▼ O presente trabalho descreve o isolamento a identifica??o estrutural dos contituintes qu?micos de Cyperus rotundus, aclimatada no Amazonas, bem como, a avalia??o sazonal do ?leo essencial extra?do dos tub?rculos que foram coletados em diferentes ?pocas do ano, al?m das atividades de sequestro do radical DPPH, ensaios enzim?ticos elastase, tirosinase e ?-glucosidase, ensaio citot?xico contra larvas de Artemia salina e ensaio colorim?trico contra formas promastigotas de Leishmania amazonensis. A partit do extrato hex?nico obtido dos tub?rculos foram identificados uma mistura dos ester?ides ?-sitosterol e estigmasterol e o ester hexadecanoato de etila. Do extrato em acetato de etila foi identificada uma mistura bin?ria de sesquiterpenos oxigenados c?clicos caracterizados como ?-ciperona e ciperotundona e o ?cido ferulico. Do extrato em metanol foi isolado o d-manitol e o per?xido de ergosterol. Do extrato hex?nico obtido da infloresc?ncia foi identificada a mistura de ester?ides ?-sistosterol e estigmasterol e do extrato em metanol foi isolada a luteolina. A composi??o do ?leo essencial foi analisada por uma combina??o de CGAR-EM e CG-DIC. Os resultados revelaram varia??o no teor do ?leo essencial no per?odo seco e chuvoso, bem como varia??o qualitativa dos principais constituintes em fun??o da ?poca do ano em que os tub?rculos foram coletados. Os componentes majorit?rios do ?leo essencial identificados foram ?-selineno (5,79 a 7,34%), ?xido de cariofileno (4,68 a 7,47%), cipereno (10,64 a 18,62%), ciperotundona (13,78 a 24,72%) e ?-ciperona (20,34 a 23,73%). No ensaio quantitativo de sequestro de radicais livres, o extrato em metanol da infloresc?ncia e a luteolina revelaram forte atividade antioxidante. Nos ensaios enzim?ticos frente elastase e tirosinase, os extratos e subst?ncias isoladas apresentaram fraca atividade inibit?ria. No ensaio enzim?tico frente ?-glucosidase os extratos hex?nicos (tub?rculos e infloresc?ncia) e o ?leo essencial apresentaram forte atividade inibit?ria com CI50 = 2,75; 12,75 e 15,17 ?g/mL, respectivamente. O resultado da DL50 do ensaio realizado com Artemia salina L. revelou baixa toxicidade para o extrato em hexano e ?leo essencial e moderada toxicidade do extrato em acetato de etila e em metanol. Na avalia??o da atividade antimicrobiana o extrato hex?nico (tub?rculos) e o ?leo essencial apresentaram forte inibi??o contra as bact?rias Gram positivas e contra a levedura e o extrato metan?lico (infloresc?ncia) e o d-manitol apresentaram elevada atividade contra Candida albicans. Na avalia??o da atividade de inibi??o de ades?o microbiana o ?leo essencial e d-manitol reduziram em cerca de 50% a capacidade de forma??o do biofilme com Enterococus faecalis e Candida albicans, respectivamente. Os resultados do teste colorim?trico realizados in vitro dirigidos ? a??o leishmanicida, contra formas promastigotas de Leishmania amazonensis, revelaram significativa atividade para o extrato hex?nico (CI50 = 3,65 ?g/mL), acetato de etila (CI50 = 4,29 ?g/mL) e o ?leo essencial (CI50 = 5,07 ?g/mL). A partir… Advisors/Committee Members: Pinheiro, Maria L?cia Bel?m, http://lattes.cnpq.br/9299061381457390.

▼ As esp?cies pertencentes ? fam?lia Rubiaceae revelaram grande diversidade de metab?litos secund?rios, os quais s?o respons?veis por uma gama de atividades biol?gicas. Entre estas esp?cies encontra-se Duroia macrophylla Huber, end?mica da Floresta Amaz?nica, conhecida popularmente como cabe?a-de-urub?, apuru? ou puru?-grande-da-mata. A escassez de estudos de plantas do g?nero Duroia e a aus?ncia de estudos qu?micos e de atividade biol?gica para D. macrophylla, instigaram este trabalho, cujo o objetivo foi isolar os constituintes qu?micos e avaliar os extratos e subst?ncias isoladas quanto ?s atividades: antioxidante, toxicidade frente ? Artemia salina, antibacteriana, antimicobacteriana e antitumoral. Foram realizadas duas coletas desta esp?cie, extra?da com diclorometano (DCM) ou hexano (Hex) e metanol (MeOH). Os extratos foram testados como antioxidante, citot?xico, antibacteriano, antimicobacteriano e antitumoral, com intuito de ampliar as chances de obter mol?culas ativas e/ou prot?tipos de f?rmacos. As subst?ncias isoladas foram identificadas por m?todos espectrosc?picos (RMN de 1H, de 13C e bidimensionais) e por espectrometria de massas e testadas como antimicobacteriana e antitumoral. Na prospec??o fitoquimica todos os extratos apresentaram ind?cios de terpenos e apenas os extratos DCM de folhas e galhos da 1? coleta n?o apresentaram capacidade antioxidante frente ao revelador DPPH. Os extratos MeOH de ambas as coletas apresentam compostos arom?ticos. A presen?a de alcaloides foi detectada apenas nos extratos dos galhos da 2? coleta. Foram isoladas e identificadas quatro subst?ncias dos extratos da 1? coleta: dois triterpenos do extrato DCM das folhas (?cido olean?lico e ?cido urs?lico), uma chalcona do extrato MeOH das folhas (4,4?dihidroxi-3?-chalcona) e um ?cido fen?lico do extrato MeOH dos galhos (?cido m-metoxi-p-hidroxi-benzoico). Dos extratos da 2? coleta foram identificados oito alcaloides ind?licos monoterp?nicos: 10-metoxi-ajmalicina, 11-metoxi-ajmalicina, 11-metoxi-3-isoajmalicina, 9-metoxi-19-epi-3-isoajmalicina, 9-metoxi- 3-isoajmalicina, 10-metoxi-19-epi-3-isoajmalicina, 10-metoxi-3-isorauniticina e 10-metoxirauniticina. Todas as subst?ncias isoladas neste estudo est?o sendo descritas pela primeira vez no g?nero Duroia. A atividade antioxidante dos extratos MeOH de folhas e galhos de ambas as coletas foi bastante significativa. No ensaio citot?xico frente A. salina apenas o extrato metan?lico das folhas da 2? coleta apresentou toxidade na concentra??o letal (CL50) de 120 ?g/mL. Os extratos apresentaram atividade bacteriost?tica sobre as bact?rias Klebsiella pneumoniae, Flavobacterium corumnare, Salmonella enteridis e Pseudomonas aeroginosa. Das subst?ncias testadas apenas o ?cido olean?lico apresentou atividade antibacteriana frente ? Nocardia brasiliensis e Serratia marcescens, com uma CIM de 500 ?g/mL. Dos extratos submetidos ao bioensaio antimicobacteriano, o extrato DCM das folhas (1? coleta) apresentou melhor resultado frente ?s tr?s cepas de Mycobacterium… Advisors/Committee Members: Nunez, Cec?lia Ver?nica, 219.674.728-90, http://lattes.cnpq.br/2046473694108264, Pinheiro, Maria L?cia Bel?m, Costa, Cristov?o Alves.

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Lauraceae ? uma fam?lia bot?nica que apresenta expressivo n?mero de esp?cies com distribui??o pantropical concentrada em florestas fluviais da ?sia e Am?ricas. Quimicamente, ? caracterizada pela presen?a de metab?litos com atividades biol?gicas pronunciadas, como flavonoides, lignoides e, em especial, os alcaloides, que apresentam grande diversidade de estruturas qu?micas. Este estudo teve como objetivo o isolamento de alcaloides de esp?cies de Lauraceae utilizando uma estrat?gia de varredura espectrom?trica associada aos experimentos fitoqu?micos cl?ssicos e realiza??o de ensaios qu?micos e biol?gicos com extratos, fra??es alcalo?dicas e alcaloides isolados. Na an?lise preliminar desta pesquisa foram prospectados folhas e galhos de 16 esp?cies pertencentes a 09 g?neros distintos dessa fam?lia. Destas, 07 foram selecionadas por apresentarem perfil favor?vel ? presen?a de alcaloides: Aniba ferrea, Aniba panurensis, Aniba guianensis, Aniba parviflora, Licaria martiniana, Licaria canella angustata e Ocotea leucoxylon. O material bot?nico foi extra?do em etanol. Foram testadas 03 metodologias para extra??o de alcaloides. Foram isolados cinco alcaloides in?ditos nessas esp?cies: ocockyptina (a partir de O. leucoxylon), laurotetanina e reticulina (a partir de A. ferrea) e dois alcaloides ind?licos proveniente de A. panurensis. Suas estruturas foram identificadas por um conjunto de dados de espectrometria (EM) e espectroscopia (RMN de 1H, 13C e bidimensionais). Para o sequestro dos radicais livres utilizaram-se os m?todos DPPH? e ABTS?+. Os extratos dos galhos da esp?cie A. ferrea, A. martiniana e A. parviflora demostraram alta capacidade sequestrante do radical DPPH? (CI50 12,18 ?g/mL, 13,23 ?g/mL e 14,09 ?g/mL, respectivamente). Para o c?tion radical ABTS?+, os extratos dos galhos de L. martiniana, A. panurensis e A. ferrea foram os que mais se destacaram (CI50 9,45 ?g/mL, 11,05 ?g/mL e 14,14 ?g/mL, respectivamente). Na atividade antimicrobiana por difus?o em ?gar verificou-se que tanto o extrato das folhas quanto dos galhos de A. panurensis expressaram atividade significante com CIM variando de 2,5 a 0,6 mg/mL. O maior percentual de inibi??o no ensaio de citotoxidade foi observado para o extrato dos galhos da esp?cie A. panurensis que reduziu 94,65% das c?lulas pertencentes ? linhagem MRC5. Das fra??es alcalo?dicas testadas para as tr?s atividades, a proveniente dos galhos de A. panurensis apresentou atividade relevante no sequestro do ABTS?+ e no teste antimicrobiano frente ?s cepas de duas bact?rias Gram-positivas. O alcaloide ind?lico de m/z 273 isolado de A. panurensis expressou consider?vel atividade antimicrobiana frente a 4 bact?rias Gram-positivas com CIM 0,6 mg/mL confirmando a atividade observada nos extratos e fra??es alcalo?dicas desta esp?cie. O perfil de atividade antioxidante, antimicrobiano e citot?xico envolvendo fra??es alcalo?dicas est? sendo relatado pela primeira vez neste trabalho.

Lauraceae is a plant family that has large number of species with pantropical…

Advisors/Committee Members: Veiga Junior, Valdir Flor?ncio da, 01872867790, http://lattes.cnpq.br/0581412073128121, Corr?a, Geone Maia, Pinheiro, Maria L?cia Bel?m.

▼ A regi?o Amaz?nica destaca-se por sua imensa biodiversidade, que ? considerada como fonte para descoberta de novas mol?culas de interesse farmacol?gico. Nesse campo de pesquisa, o g?nero Aniba (Lauraceae) possui ampla variabilidade e abund?ncia. As esp?cies de Aniba s?o descritas quimicamente com a presen?a de alcaloides, flavonoides, terpenoides, pironas e lignanas. Nesse contexto, prop?e-se o isolamento e identifica??o dos biomarcadores dos extratos das esp?cies A. panurensis, A. parviflora, A. ferrea e A. roseadora, visando desenvolver um m?todo para r?pida caracteriza??o dos extratos de esp?cies de Aniba (Lauraceae), al?m de descrever suas atividades biol?gicas. Para atingir tais objetivos, foram preparados os extratos etan?licos (galhos e folhas) por macera??o, e esses foram particionados. Por meio de m?todos cromatogr?ficos cl?ssicos (CCD) e por t?cnicas espectrom?tricas (EM), realizou-se a caracteriza??o qu?mica das fra??es hex?nicas e metan?licas. Dessa forma, foram detectados como principais ?ons de m/z 300, 328 e 330, que por compara??o dos dados de fragmenta??o com a literatura, s?o caracter?sticas dos alcaloides: N-metilcoclaurina, isoboldina, laurotetanina e reticulina; al?m desses ?ons, foram detectadas no modo negativo por ioniza??o ESI, os ?ons de m/z 283, 311 e 863, que foram associados aos flavonoides: izalpinina, 3, 5, 7 ? tri-O-metilgalangina e a procianidina trimer. O fracionamento para obten??o dos componentes majorit?rios foi desenvolvido pelo uso de t?cnicas cromatogr?ficas cl?ssicas, como a CC e a CCDP, assim resultando na obten??o de 6 subst?ncias, que foram elucidadas pela uni?o de t?cnicas espectrom?tricas e espectrosc?picas, tais como: EM e RMN (1H e 13C uni e bidimensional). Assim, foram identificadas as estirilpironas: 5,6-dehidrokawa?na, 4-metoxi11,12-metilenodioxi-6-trans-estiril-piran-2-ona e rel-(6R, 7S, 8S, 5?S)-4?-metoxi-8-(11, 12dimetoxifenil)-7-[6-(4 metoxi-2-piranil)]-6-(E)-estiril- 1?-oxabiciclo [4,2,0] octa-4?-en-2?-ona (A. panurensis); o alcaloide pirid?nicos: anibina (A. roseadora) e as kawalactonas: tetrahidroyangonina e dihidrometisticina (A. parviflora). Visando a an?lise do potencial antimicrobiano dos extratos, fra??es e das subst?ncias isoladas, realizou-se os ensaios antibacterianos e antiparasit?rio. Obtendo bons resultados para os extratos e fra??es de A. panurensis com CIM de 7,8 e 15,62 ?g/mL frente a tr?s bact?rias gram-positivas (Staphylococcus simulans, S. aureus e S. aureus resistente ? meticilina (MRSA)). No teste antiplasm?dico frente Plasmodium falciparum, obtiveram-se bons resultados para as extratos etan?licos de A. parviflora e A. panurensis, com melhor resultado de CI50 = 29,03 ?g/mL para o extrato das folhas de A. parviflora; e resultados positivos para duas subst?ncias isoladas, com CI50 = 36,16 ?g/mL para 4-metoxi-11,12-metilenodioxi-6-trans-estiril-piran-2-ona e CI50 = 24,10 ?g/mL para rel-(6R, 7S, 8S, 5?S)-4?-metoxi-8-(11, 12-dimetoxifenil)-7-[6-(4 metoxi-2piranil)]-6-(E)-estiril- 1?-oxabiciclo [4,2,0] octa-4?-en-2?-ona. Os resultados confirmam… Advisors/Committee Members: Veiga Junior, Valdir Flor?ncio da, 01872867790, http://lattes.cnpq.br/0581412073128121, Costa, Emmanoel Vila?a, http://lattes.cnpq.br/9408756365965584, Guimar?es, Anderson Cavalcante, Pinheiro, Maria L?cia Bel?m, [email protected].

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O g?nero Bacillus possui uma grande variedade de esp?cies produtoras de metab?litos secund?rios bioativos com grande potencial em diferentes campos, entre estes os lipopept?deos, que s?o compostos anfif?licos com atividades antif?ngica, antibi?tica e surfactantes. No presente trabalho foram utilizadas tr?s linhagens de bact?rias endof?ticas de plantas da Amazonia produtoras de lipopept?deos, identificadas por sequenciamento de 16S rDNA como B. amyloliquefaciens. Os dados de espectrometria de massas dos extratos das tr?s linhagens analisadas indicaram a presen?a dos lipopept?deos iturina, surfactina e fengicina. Na avalia??o do rendimento na produ??o de lipopept?deos a partir de diferentes meios de cultivo, o YM apresentou os melhores resultados, tendo a linhagem de B. amyloliquefaciens PpC1 2.2b o maior rendimento com 633,1 mg. L-1. A otimiza??o da produ??o de lipopept?deos para as linhagens de B. amyloliquefaciens PpC1 2.2b, GhcC1 2.1a e DgcR2 1.1b por planejamento fatorial fracionado 24-1 e dados obtidos da ANOVA permitiram propor um modelo eficaz obtendo um aumento significativo da produ??o de lipopept?deos a partir de varia??es de pH, agita??o e aera??o. A partir das an?lises de LC-ESI-MS/MS e RMN dos isolados de PpC1 2.2b foram identificadas dezessete subst?ncias lipopept?dicas incluindo seis hom?logos da iturina A, sete hom?logos da surfactina A, dois hom?logos da fengicina A e dois da fengicina B. As fra??es de surfactinas, iturinas e fengicinas apresentaram atividades anti-inflamat?rias por inibi??o da produ??o de NO em c?lulas de macr?fagos murinos J774A.1 com viabilidade celular acima de 100%. As amostras LP196, Fengicina AB1 e Iturina A2 apresentaram atividade antiplasm?dica contra P. falcipurum FCR3, exibindo CI50 de, 58,52 ?g mL-1, 58,0 ?g.mL-1 e 66,83 ?g.mL-1 e o extrato LP164 apresentou atividade antibacterina contra K. pneumoniae com MIC de 62,5 ?g.mL-1.

The Bacillus genus has a wide variety of species that produce bioactive secondary metabolites with great potential in different fields, including lipopeptides, which are amphiphilic compounds with antifungal, antibiotic and surfactant activities. In the present work, three strains of endophytic bacteria from Amazonian plants producing lipopeptides used, identified by sequencing 16S rDNA as B. amyloliquefaciens. The mass spectrometry data of the extracts of the three strains analyzed indicated the presence of the lipopeptides iturin, surfactin and fengycin. In the evaluation of the yield in the production of lipopeptides from different culture media, YM presented the best results, with the B. amyloliquefaciens PpC12.2b strain having the highest yield, 633.1 mg. L-1. The optimization of lipopeptide production for B. amyloliquefaciens PpC1 2.2b, GhcC1 2.1a and DgcR2 1.1b lines by fractional factorial planning 24-1 and data obtained from ANOVA allowed us to propose an effective model for increasing lipopeptide production from pH variations, agitation and aeration. From the LC-ESI-MS / MS and NMR analyzes of the PpC12.2b isolates, seventeen lipopeptide…

Advisors/Committee Members: Souza, Afonso Duarte Le?o de, http://lattes.cnpq.br/5784405197320526, Pinheiro, Maria L?cia Bel?m, http://lattes.cnpq.br/9299061381457390, Souza, Jo?o Vicente Braga de, http://lattes.cnpq.br/7804981785557071, Takahashi, Jacqueline Aparecida, http://lattes.cnpq.br/8436025963943451.