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As infecções hospitalares causadas por diversos micro-organismos tem sido um enorme desafio enfrentado pela medicina desde sempre. Dentre esses, Staphylococcus aureus lidera todas as estatísticas tanto de infecções quanto de complicações e morbimortalidade. Tal capacidade é atribuída à expressão de um sofisticado sistema de defesa que confere, entre outros fatores, resistência até mesmo aos antibióticos mais eficazes. Manaus-AM não difere dos outros grandes centros do Brasil e do mundo, porque tem sido cada vez mais frequente a identificação de cepas resistentes, isoladas em hospitais da capital amazonense. Tendo em vista esse quadro extremamente preocupante para os serviços de saúde, é necessário (1) delinear a etiopatogenia das infecções hospitalares e a epidemiologia do S. aureus, (2) acompanhar a evolução dos mecanismos de resistência, para subsidiar as decisões médicas na definição do tratamento mais adequado e (3) criar um protocolo de identificação dos isolados e perfil de resistência em um período de no máximo 24 horas. O objetivo desse trabalho é relatar os achados epidemiológicos e do espectro de resistência do S. aureus, obtido mediante 2 estudos transversais com intervalo de cinco anos, envolvendo 113 pacientes, todos com cultura positiva para S. aureus e discutir a problemática da identificação em nível de espécie, bem como do mecanismo de resistência aos antibióticos. Observou-se um aumento da frequência de infecções por cepas MRSA de 47,3% para 96,6%, um resultado alarmante. Em conjunto esses resultados confirmam a necessidade de medidas urgentes de controle das cepas multi resistentes de S. aureus o que contribuirá de forma profilática às infecções hospitalares e também subsidiará o médico nos casos submetidos à antibioticoterapia.

Nosocomial infections caused by various microorganisms have been a huge challenge for the medicine. Among these microorganisms, Staphylococcus aureus leads all statistics of infections and also complications and morbimortality. This capability is attributed to the expression of a sophisticated defense system that provides resistance, among other factors, even to the most effective antibiotics. Manaus-AM does not differ from other large centers in Brazil and the world, because resistant strains have being identified frequently in this city. In a view of this worrying scenario for medicine, it is necessary to (1) delineate the pathogenesis of nosocomial infections and the epidemiology of S. aureus, (2) monitoring the development of resistance mechanisms, to support medical decisions in defining the treatment more adequate and (3) creating one protocol to the identification of isolates and resistance profile in a period up to 24 hours. This study describe the S. aureus resistance spectrum, obtained by two studies with an interval of five years, involving 113 patients and discuss the problem of the mechanism of the antibiotic resistance. We observed an increased frequency of infections caused by MRSA strains 47.3% to 96.6%. The increase of the MRSA strains is alarming. These…

Advisors/Committee Members: Astolfi Filho, Spartaco, 04109570115, cnpq.br%2F2699190136695057%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2699190136695057, Mota, Adolfo José da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226.

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Introdução: Pseudomonas aeruginosa resistente a múltiplos antimicrobianos (MDR, multidrug- resistance e PDR, pan-drug-resistance) é um agente etiológico frequente em infecções hospitalares, acometendo principalmente pacientes imunossuprimidos, tal como os internados em Unidade de Tratamento Intensivo (UTI). Objetivos: (1) Detectar P. aeruginosa resistente a múltiplos antimicrobianos em pacientes, profissionais e estruturas hospitalares; (2) identificar fatores genéticos que conferem resistência antimicrobiana, tais como integrons, cassetes gênicos e genes codificadores de enzimas β-lactamases; e (3) Detectar grupos clonais entre os isolados MDR/PDR. Metodologia: Foram realizadas coletas de amostras de pacientes, profissionais e estruturas de UTIs dos Hospitais 28 de Agosto (HPS28), Francisca Mendes (HUFM) e João Lúcio Pereira Machado (HPSJL), dos quais foram isoladas e identificadas cepas de P. aeruginosa por metodologia microbiológica clássica e molecular (amplificação e sequenciamento do gene 16s rRNA); O perfil de resistência aos antimicrobianos foi determinado pela técnica de disco-difusão; A pesquisa de grupos clonais foi determinada por similaridade genética entre os isolados MDR/PDR por PFGE; A detecção de genes que codificam resistência (integrons, cassetes gênicos e enzimas β-lactamases) foi realizada por PCR e confirmadas por RFLP e/ou sequenciamento genético. Resultados: Os fenótipos MDRs e PDR foram detectados em, respectivamente, 13,3% e 1,2% dos isolados estudados. Em 32 (38,5%) foram detectados integrons de classe 1. Destes, três (3,6%) também foram positivos para integrons de classe 2. A presença de intengrons nos isolados estudados demonstra correlação estatística (P<0,05) significativas com os fenótipos de resistência aos fármacos testados. Uma alta frequência de integrons não continha cassete gênico ou apenas carregava genes que codificavam resistência aos aminoglicosídeos estreptomicina e espectinomicina e ao trimetropin. A pesquisa de β-lactamases revelou a produção de enzimas KPC-2 (66,7%), VIM (8,3%) e OXA-50 (100%) por isolados de P. aeruginosa MDR/PDR. Dois grupos clonais foram detectados entre os isolados MDR/PDR estudados, indicando disseminação clonal inter e intrahospitalares. Conclusão: O isolamento de P. aeruginosa a partir dos hospitais estudados evidencia que esses patógenos, capazes de causar graves infecções nosocomiais, em especial, cepas MDR e PDR, estão se disseminando em ambiente hospitalar. Além disso, constata-se que a presença de elementos genéticos como integrons, cassetes gênicos e genes codificadores de β-lactamases estão correlacionadas aos fenótops de resistência nesses isolados, sendo, portanto, mecanismos genéticos potenciais capazes de conferir resistência antimicrobiana. Apesar disso, estudos futuros são necessários para avaliar a contribuição de outros mecanismos moleculares e a pressão seletiva exercida pelos antimicrobianos que contribuem para o desenvolvimento destes fenótipos.

Introduction: Pseudomonas aeruginosa resistant to…

Advisors/Committee Members: Nogueira, Patrícia Puccinelli Orlandi, 03478565863, cnpq.br%2F1887686774621627%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/1887686774621627, Mota, Adolfo José da, 26837596810, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226, Nunes, Gustavo, Saito, Daniel.

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A hidroxiapatita (Ca10[PO4]6(OH)2, HAp) é uma biocerâmica de fosfato de cálcio e principal constituinte dos ossos e dentes humanos. Diversos estudos na última década têm avaliado a extração e a caracterização da HAp obtida a partir de escamas de diferentes tipos de peixe, visando o sua apliação na engenharia de tecido. Contudo, estudos em bioprospecção de novas fontes de HAp em escamas de peixes da biodiversidade nativa da Amazônia ainda são escassos. O objetivo deste trabalho foi produzir biocerâmica porosa a partir da HAp extraída das escamas de pirarucu (Araipama gigas), onde há registros de presença de HAp na camada externa altamente mineralizada e nanocristais nas fibras de colágeno. A escama foi caracterizada utilizando termogravimetria derivada (TG-DTG) e espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR). A extração de hidroxiapatita (HAp) das escamas de peixe foi realizada por calcinação de entre 600 °C e 1000 °C, os pós de HAp foram analisados por difração de raios X (XDR), espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR), espectroscopia de energia dispersiva por raios-X (EDS), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e rendimento. O pó calcinado a 1000°C foi utilizado para a compactação dos pellets onde misturou-se HAp com diferentes proporções de bicarbonato de amônio (BCA) atuando gerador de poros e sinterizados à 1200 °C. Os pellets sinterizados (biocerâmica porosa ou scaffold) foram caracterizados (XDR), (FT-IR), (EDS), (MEV), densidade, porosidade e bioatividade. A análise da escama por TG-DTG mostrou uma perda de massa superior a 50 %, o que levou a rendimentos de 46 a 48% de extração de pó de HAp. Os resultados de caracterização convergiram para a afirmação da obtenção HAp. No DRX o tamanho médio de cristalito da HAp utilizada para a produção da biocerâmica porosa foi de 74 nm, já o tamanho dos cristalitos das bioceramicas variaram entre 114 a 131 nm. O EDS demonstrou a presença dos elementos que compõem os pós, com a relação Ca/P entre 1,58 e 1,73, e a presença do magnésio, sódio e potássio como elementos traços. Das observações do MEV, o HAp obtido consiste em grãos com tamanhos entre 1-5 um e mais cristalinos com o aumento da temperatura, e a biocerâmica porosa produzida apresentou macroporos interconectados, de dimensões entre 50 µm a 400 µm nas amostras com 40 e 60% m/m de BCA. Todas as biocerâmicas de HAp testadas demonstraram porosidades significativas na faixa de 29-72% para 0-60% em massa de BCA, sendo o ideal acima de 55% para desenvolvimento de andaimes ósseos para promover a regeneração óssea. O teste de Bioatividade mostrou formação e dissolução de apatitas nas superfícies das amostras, vistas por miscroscopia e a cristalinidade das amostras que permaneceram altas. Esses resultados sugerem que a biocerâmica porosa desenvolvida pode ter potencial para uso na engenharia de tecidos ósseos. Palavras-chave: Escama de peixe, Hidroxiapatita, Biomaterial, Scaffold, Arapaima gigas.  

The hydroxyapatite (Ca10[PO4]6(OH)2, HAp) is a calcium phosphate…

Advisors/Committee Members: Andrade, Jean Carlos Silva, cnpq.br%2F3330175940424250%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/3330175940424250, Ruiz, Yurimiler Leyet, cnpq.br%2F4485596227952529%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/4485596227952529, Mota, Adolfo Jose da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226.

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O f?sforo ? um elemento essencial na composi??o das principais biomol?culas: prote?nas, carboidratos, lip?deos, DNA e RNA. Entretanto, a elevada demanda desse nutriente leva ? deple??o de suas reservas naturais, resultando em uma poss?vel crise mundial em um futuro n?o muito distante. Nesse contexto, surge a necessidade de sua reciclagem, e uma das alternativas vi?veis se d? pelo uso de micro-organismos, que estocam o f?sforo em gr?nulos polifosfato. Considerando a inestim?vel biodiversidade amaz?nica, ? prov?vel que existam micro-organismos portadores de sistemas altamente eficientes na capta??o e estoque de fosfato e portanto adequados para a reciclagem microbiol?gica do nutriente. Nesse trabalho foram coletada e isoladas 756 bact?rias, dessas, 400 foram triadas pela metodologia de microdetermina??o de capta??o do fosfato. Setenta e uma bact?rias foram capazes de captar mais de 50% do fosfato dispon?vel no meio de cultura, com destaque para Serratia marcescens 9rp1 que consegue captar quase a totalidade deste. A an?lise gen?mica revelou a exist?ncia de 1 operon PST completo, e outro incompleto, contendo apenas os genes que codificam para as permeases transportadoras de fosfato. A filogenia desses operons sugerem origem polifil?tica, ou seja, n?o s?o resultado de duplica??o g?nica o que pode estar influenciando na sensibilidade ? percep??o do nutriente e ativando toda a cascata metab?lica resultante, conferindo a S. marcescens 9rp1 efici?ncia similar a Pseudomonas aeruginosa, geneticamente modificada para esse fim.

Phosphorus is an essential element in the composition of the biomolecules such as proteins, carbohydrates, lipids, DNA and RNA. However, the high exploitation of phosphorus leads to the depletion of its natural reserves, resulting in a possible global crisis of this element. In this context, recycling methodologies are imperative, and one of the viable alternatives is the use of microorganisms, which store phosphorus in polyphosphate granules. Considering the inestimable Amazonian biodiversity, it is probable that there are microorganisms carrying systems highly efficient in the capture and stock of phosphate and therefore suitable for its microbiological recycling. In this work, we collected and isolated 756 bacteria, from those, 400 were screened by the methodology of microdetermination of phosphate uptake. Seventy-one bacteria were efficient in phosphate uptake, especially Serratia marcescens (9rp1). The genomic analysis revealed the existence of, at least, three PST operons and the phylogeny of these operons suggest polyphyletic origin, i. e., they do not result of gene duplication, which can influence the sensitivity to the perception of the nutrient in the environment and the whole metabolic cascade resulting.

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico

Advisors/Committee Members: Mota, Adolfo Jose da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226, Astolfi Filho, Spartaco, cnpq.br%2F2699190136695057%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2699190136695057, Silva, Carlos Gustavo Nunes da, cnpq.br%2F6225536299087624%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/6225536299087624.

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O uso do petr?leo e seus derivados possibilitou o avan?o tecnol?gico em grande parte do mundo, beneficiando a economia, a ind?stria e a sociedade como um todo. Entretanto, todo esse impacto trouxe consequ?ncias diretas ao meio ambiente e ? pr?pria humanidade. A polui??o causada pela combust?o do petr?leo, derramamentos acidentais de combust?veis nos ambientes aqu?ticos e terrestres e os efeitos causados em organismos vivos s?o alguns fatos que trazem ? tona a problem?tica da degrada??o ambiental causada pelo uso desenfreado do petr?leo e seus derivados. A busca incessante por solu??es para este problema mostra que a biorremedia??o ? uma alternativa vi?vel e promissora, onde organismos vivos promovem a degrada??o dos compostos t?xicos do ambiente, e cada vez mais estudos nessa ?rea tendem a explorar e elucidar o mecanismo que torna microrganismos capazes de serem aplic?veis ? biorremedia??o. Neste trabalho, cepas de Burkholderia arboris, Bacillus cereus, Bacillus sp., Burkholderia sp. e Moraxella sp. isoladas de cons?rcio foram avaliadas a fim de identificar caracter?sticas que possam promover a biorremedia??o do ?leo diesel. As cepas B. arboris e Burkholderia sp. foram capazes de emulsificar hexano, xileno e diesel, enquanto Moraxella sp. que emulsificou apenas o xileno. Estas cepas tiveram a habilidade de se aderirem ao hexano e xileno, contudo apenas Moraxella sp. teve ind?cios de produ??o de biossurfactantes. Todas as cepas formaram biofilme e as cepas B. arboris, Burkholderia sp. e Moraxella sp. foram mais resistentes a antibi?ticos do que as cepas B. cereus e Bacillus sp. Burkholderia arboris, Burkholderia sp. e Moraxella sp. apresentaram toxicidade durante a germina??o de sementes de Lactuca sativa. Os resultados descritos neste trabalho s?o importantes para a proposi??o de um cons?rcio microbiano degrador de diesel.

The use of oil and its derivatives has enabled technological advances in much of the world, benefiting the economy, industry and society as well. However, all this impact caused direct consequences to the environment and to humanity itself. Pollution caused by oil, oil residues in aquatic and terrestrial environments and the deleterious effects on live animals are some negative factors on environment caused by the excess use of oil and its respective damages. The continuous search for solutions to this problem shows that bioremediation is a viable and promising alternative, where living organisms promote the degradation of toxic compounds in the environment, and many studies in this area have contributed to elucidate the mechanism related to bioremediation by microorganisms. In this work, strains of Burkholderia arboris, Bacillus cereus, Bacillus sp., Burkholderia sp. and Moraxella sp. isolated from consortium were tested to identify characteristics aduring bioremediation of diesel oil. The strains B. arboris and Burkholderia sp. were able to emulsify hexane, xylene and diesel, while Moraxella sp. emulsified only xylene. These strains also adhere to hexane and xylene, but only Moraxella sp. had…

Advisors/Committee Members: Andrade, Edmar Vaz de, cnpq.br%2F4691893433367918%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/4691893433367918, Silva, Cynthia Can?do da, cnpq.br%2F7077220592875119%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/7077220592875119, Mota, Adolfo Jos? da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226.

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O presente estudo teve como objetivo de avaliar o perfil socioeconômico da bovinocultura mista e a qualidade sanitária do leite UHT Integral comercializado no Estado do Amazonas. O presente trabalho foi conduzido de janeiro a maio de 2018. Inicialmente, foram utilizadas técnicas de avaliação para verificar o foco dos investimentos e os retornos obtidos por este setor na economia do Estado através de levantamentos de dados de órgãos públicos estaduais e federais e aplicação de questionário e visitas nos estabelecimentos produtores de bovinocultura mista (carne, leite e queijo). Para a análise da Contagem Bacteriana Total (CBT), foram selecionados os cinco municípios do médio e baixo Amazonas, sendo coletadas 30 amostras (caixas) por cidade. Para a análise da contagem de células somáticas, foram selecionadas as oito cidades do médio e baixo Amazonas, sendo também coletadas 30 amostras (caixas) por cidade. Os dados coletados de CBT e CCS foram submetidos ao teste de Tukey (p≤0,05) após apresentaram resultado significativo na ANOVA. Inicialmente, verificou-se que o Estado do Amazonas apresenta sua produção leiteira concentrada em poucos municípios, havendo uma grande dispersão do rebanho ao longo dos municípios, e grandes rebanhos concentrados em pouquíssimos locais. Comparado à produção brasileira, o Estado do Amazonas apresenta uma produção considerada inexpressiva, com alguns municípios inclusive não apresentando produção alguma. E a partir dos resultados de CBT e CCS, verificou-se que o leite consumido nas cidades da zona rural do Estado do Amazonas apresentou maior contaminação bacteriana do que o leite comercializado na capital, estando todos os resultados acima dos valores de referência. As cidades com maior isolamento geográfico apresentaram amostras de leite com maiores (p<0,05) valores de células somáticas, indicando menor qualidade. No entanto, esses resultados estão abaixo do valor de referência estabelecido pela legislação vigente. A partir dos resultados, concluiu-se que o leite comercializado no Estado do Amazonas atendia aos valores de qualidade previstos pela legislação vigente para contagem de células somáticas. No entanto, as amostras analisadas apresentaram carga bacteriana acima da recomendação e piores resultados em municípios da zona rural, especialmente em cidades com grande isolamento geográfico.

This study aimed to evaluate the socioeconomic profile of mixed cattle production (meat, milk and cheese) and the sanitary quality of UHT Integral milk marketed in Amazonas State. The present work was conducted from January to May 2018. Were evaluated the production obtained by mixed cattle (beef, milk and cheese) in each city of Amazonas State. Data were collected from state and federal public agencies, and visits on producing establishments. For Total Bacterial Count (TBC) analysis, were selected the five cities with highest milk intake in the Amazonas State. 30 samples (boxes) per city were collected. For Somatic Cells Count analysis, were selected the eight cities with highest milk production in…

Advisors/Committee Members: Freitas, Soraya Farias de Andrade, 052.464.214-14, cnpq.br%2F1752452943678670%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/1752452943678670, Mota, Adolfo José da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226, Cruz, Frank George Guimarães, cnpq.br%2F6915544029415506%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/6915544029415506, Carvalho, Nilson Luiz de Aguiar, cnpq.br%2F8163327834949973%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/8163327834949973, [email protected].

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A diarreia é a segunda maior causa de mortalidade infantil no mundo. Dentre as doenças diarreicas, destaca-se a shigelose, uma doença caracterizada pela presença de muco e sangue nas fezes, além de febre, cólica e tenesmos. Atualmente no mundo, ocorrem cerca de 165 milhões de casos da doença com 1,5 milhões de mortes por ano. Essa doença tem como seu agente etiológico a Shigella, sendo quatro espécies pertencentes a este gênero: S. flexneri, S. sonnei, S. boydii e S. dysenteriae; sendo as duas primeiras as mais endêmicas no mundo. A patogenicidade da Shigella é dependente do Sistema de Secreção do Tipo 3 (SST3), localizado no pINV, um plasmídeo de invasão encontrado em todas as espécies do gênero. O SST3 expressa proteínas que driblam o sistema imunológico do hospedeiro, fazendo com que a bactéria consiga se alojar e multiplicar-se dentro das células epiteliais do intestino. Além do SST3, podem ser encontrados na Shigella os Sistemas de Secreção Tipo II (SST2) e VI (SST6), o primeiro em S. boydii e o segundo, mais recentemente descrito, em S. sonnei. Um estudo realizado pelo grupo Diagnóstico e Controle de Doenças Infecciosas na Amazônia (DCDIA) em 2009, foram coletadas amostras de fezes de 1339 crianças, no qual foram encontradas 30 cepas de Shigella. Destas, foram selecionadas 7, que seguiram para o sequenciamento completo de seus genomas no equipamento Illumina HiSeq 2500. Os contigs foram montados utilizando a abordagem de novo, no software Velvet e os scaffolds montados pelo ABACAS. A anotação foi feita pelo pipeline do Prokka. As amostras foram classificadas a partir da comparação de sequencias em vários bancos de dados, como Genbank, utilizando a ferramenta BLAST, RDP e SILVA. Das 7 bactérias, 4 foram classificadas como S. flexneri e 3, como S. boydii, uma espécie raramente encontrada fora da índia. Com uma anotação feita pelo KAAS, foram visualizadas vias metabólicas no KEGG, utilizando o pacote Pathway, no qual foi identificado o SST6 nas 3 representantes da S. boydii. Esse sistema garante uma vantagem adaptativa competitiva para a bactéria, podendo ser a resposta do porquê o número de casos com S. boydii fora da Índia tem crescido.

Diarrhea is the second leading cause of child mortality in the world. Diarrheal diseases include shigellosis, a disease characterized by the presence of mucus and blood in the faeces, in addition to fever, colic and tenesms. Currently, around 165 million cases of the disease occur worldwide, with 1.5 million deaths a year. This disease has as its etiologic agent the Shigella, being four species belonging to this genus: S. flexneri, S. sonnei, S. boydii and S. dysenteriae; the first two being the most endemic in the world. The pathogenicity of Shigella is dependent on the Type 3 Secretion System (T3SS), located in pINV, an invasion plasmid found in all species of the genus. T3SS expresses proteins that dribble the host's immune system, causing the bacteria to lodge and multiply within the intestinal epithelial cells. Besides the SST3, Type 2 (T2SS) and 6 (T6SS) Secretion…

Advisors/Committee Members: Nogueira, Patrícia Puccinelli Orlandi, 034.785.658-63, cnpq.br%2F1887686774621627%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/1887686774621627, Alencar, Tainá Raiol, cnpq.br%2F9295686881191724%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/9295686881191724, Andrade, Edmar Vaz de, cnpq.br%2F4691893433367918%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/4691893433367918, Mota, Adolfo Jose da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226, br%22%29&pagesize-30">[email protected]br.

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A hidroxiapatita (Ca10[PO4]6(OH)2, HAp) é uma biocerâmica de fosfato de cálcio e principal constituinte dos ossos e dentes humanos. Diversos estudos na última década têm avaliado a extração e a caracterização da HAp obtida a partir de escamas de diferentes tipos de peixe, visando o sua apliação na engenharia de tecido. Contudo, estudos em bioprospecção de novas fontes de HAp em escamas de peixes da biodiversidade nativa da Amazônia ainda são escassos. O objetivo deste trabalho foi produzir biocerâmica porosa a partir da HAp extraída das escamas de pirarucu (Araipama gigas), onde há registros de presença de HAp na camada externa altamente mineralizada e nanocristais nas fibras de colágeno. A escama foi caracterizada utilizando termogravimetria derivada (TG-DTG) e espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR). A extração de hidroxiapatita (HAp) das escamas de peixe foi realizada por calcinação de entre 600 °C e 1000 °C, os pós de HAp foram analisados por difração de raios X (XDR), espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR), espectroscopia de energia dispersiva por raios-X (EDS), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e rendimento. O pó calcinado a 1000°C foi utilizado para a compactação dos pellets onde misturou-se HAp com diferentes proporções de bicarbonato de amônio (BCA) atuando gerador de poros e sinterizados à 1200 °C. Os pellets sinterizados (biocerâmica porosa ou scaffold) foram caracterizados (XDR), (FT-IR), (EDS), (MEV), densidade, porosidade e bioatividade. A análise da escama por TG-DTG mostrou uma perda de massa superior a 50 %, o que levou a rendimentos de 46 a 48% de extração de pó de HAp. Os resultados de caracterização convergiram para a afirmação da obtenção HAp. No DRX o tamanho médio de cristalito da HAp utilizada para a produção da biocerâmica porosa foi de 74 nm, já o tamanho dos cristalitos das bioceramicas variaram entre 114 a 131 nm. O EDS demonstrou a presença dos elementos que compõem os pós, com a relação Ca/P entre 1,58 e 1,73, e a presença do magnésio, sódio e potássio como elementos traços. Das observações do MEV, o HAp obtido consiste em grãos com tamanhos entre 1-5 um e mais cristalinos com o aumento da temperatura, e a biocerâmica porosa produzida apresentou macroporos interconectados, de dimensões entre 50 µm a 400 µm nas amostras com 40 e 60% m/m de BCA. Todas as biocerâmicas de HAp testadas demonstraram porosidades significativas na faixa de 29-72% para 0-60% em massa de BCA, sendo o ideal acima de 55% para desenvolvimento de andaimes ósseos para promover a regeneração óssea. O teste de Bioatividade mostrou formação e dissolução de apatitas nas superfícies das amostras, vistas por miscroscopia e a cristalinidade das amostras que permaneceram altas. Esses resultados sugerem que a biocerâmica porosa desenvolvida pode ter potencial para uso na engenharia de tecidos ósseos. Palavras-chave: Escama de peixe, Hidroxiapatita, Biomaterial, Scaffold, Arapaima gigas.  

The hydroxyapatite (Ca10[PO4]6(OH)2, HAp) is a calcium phosphate…

Advisors/Committee Members: Andrade, Jean Carlos Silva, 035641224-51, cnpq.br%2F3330175940424250%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/3330175940424250, Aum, Yanne Katiussy Pereira Gurgel, cnpq.br%2F0063234348877461%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/0063234348877461, Ruiz, Yurimiler Leyet, cnpq.br%2F4485596227952529%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/4485596227952529, Mota, Adolfo Jose da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226, [email protected].

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As abelhas nativas sem ferrão (Apidae: Meliponini) apresentam interações simbióticas com as leveduras, apontadas como as principais responsáveis pela fermentação do pólen, alimento preferido pelos meliponídeos, e pela fermentação de outros materiais de origem vegetal coletados pelas abelhas. Neste projeto, foi proposto identificar leveduras associadas ao ninho de duas abelhas nativas da Amazônia e estabelecer um banco de estirpes amazônicas de referência. Para isso, os substratos (pólen, mel, alimento larval e cera) foram coletados do ninho de Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata em três meliponários, localizados em Iranduba, Parintins e Paraná de Parintins, (n=12 amostras). Os procedimentos metodológicos adotados neste trabalho seguem a seguinte ordem: (1) isolamento em YPD, (2) triagem em CHROMágar para separação dos isolados em grupos de cores, (3) extração de DNA, (4) triagem de padrões moleculares por PCR/RFLP baseado na amplificação das regiões 18S, ITS1-5,8S-ITS2 e D1/D2 do gene 26S rRNA e digestão do amplicon com a enzima Dde I (5) sequenciamento dos amplicons dos diferentes padrões obtidos na RFLP e a identificação mediante comparação das sequências obtidas contra os bancos de dados de sequências nucleotídicas do consórcio INSDC, com auxílio da ferramenta BLASTN. Foram isoladas 749 leveduras associadas ao ninho das abelhas Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata, das quais, 15 linhagens foram identificas, a saber: SM01 Candida sp., SM02 Hyphopichia sp., SM03 Rhodotorula sp., SM04 Wickerhamiella versalitis, SM05 Debaryomyces sp., SM06 Candida orthopsilosis, SM07 Candida apícola, SM08 Metschnikowia sp., SM09 Zygosaccharomyces siamensis, SM10 Hanseniaspora opuntiae, SM11 Pichia sp., SM12 Pichia kluyveri, SM13 Trichosporon asahii, SM14 Kodamaea ohmeri e SM15 Aureobasidium sp. Este trabalho resultou em (1) dados inéditos a respeito das leveduras associadas às abelhas sem ferrão da Amazônia, (2) contribuiu com os bancos de dados por meio do depósito de sequências nucleotídicas completas de regiões gênicas usadas para identificação de leveduras, (3) estabeleceu 14 novos padrões de RFLP, (4) forneceu quinze linhagens a serem exploradas em estudos futuros, das quais cinco podem ser espécies ainda não descritas na literatura, que visem prospectar processos e biomoléculas de interesse biotecnológico.

Native stingless bees (Apidae: Meliponini), as well as the other social insects of the order hymenoptera, present symbiotic interactions with the yeasts, indicated as the main responsible for the processing of pollen, fermented food preferred by the meliponids, and by the fermentation of other vegetal materials taken to these nests. In this project, it was proposed to identify yeasts associated with the nest of two Amazon native bees and establish a reference database for Amazonian strains. For this, the substrates (pollen, honey, larval food and wax) were collected from the nest of Melipona interrupta and Cephalotrigona femorata in three meliponaria, located in Iranduba,…

Advisors/Committee Members: Silva, Carlos Gustavo Nunes da, 65820509153, cnpq.br%2F6225536299087624%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/6225536299087624, Mota, Adolfo José da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226, Souza, João Vicente Braga de, cnpq.br%2F7804981785557071%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/7804981785557071, Carvalho, Elen Betheleen de Souza, cnpq.br%2F1223389633924270%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/1223389633924270, [email protected].

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Ao decorrer dos anos a ciência busca fornecer materiais que permitam o desenvolvimento de dispositivos para substituir ou coexistir com os tecidos do corpo humano. Dentre estes, os biocompósitos possibilitam a melhoria de propriedades químicas e mecânicas requeridas na aplicação, que deverão ser capazes de fornecer o intercrescimento com o material biológico além de resistir as cargas fornecidas no local. O beneficiamento da hidroxiapatita e do colágeno obtido de resíduos do Pirarucu, fonte natural, representam baixo custo, além da combinação fornecer as duas fases principais do osso humano. O objetivo deste estudo foi avaliar o beneficiamento dos resíduos do pirarucu, pela produção de corpos densos de hidroxiapatita (HAp), proveniente da escama de pirarucu e fibra de colágeno (FCn), proveniente da pele do pirarucu, na proporção de 15, 30 e 45% em peso de FCn em HAp. Os materiais obtidos, HAp e FCn, foram caracterizados termicamente, estruturalmente, quimicamente e morfologicamente, através de análises de DSC/TGA, DRX, FRX, FT-IR e MEV/FEG, respectivamente. Para direcionamento de aplicação como biomaterial foi realizado um teste de biodegradabilidade e o ensaio mecânico, para determinação da dureza de Vickers. Como resultado da análise térmica realizada na escama e na pele do pirarucu, foi observado que a perda de massa tende a estabilizar em 550 e 700°C respectivamente, com percentuais de perda de 52 e 90%. Após o beneficiamento da escama foi avaliado a HAp obtida que apresentou razão molar de 1,5 Ca/ P e estrutura cristalina hexagonal similar com a já relatada por outros autores, com um rendimento de 47% em massa. Para o beneficiamento da pele, foi observado que através da extração ácida é possível obter fibra de colágeno e colágeno, com teor de proteína total de 98,10 e 87,98% e rendimento de 24 e 5%, respectivamente, além de ambos apresentarem morfologia reticulada, considerando assim a fibra de colágeno uma opção para utilização na formação de biomateriais por esta apresentar um melhor rendimento. Com a formação de uma matriz composta de fibra de colágeno e hidroxiapatita, foi possível confirmar o potencial dos materiais obtidos para a produção de biomateriais, quando avaliado a biodegradabilidade que tende a estabilização da perda de massa no décimo segundo dia, além da correlação observada entre a microdureza de Vickers e concentração de fibra de colágeno, que apresentou os valores de 0,42, 0,38, e 0,34, respectivamente nas concentrações 15%, 30% e 45%.

Over the years science has sought to provide materials that enable the development of devices to replace or coexist with the tissues of the human body. Among these, the biocomposites allow the improvement of the chemical and mechanical properties required in the application, which should be able to provide the intergrowth with the biological material besides resisting the loads supplied in the place. The beneficiation of hydroxyapatite and collagen obtained from residues of the natural source Pirarucu represent low cost, in addition to the combination…

Advisors/Committee Members: Andrade, Jean Carlos Silva, cnpq.br%2F3330175940424250%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/3330175940424250, Andrade, Jean Carlos Silva, cnpq.br%2F3330175940424250%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/3330175940424250, Sanches, Edgar Aparecido, cnpq.br%2F9217911214522756%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/9217911214522756, Mota, Adolfo José da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226.

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A expressão heteróloga do hormônio de crescimento recombinante de tambaqui (rtGH), Colossoma macropomum, na levedura metilotrófica Pichia pastoris aponta a perspectiva de geração de um produto biotecnológico inovador para a piscicultura brasileira, em especial para o cultivo do tambaqui. Nessa perspectiva, esta pesquisa teve por objetivo avaliar o potencial de expressão do rtGH na levedura P. pastoris, em sistema de frascos agitados e em biorreator. Inicialmente foi realizada uma seleção dos clones transformantes de P. pastoris com capacidade de produzir os melhores níveis de rtGH, levendo em consideração o fenótipo. Para melhorar o nível de expressão do rtGH em sistema de frascos agitados, foram utilizadas as ferramentas estatísticas de planejamento experimental fatorial. Primeiramente, um screening design baseado no delineamento Plackett e Burman foi utilizado para seleção dos parâmetros mais significativos relacionados à produção de rtGH e biomassa: extrato de levedura, peptona, ureia, tampão fosfato, biotina, metanol, inóculo e pH. Posteriormente, os parâmetros selecionados, metanol e peptona, foram avaliados em DCCR e analisados por meio da metodologia de superfície de resposta. Por fim, foi realizada uma fermentação conduzida em batelada alimentada por pulsos de metanol e o perfil cinético de produção do rtGH determinado. Os resultados obtidos indicaram o clone 32b, fenótipo Mut+, como o mais produtivo. O metanol foi apontado como o parâmetro mais importante para a produção do rtGH, seguido da peptona, biotina e inóculo. Em relação à formação de biomassa, o metanol, extrato de levedura e tampão fosfato foram os parâmetros mais importantes. De acordo com o modelo obtido, as concentrações de 1,55 % de metanol e 2,8% de peptona foram consideradas ótimas para produção do rtGH. O modelo foi validado com aumento da produção de rtGH de 0,3 mg/L para 2,4 mg/L na condição otimizada. A fermentação em biorreator, conduzida em batelada alimentada por pulsos de metanol, resultou num nível de produção de rtGH de 250 mg/L, aproximadamente 100 vezes superior ao obtido em frascos agitados. Esta pesquisa foi pioneira no desenvolvimento de estratégias de otimização da produção do rtGH em P. pastoris utilizando frascos agitados e biorreator.

The heterologous expression of recombinant growth hormone from tambaqui (rtGH), Colossoma macropomum, in the methylotrophic yeast Pichia pastoris points to the prospect of generating an innovative biotechnological product for Brazilian fish farming, especially for the cultivation of tambaqui. In this perspective, this research aimed to evaluate the potential of rtGH expression in yeast P. pastoris, in shaken flasks and in bioreactor. Initially, a selection of the transforming clones of P. pastoris with the capacity to produce the best rtGH levels was carried out, taking into account the phenotype. In order to improve the level of rtGH expression in the shaken flasks system, the statistical tools of factorial experimental planning were used. First, a screening design based on the Plackett…

Advisors/Committee Members: Andrade, Edmar Vaz de, 469.573.751-53, cnpq.br%2F4691893433367918%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/4691893433367918, Astolfi Filho, Spartaco, 102.451.971-68, cnpq.br%2F2699190136695057%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2699190136695057, Carmo, Edson Júnior do, cnpq.br%2F5780309549588357%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/5780309549588357, Carvalho, Elen Bethleen de Souza, cnpq.br%2F1223389633924270%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/1223389633924270, Zanotto, Sandra Patricia, cnpq.br%2F9663104101654271%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/9663104101654271, Mota, Adolfo José da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226, br%22%29&pagesize-30">[email protected]br.

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Ao decorrer dos anos a ciência busca fornecer materiais que permitam o desenvolvimento de dispositivos para substituir ou coexistir com os tecidos do corpo humano. Dentre estes, os biocompósitos possibilitam a melhoria de propriedades químicas e mecânicas requeridas na aplicação, que deverão ser capazes de fornecer o intercrescimento com o material biológico além de resistir as cargas fornecidas no local. O beneficiamento da hidroxiapatita e do colágeno obtido de resíduos do Pirarucu, fonte natural, representam baixo custo, além da combinação fornecer as duas fases principais do osso humano. O objetivo deste estudo foi avaliar o beneficiamento dos resíduos do pirarucu, pela produção de corpos densos de hidroxiapatita (HAp), proveniente da escama de pirarucu e fibra de colágeno (FCn), proveniente da pele do pirarucu, na proporção de 15, 30 e 45% em peso de FCn em HAp. Os materiais obtidos, HAp e FCn, foram caracterizados termicamente, estruturalmente, quimicamente e morfologicamente, através de análises de DSC/TGA, DRX, FRX, FT-IR e MEV/FEG, respectivamente. Para direcionamento de aplicação como biomaterial foi realizado um teste de biodegradabilidade e o ensaio mecânico, para determinação da dureza de Vickers. Como resultado da análise térmica realizada na escama e na pele do pirarucu, foi observado que a perda de massa tende a estabilizar em 550 e 700°C respectivamente, com percentuais de perda de 52 e 90%. Após o beneficiamento da escama foi avaliado a HAp obtida que apresentou razão molar de 1,5 Ca/ P e estrutura cristalina hexagonal similar com a já relatada por outros autores, com um rendimento de 47% em massa. Para o beneficiamento da pele, foi observado que através da extração ácida é possível obter fibra de colágeno e colágeno, com teor de proteína total de 98,10 e 87,98% e rendimento de 24 e 5%, respectivamente, além de ambos apresentarem morfologia reticulada, considerando assim a fibra de colágeno uma opção para utilização na formação de biomateriais por esta apresentar um melhor rendimento. Com a formação de uma matriz composta de fibra de colágeno e hidroxiapatita, foi possível confirmar o potencial dos materiais obtidos para a produção de biomateriais, quando avaliado a biodegradabilidade que tende a estabilização da perda de massa no décimo segundo dia, além da correlação observada entre a microdureza de Vickers e concentração de fibra de colágeno, que apresentou os valores de 0,42, 0,38, e 0,34, respectivamente nas concentrações 15%, 30% e 45%.

Over the years science has sought to provide materials that enable the development of devices to replace or coexist with the tissues of the human body. Among these, the biocomposites allow the improvement of the chemical and mechanical properties required in the application, which should be able to provide the intergrowth with the biological material besides resisting the loads supplied in the place. The beneficiation of hydroxyapatite and collagen obtained from residues of the natural source Pirarucu represent low cost, in addition to the combination…

Advisors/Committee Members: Andrade, Jean Carlos Silva, 03564122451, cnpq.br%2F3330175940424250%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/3330175940424250, Andrade, Jean Carlos Silva, 03564122451, cnpq.br%2F3330175940424250%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/3330175940424250, Sanches, Edgar Aparecido, cnpq.br%2F9217911214522756%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/9217911214522756, Mota, Adolfo José da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226, [email protected], https://orcid.org/0000-0002-6777-4276, https://orcid.org/0000-0002-6777-4276.

▼ O petróleo é a principal força motriz da indústria e dos transportes, é um líquido escuro, de composição variável, e rico em hidrocarbonetos. Uma amostra de petróleo pode conter mais de vinte mil substâncias diferentes, parte delas tóxicas aos organismos e ao meio ambiente, além de recalcitrantes. A necessidade industrial faz com que os países explorem regiões ricas em biodiversidade, expondo os ambientes aos riscos envolvidos durante a extração e o transporte para refino, do óleo bruto. Tecnologias que reduzam impactos ambientais por derramamento de petróleo a baixo custo e ambientalmente amigáveis são fundamentais. A Província Petrolífera de Urucu é o maior sítio terrestre de extração de petróleo no Brasil, pertencente à macrorregião de Coari, Amazonas. O objetivo deste trabalho foi investigar se a resistência ao petróleo de Urucu pela linhagem de Burkholderia gladioli Coa14, isolada do Lago de Coari, pode ser um indicativo de seu potencial para utilização em biorremediação. Para isto, foram realizadas análises químicas, genômicas, de genômica funcional e de genômica comparativa. Inicialmente, para testar a ação da bactéria sobre o petróleo, foi realizado um experimento onde a linhagem foi inoculada em Erlenmeyers contendo meio Bushnell-Hass e petróleo à 5% (V/V) como fonte de carbono e energia, num volume final de 100 mL. Os mesmos foram mantidos em shaker à 150 RPM e 37o C por 21 dias. Ao final do período, os meios foram centrifugados para retirada das células e extração do óleo resultante. A extração do óleo do meio de cultura foi realizada com hexano e as fases orgânicas diretamente analisadas por GC-MS (modo SIM) para monitoramento seletivo dos n-alcanos. Como controle foram utilizados frascos e procedimentos nas mesmas condições, sem o inóculo. A perda por manipulação foi estimada extraindo-se o petróleo de frascos na condição dos controles, no tempo zero. A avaliação do crescimento foi estimada medindo-se a densidade óptica de células obtidas a partir de 10 mL do meio e ressuspensas em NaCl a 0,85%. Em seguida, foi realizado o sequenciamento Illumina e a montagem do genoma até o nível de draf. A montagem foi seguida da anotação e investigação dos genes presentes relacionados com a degradação de óleo bruto, assim como a reconstrução das vias metabólicas que possam ser utilizadas pelo microrganismo para este fim. Como análise final, foram realizadas comparações entre o genoma da espécie em questão com outros da mesma espécie, assim como genomas de bactérias de espécies diferentes relacionadas à biorremediação de petróleo e derivados, depositados publicamente no NCBI. A linhagem reduziu em 48% o volume de n-alcanos, enquanto sua densidade óptica aumentou de 1,0 a 2,2 em 21 dias, indicando possibilidade para utilização da mesma em estratégias de biorremediação. A mesma é resistente a três antibióticos do grupo das cefalosporinas e suscetível a outros nove relacionados a testes para bactérias Gram Negativas. O sequenciamento revelou um genoma com tamanho de 8,4 Mb e diversos genes / vias relacionados à… Advisors/Committee Members: Astolfi Filho, Spartaco, 102.451.971-68, cnpq.br%2F2699190136695057%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2699190136695057, Costa, Josemar Gurgel da, cnpq.br%2F4452132280168723%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/4452132280168723, Koolen, Hector Henrique Ferreira, cnpq.br%2F2722430673503338%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2722430673503338, Saito, Daniel, cnpq.br%2F9653041674065765%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/9653041674065765, Oliveira, Tereza Cristina Souza de, cnpq.br%2F6273580270881135%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/6273580270881135, Mota, Adolfo José da, cnpq.br%2F2931501267284226%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/2931501267284226, Wiedemann, Larissa Silveira Moreira, cnpq.br%2F9502116548842890%22%29&pagesize-30">http://lattes.cnpq.br/9502116548842890, [email protected].