente ao tratamento cirÃrgico, aceitaram em participar do estudo. As primeiras biÃpsias gengivais foram obtidas dos pacientes, antes da realizaÃÃo da gengivectomia, para estudo do processo inflamatÃrio gengival pelos exames histolÃgico (H&E) e para a avaliaÃÃo da composiÃÃo das cÃlulas mononucleares da inflamaÃÃo, pelo mÃtodo imunohistoquÃmico de Peroxidase-Anti-Peroxidase (PAP), utilizando anticorpos monoclonais para os marcadores celulares CD43 (linfÃcitos T), CD20 (cÃlulas B) e CD68 (macrÃfagos). Em seguida os pacientes foram instruidos a realizar bochechos com clorexidina a 0,12% (sem Ãlcool), 30 min apÃs a escovaÃÃo durante 30 segundos, por dez dias, pela manhà e noite. SubseqÃentemente, biÃpsias gengivais foram obtidas do tecido gengival removido durante o tratamento cirÃrgico, para novas avaliaÃÃes histolÃgica e imunohistoquÃmicas. Os resultados obtidos foram os seguintes: i) todos os pacientes com aumento gengival apresentaram o processo inflamatÃrio gengival em evoluÃÃo, num grau histolÃgico de intensidade variando de 1 a 3; ii) o processo inflamatÃrio revelou a presenÃa de cÃlulas T (5,7  2,07 por 6 campos microscÃpicos), cÃlulas B (9,0  4,64) e macrÃfagos (62,6  16,44); e iii) o tratamento com a clorexidina resultou numa reduÃÃo histolÃgica da inflamaÃÃo em 59% dos pacientes, mas nÃo alterou o quadro em quatro pacientes (29%), enquanto que dois pacientes (14%) apresentaram um aumento do processo inflamatÃrio. ApÃs tratamento com a clorexidina, evidenciou-se uma reduÃÃo de ordem 40% dos macrÃfagos no tecido gengival (40,5  9,15; p=0.05), com uma moderada alteraÃÃo dos valores das cÃlulas T (8,25  1,71) e B (12,75  6,99), revelando uma diminuÃda participaÃÃo dos macrÃfagos no processo inflamatÃrio, e a possÃvel ativaÃÃo das defesas pelos linfÃcitos. Essas observaÃÃes sugerem que ao aumento gengival parece estar associada com a gengivite, e o tratamento com a clorexidina, em forma de bochechos diÃrios, pode ser eficaz na reduÃÃo do… Advisors/Committee Members: Talapala Govindaswamy Naidu, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, Rodrigo OtÃvio Cità CÃsar RÃgo, MÃrcia Maria de Negreiros Pinto Rocha.