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Made available in DSpace on 2019-08-14T15:56:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_final_02_2016.pdf: 4310774 bytes, checksum: 97a53e089175c4e2210502a2fbbe4077 (MD5) Previous issue date: 29

A esquistossomose mansoni é causada pelo trematoda Schistosoma mansoni, sendo impactante na saúde pública de vários países, principalmente subdesenvolvidos ou em desenvolvimento. Muito se pesquisa sobre a infecção em seres humanos, porém, são escassos os estudos sobre a susceptibilidade dos animais domésticos à infecção, como os ovinos, sendo que no Brasil, há aumento gradual da criação desses animais, como a raça Santa Inês, devido a sua produtividade e rusticidade, sendo a raça deslanada muito criada no nordeste brasileiro. O objetivo desse estudo foi avaliar aspectos da susceptibilidade em ovinos da raça Santa Inês à infecção por S. mansoni, assim como fatores clínicos, hematológicos, parasitológicos e patológicos no período de 0 a 255 dias. Os ovinos do presente estudo foram segmentados em dois grupos com 5 animais livres da infecção (Controle) e 5 infectados por via cutânea com 2.000 cercárias de S. mansoni (Infectado). A avaliação clínica foi realizada para acompanhar variáveis como peso e escore corporal, além do sistema cardiovascular, respiratório, digestório e análise de coloração de mucosa da conjuntiva ocular. Foram coletadas amostras sanguíneas para realização do perfil hematológico e cinética de anticorpos IgG. Para analisar os parâmetros parasitológicos, no diagnóstico foram realizados exames de fezes pelo método de sedimentação espontânea e pelo método de quatro tamises modificada, assim como métodos de eclosão de miracídios, curetagem de mucosa retal e detecção de antígeno pelo teste rápido de urina. Os ovinos foram sacrificados em dois intervalos: aos 135 dpi e aos 255 dpi, sendo os órgãos avaliados. Além disso, foi preconizada a perfusão das vísceras para recuperação de parasitos nos vasos mesentéricos e espaço porta e a recuperação de ovos nos tecidos. Como resultado, na avaliação clínica, houve perda de peso no grupo Infectado de 15 aos 75 dpi com ganho compensatório, mas não o suficiente para igualar ao Controle, além de fezes amorfas. À análise hematológica, foram constatados índices menores nas variáveis de células vermelhas e aumento na contagem total de leucócitos e diferencial de neutrófilos na fase aguda, assim como aumento na contagem diferencial de eosinófilos do sangue periférico de 75 aos 195 dpi. A cinética de IgG mostrou-se alta a reatividade no grupo Infectado, o que evidencia uma resposta imune humoral mais intensa na fase aguda pós postural ao comparar-se as duas titulações, concomitante com os achados clínicos e hematológicos, podendo ser utilizada como ferramenta para imunodiagnóstico da esquistossomose mansoni em ovinos. Quanto aos parâmetros parasitológicos, no diagnóstico foram obtidos os seguintes resultados: (i) não foram observados ovos ou miracídios nas amostras dos ovinos da raça Santa Inês infectados, entretanto, (ii) a técnica de Girão e Ueno (1982)…

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Made available in DSpace on 2019-08-13T22:58:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_samira_final.pdf: 2809587 bytes, checksum: 63c4ae7c9b9d4b998c9ef8175897fcde (MD5) Previous issue date: 20

Doenças alérgicas e infecções produzidas por helmintos parasitos induzem uma resposta imune predominantemente Th2, estimulando o aumento e ativação de eosinófilos, basófilos, mastócitos e altos níveis de IgE circulantes. No caso da esquistossomose, a resposta Th2 é estimulada com o início da ovipostura e geralmente é acompanhada por aumento de IL-10, resultando em uma infecção crônica modulada que persiste por anos. Alguns estudos epidemiológicos têm relatado associações inversas entre alergia e helmintoses, propondo que a exposição frequente do sistema imune a agentes infecciosos pode levar ao desenvolvimento de uma resposta imune modulada, evitando, em parte, o desenvolvimento de doenças inflamatórias. Entretanto, a maioria dos trabalhos publicados tem sido realizados em áreas com alta carga parasitária, situação que tem sido alterada em muitas áreas endêmicas brasileiras nos últimos anos devido ao impacto dos programas de controle. Com o intuito de esclarecer alguns destes aspectos, o presente estudo transversal visa analisar possíveis relações entre infecções por helmintos e reações alérgicas em 257 residentes no distrito rural de Brejo do Amparo, município de Januária, MG. Os participantes do estudo responderam um questionário socioeconômico e outro específico para identificação de doenças alérgicas (ISAAC), e também forneceram amostras de fezes e sangue para realização dos exames parasitológicos, imunológicos, moleculares e hemograma. Os dados mostram que a população do estudo tem baixa escolaridade e renda, além de exposição frequente a fontes de infecção parasitária. O questionário ISAAC identificou 38 (17%) indivíduos com sintomas declarados e frequentes de Asma, 134 (59%) com Rinite e 32 (14%) com Eczema. Exames complementares revelam que 23,8% dos participantes apresentaram níveis séricos elevados de IgE reativo a alergenos frequentes na poeira doméstica. Para garantir o diagnóstico da infecção por S. mansoni em indivíduos com carga parasitária muito baixa, as amostras de fezes foram analisadas por várias técnicas parasitológicas (Kato-Katz, Helmintex® e Gradiente salino) e por PCR-ELISA, revelando uma prevalência de 54,4% e mediana de 4 ovos/g fezes. O soro de cada participante foi utilizado para determinar a concentração de IgE total e de IL-10 através da técnica de ELISA. Apesar dos indivíduos com alta carga parasitária apresentarem elevação da concentração de IgE total e do número de eosinófilos circulantes, estas variáveis foram semelhantes entre os indivíduos infectados e não infectados, enquanto que somente 14 % apresentaram níveis detectais de IL-10 no soro. A análise de regressão linear multivariada revelou que indivíduos infectados com S. mansoni com mais de 12 OPG tiveram 5 vezes menos chance de desenvolver reatividade de IgE contra alérgenos de poeira doméstica. Conforme…

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Made available in DSpace on 2019-08-11T15:51:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 jos__rubens_de_andrade_disserta__o_final.pdf: 2287143 bytes, checksum: e42af13c6498abac1c01f577d45a576c (MD5) Previous issue date: 1

INTRODUÇÃO: A hepatite B crônica e a esquistossomose são prevalentes em vários países, contudo o impacto desta associação não é conhecido. Este estudo avaliou a prevalência e a morbidade desta coinfecção. MÉTODOS: 406 adultos com hepatite B crônica (HBsAg positivo > 6 meses) foram incluídos em estudo transversal. Classificou-se a hepatite B crônica como replicativa (HBVDNA 2.000 UI/ml) HBeAg positivo ou negativo, e inativa ou de baixa replicação (HBVDNA < 2.000 UI/ml). A esquistossomose foi classificada como formas hepatesplênica (EHE) e não EHE. Biópsias hepáticas foram classificadas por METAVIR. Estimou-se o risco de fibrose acentuada (METAVIR F3-4) por análises uni e multivariada. RESULTADOS: 263/406 (64,8%) eram masculinos, mediana de idade 45 anos (IIQ 35-54). 235/406 (57,9%) tinham hepatite B replicativa (66,4% HBeAg-negativo, 33,6% -positivo). 128 (31,5%) eram cirróticos. Confirmou-se esquistossomose em 124/406 (30,5%), sendo 81,5% homens, mediana de idade 47 anos (IIQ 39,5-54). 86/124 (69,4%) tinham EHE. 61,3% e 38,7% dos pacientes coinfectados tinham hepatite B replicativa e inativa, respectivamente. Pacientes com hepatite B replicativa e EHE apresentaram fibrose hepática e inflamação mais acentuadas quando comparados aos pacientes sem EHE (80,8% vs. 43,6% para METAVIR F3-F4, p<0,01; 64,0% vs. 39,8% para METAVIR A2-A3, p<0.01). Idade > 50 anos (OR=1,10, IC 95% 1,06-1,14, p<0,001), sexo masculino (OR=2,61, IC 95% 1,12-6,09, p=0,03), EHE (OR=4,56, IC 95%; 2,10-9,91; p<0,001) e alcoolismo (OR=2,46; IC 95%; 1,16-5,19; p=0,02) foram fatores independentemente associados à cirrose em pacientes com hepatite B crônica replicativa. CONCLUSÕES: A associação de hepatite B crônica replicativa e esquistossomose mansoni, forma EHE, é fator de risco para fibrose hepática acentuada, o que pode resultar em desfechos deletérios para pacientes de áreas endêmicas.

BACKGROUND: Chronic hepatitis B (CHB) and schistosomiasis are prevalent in several countries, but the impact of this association is unknown. We aimed to investigate the prevalence and the morbidity of this coinfection. METHODS: 406 adults with CHB (HBsAg positive > 6 months) were included in a cross-sectional study. CHB was classified as replicative (HBVDNA 2,000 IU/ml) HBeAg-positive or -negative, and inactive or low replicative (HBVDNA < 2,000 IU/ml). Schistosomiasis was classified as hepatosplenic (HSS) or non-HSS. Liver biopsies were scored by METAVIR. Multivariate analysis estimated the risk of severe fibrosis (METAVIR F3-4). RESULTS: 263/406 (64.8%) were male, median age 45 years (IQR 35-54). 235/406 (57.9%) had replicative CHB (66.4% HBeAg-negative, 33.6% -positive). 128 (31.5%) had cirrhosis. Schistosomiasis was confirmed in 124/406 (30.5%), being 81.5% male, median age 47 years (IQR 39.5-54). 86/124 (69.4%) had HSS. 61.3%…

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Made available in DSpace on 2019-08-14T01:13:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 projeto_top_zio__5_6_2014.pdf: 646785 bytes, checksum: 72b4458f9958ab0a4a94a483aa777ab8 (MD5) Previous issue date: 7

Estudos realizados em hospitais brasileiros mostraram que a trombocitopenia poderia ser usada como marcador da forma hepatoesplênica da esquistossomose. O objetivo do presente estudo é o de avaliar se a plaquetopenia poderia identificar os pacientes com a forma hepatoesplênica da esquistossomose em área endêmica do nordeste de Minas Gerais. A população do distrito de Topázio em Teófilo Otoni (MG), composta de 1.543 indivíduos, com prevalência da esquistossomose de 23% foi selecionada para o estudo. Todos tiveram um exame parasitológico de fezes examinado pelo método de Kato-Katz. Quatrocentos indivíduos foram admitidos ao estudo. Assim, 384 responderam o questionário padronizado. Na última semana de julho de 2012, 384 voluntários foram examinados; 13 (3,3%) não completaram os exames e foram excluídos do estudo. Eles responderam a questionário padronizado e submeteram-se a exame clínico e ultrassonográfico do abdômen (US). Coletou-se sangue para a contagem de plaquetas. Os dados foram analisados no pacote estatístico SPSS, 18.0. A esquistossomose hepatoesplênica foi classificada em quatro grupos: (Grupo 1) baço >13cm e fibrose periportal ao US; (Grupo 2) baço palpável e >13cm ao US; (Grupo 3) baço>13cm ao US; e (Grupo 4) baço palpável. Vinte um pacientes tinham a forma hepatoesplênica da esquistossomose por todas as definições (5,5%). Havia 8 pacientes no Grupo 1 (2,1%), 21 no Grupo 2 (5,5%), oito no Grupo 3 (2,1%) e 18 no Grupo 4 (4,7%). Houve diferença significativa entre a média do número de plaquetas entre os hepatoesplênicos e os controles (152.952/mm³ versus 237.275/mm³; p<0,01). Utilizando-se a curva ROC para plaquetas <143.000/mm³ a sensibilidade e a especificidade foram de 92,3% e 75,0% para o Grupo 1; 93,4% e 47,6% para o Grupo 2; 92,4% e 75,0% para o Grupo 3; 93,0% e 44,4% para o Grupo 4,respectivamente. Considerando os nossos achados, concluo que em área endêmica para esquistossomose com prevalência da doença de 23%, as plaquetas no sangue <143.000/mm³ identificam, com boa sensibilidade e especificidade regular, os pacientes com esquistossomose hepatoesplênica. Nos casos de triagem, naturalmente, a escolha deverá valorizar a sensibilidade.

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Made available in DSpace on 2019-08-11T12:29:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_fidelis_2018.pdf: 3893459 bytes, checksum: fa9d5ddbe2e4ba49fd55538e9fb02c15 (MD5) Previous issue date: 4

No Brasil, estimou-se que 8 milhões de pessoas estavam infectadas pelo Schistosoma mansoni no ano de 2000 e 30 milhões expostas ao risco de infecção. O Global Burden of Disease Study 2010 indicou que a esquistossomose é a 100ª causa de morte no Brasil, ou 3,6% do total estimado no mundo. O sistema nervoso central pode ser acometido nas infecções pelo S. mansoni. Ovos do helminto já foram observados na leptomeninge, córtex cerebral, núcleos da base, plexo coróide, cerebelo e medula espinal, sendo essa última, afetada com maior freqüência. No presente estudo, a infecção experimental em camundongos com cercárias de S. mansoni visa demonstrar a presença de granulomas formados no encéfalo e correlacionar os achados clínicos, histológicos e na ressonância magnética. Vinte e cinco camundongos Mus musculus Swiss Webster, machos, pesando de 18 a 20 gramas, foram infectados por via subcutânea, com 50 cercárias da cepa LE e 25 foram mantidos como controles (não infectados). Planejou-se o acompanhamento dos camundongos por até 160 dias pós-infecção. A eutanásia dos animais deu-se nos dias 88, 97 e 146. Confirmada a morte do animal, seguiu-se o procedimento de fixação do encéfalo pelo formol. Para recuperação dos parasitos, seguiu-se a técnica descrita por Pellegrino & Siqueira (1956). Realizadas as imagens por ressonância magnética, obteve-se informações das lesões nos planos axial, coronal e sagital. Após aquisição das imagens, realizou-se o estudo histológico para pesquisa de ovos de S. mansoni, de granulomas e de outras lesões inflamatórias. As alterações neuromotoras apresentadas foram torção cervical, torção de tronco, ausência de reação de fuga, paresia, perda de equilíbrio, ataxia e rotação (spinning). As imagens por ressonância magnética acusaram alterações na ponderação em T1 com núcleos hiperdensos rodeados por linha hipodensa nos diferentes planos. Encontraram-se ovos de S. mansoni disseminados nos hemisférios cerebrais direito e esquerdo, em regiões da leptomeninge e parênquimas cerebral, cerebelar e tronco cerebral. As amostras sugerem que os ovos alcançaram o encéfalo por via arteriolar. A reação granulomatosa epitelióide foi mais frequente na leptomeninge e em áreas de fissuras cerebrais e cerebelares. Edema e espessamento leptomeníngeo foram constatados. Os ovos observados possuíam miracídio, comprovando recente deposição no encéfalo. As células do exsudato inflamatório estão formadas por macrófagos, eosinófilos, linfócitos e células gigantes. Fibroblastos e áreas com depósitos de colágeno também estão presentes nas análises histológicas. Neste estudo descreve-se, pela primeira vez, modelo experimental da neuroesquistossomose mansoni sintomática em camundongos infectados por cercárias no subcutâneo. Houve correspondência entre as lesões encefálicas encontradas pela histologia e ressonância magnética do…

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Made available in DSpace on 2019-08-11T12:33:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_corrigida_04_2012.pdf: 1763196 bytes, checksum: 49c88e3a604606716431dd48222653f6 (MD5) Previous issue date: 8

Os ancilostomídeos são helmintos cujos estágios parasitários ocorrem em mamíferos, causando a ancilostomose ou ancilostomíase. A ancilostomose infecta cerca de 740 milhões de pessoas no mundo, principalmente nas regiões da África Sub- Saariana, Sudeste da Ásia, China, Brasil e América Central (DE SILVA et al 2003; HOTEZ et al., 2005). É considerada uma doença negligenciada, causando anemiaferropriva e hipoproteinemia, que podem causar depauperamento físico e mental principalmente em crianças em idade escolar (HOTEZ et al., 2005a; HOTEZ et al., 2005b).

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Made available in DSpace on 2019-08-13T07:15:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_vers_o_final_p_s_defesa.pdf: 2681079 bytes, checksum: c1c34207cfb2af785cae2fa1c6b50cc3 (MD5) Previous issue date: 15

Infecções por ancilostomídeos se constituem em um grave problema de saúde pública em vários locais do mundo, incluindo o Brasil. Pacientes afetados apresentam diferentes níveis de patogenia que podem estar relacionadas à carga parasitária e/ou a associações com outros parasitos, tendo em vista que as áreas endêmicas para ancilostomose apresentam sobreposição para outras parasitoses. Portanto, este trabalho teve como objetivo avaliar dois aspectos da infecção por Ancylostoma ceylanicum em hamster, o primeiro relacionado à carga parasitária e o segundo relacionado à coinfecção com o parasito Schistosoma mansoni. Na avaliação da carga parasitária foram usados inóculos crescentes de A. ceylanicum (25 L3, 75 L3, 125 L3 e 250 L3), e os animais acompanhados por 21 dias. Foi avaliado o peso, a eliminação de ovos nas fezes, hemograma, resposta humoral, análise histopatológica do intestino delgado e morfometria dos vermes adultos. A carga parasitária não alterou o estabelecimento, sobrevivência ou fecundidade dos vermes adultos, com número de ovos encontrados nas fezes proporcional a quantidade de larvas usadas no inóculo. A percentagem de vermes recuperados foi de 28,0%; 24,8%; 24,6% e 24,8%, respectivamente ao inóculo usado. Foi observada uma relação inversamente proporcional entre inóculo e o peso dos animais. Outros parâmetros que mostraram associação entre o tamanho do inóculo foram: contagem de leucócitos, eritrócitos, níveis de hemoglobina e porcentagem do hematócrito. Foi também observada alterações na histologia intestinal de acordo com o inóculo. A morfometria dos vermes adultos revelou redução significativa da largura das fêmeas na infecção realizada com 250 L3 em relação ao grupo 25 L3. Em uma segunda parte do trabalho foi avaliada a influencia da coinfecção com S. mansoni em hamsters. Foram realizados dois experimentos alternando a ordem da infecção. Foram avaliados o peso, a eliminação de ovos nas fezes, hemograma, reposta humoral (IgG), análise histopatológica do intestino delgado e morfometria dos granulomas. Foi observado que a cronologia da infecção influenciou os resultados em relação à perda de peso nos grupos coinfectados. Quando o A. ceylanicum antecedeu a infecção por S. mansoni os animais apresentaram a mesma redução de peso, que foi observada no grupo infectado apenas por A. ceylanicum, o que não ocorreu na coinfecção precedida por S. mansoni. Embora A. ceylanicum e S. mansoni sejam hematófagos não houve exacerbação da anemia no grupo coinfectado. O estabelecimento da segunda infecção não foi prejudicado pela infecção prévia, em nenhum dos experimentos realizados, entretanto, houve redução do número de adultos recuperados quando usados na segunda infecção. Não foi observada uma correlação positiva entre a quantidade de ovos de S. mansoni retidos no fígado, ou eliminados nas fezes…

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Made available in DSpace on 2019-08-14T20:45:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_de_doutorado_g._magela.pdf: 4319438 bytes, checksum: 277d73b2898844e690ad8dd69d3bf0d1 (MD5) Previous issue date: 24

A injeção parenteral de proteínas previamente administradas por via oral inibe o desencadeamento de respostas imunes à proteínas não especificamente relacionadas e bloqueia reações inflamatórias de origem imunológica, tais como doenças auto-imunes. Este efeito inibitório que denominamos efeitos indiretos da tolerância oral também é conhecido como bystander suppression. Neste trabalho mostrou-se que a injeção i.p. de OVA+Al(OH)3 minutos antes da injeção i.v. de ovos de Schistosoma mansoni em camundongos tolerantes a OVA bloqueia a formação de granulomas pulmonares. Demonstrou-se que há menor expressão de ICAM-1 no parênquima pulmonar adjacente aos granulomas de camundongos tolerantes à OVA e imunizados com OVA+Al(OH)3 em comparação com grupos controles. Aos 18 dias após a inoculação dos ovos, não foram observadas diferenças na intensidade de expressão dea CD3, CD4, F4/80 e -SMA nos granulomas de grupos tolerante e controles. A redução dos granulomas após a re-exposição parenteral de proteínas toleradas não foi correlacionada com alterações nos níveis de citocinas Th1/Th2 presentes no soro ou em extratos pulmonares

Parenteral injection of tolerated proteins into orally tolerant mice inhibits the initiation of immunological responses to unrelated proteins and blocks severe chronic inflammatory reactions of immunological origin, such as autoimmune reactions. This inhibitory effect wich we have called indirect effects of oral tolerance is also known as bystander suppression. Herein, we show that i.p. injection of OVA + Al(OH)3 minutes before i.v. injection of Schistosoma mansoni eggs into OVA tolerant mice blocked the increase of pulmonary granulomas. In addition, the expression of ICAM-1 in lung parenchyma in areas outside the granulomas of OVA orally tolerant mice was significantly reduced. However, at day 18 after granuloma induction there was no difference in immunofluorescency intensity to CD3, CD4, F4/80, and -SMA per granuloma area of tolerant and control groups. Reduction of granulomas by reexposure to orally tolerated proteins was not correlated with a shift in Th-1/Th-2 cytokines in serum or lung extract

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Made available in DSpace on 2019-08-10T03:48:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_final_adriana.pdf: 168139 bytes, checksum: ccda5d9b2c9db2a20f862885e88684bc (MD5) Previous issue date: 26

Embora seja conhecido o papel fundamental da resposta Th2 na proteção contra nematódeos, sabe-se que os mecanismos responsáveis pelo controle do parasito são diferentes para cada espécie. Em camundongos infectados por Strongyloides venezuelensis foi demonstrado a importância da sinalização via IL- 4R/Stat 6 na indução de resposta protetora, entretanto a participação das citocinas IL-4, IL-13 e IL-33 neste mecanismo ainda não foi estabelecida, sendo foco principal deste trabalho. Para esta finalidade, foram utilizados camundongos deficientes da produção de IL-4 (IL-4-/-) infectados primariamente ou re-infectados por S. venezuelensis. Após a infecção, camundongos IL-4-/- e selvagens foram tratados com anticorpo neutralizante de IL-13 ou com IL-33 exógena. Em comparação com os camundongos não deficientes, camundongos IL-4-/- apresentaram aumento significativo de carga parasitária e atraso na eliminação do parasito sem alterações nos mecanismos de fecundidade. Em infecções primárias, a deficiência da produção de IL-4 acarretou em uma menor proporção de células CD4+ no linfonodo mesentérico e em diminuição de produção de IL-10, IL-5 e IFN- na mucosa intestinal. Além disso, a ausência de IL-4 impediu a produção de IgE, e diminuiu os níveis de produção de EPO e MPO. Em animais re-infectados a deficiência da produção de IL-4 acarretou em aumento da proporção de células CD4+ no linfonodo mesentérico e também em maior detecção de IL-10 em células CD4+ e na mucosa intestinal. Junto a isso, a deficiência de produção de IL-4 acarretou na ausência de produção de IgE em menor produção de IgG1 e menor desgranulação de neutrófilos no intestino. A neutralização de IL-13 durante a infecção por S. venezuelensis não interferiu na carga parasitária mas diminuiu a fecundidade dos parasitos e acarretou em uma menor produção de IgM por camundongos IL-4-/-. e em um aumento de peroxidase de eosinófilos frente a infecção. A administração de IL-33 não interferiu na carga parasitária e na fecundidade de S. venezuelensis, entretanto aumentou a produção de IgE por camundongos IL-4-/- frente a infecção. Os resultados indicam que o controle da infecção por S. venezuelensis é mediado por mecanismos dependente de IL-4 e não dependentes de IL-13 ou IL-33, sendo que IL-13 participa de mecanismos anti-fecundidade.

Even though the importance of Th2 response in protection against nematodes is well established, the effector mechanism controlling the parasite can be different in each species. It was demonstrated in mice infected with Strongyloides venezuelensis the importance of IL-4R/Stat 6 activation in the induction of a protective response, however the involvement of IL-4, IL-13 and IL- 33 in this mechanism has not yet been established, being the main focus of this work. For this purpose, we used mice deficient in the production of IL-4…

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Made available in DSpace on 2019-08-10T19:18:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 a_participa__o_do_linf_cito_b_na_resposta_imune_protetora_induzida_pela__infec__o_por_strongyloides_venezuelensis_em_camun_1.pdf: 2662609 bytes, checksum: ab7dd8b256ea230a135c893ee9d2d3c5 (MD5) Previous issue date: 5

A estrongiloidíase é uma enfermidade que afeta de 30 a 70 milhões de pessoas em 70 países no mundo. O desenvolvimento dessa infecção em uma parasitose assintomática ou na forma disseminada, potencialmente fatal, é dependente da reposta imune do hospedeiro. Evidências epidemiológicas e experimentais indicam proteção do hospedeiro no caso de desenvolvimento de uma resposta imune do tipo Th-2. Para elucidar a importância do linfócito B e dos anticorpos na resposta imune protetora contra Strongyloides venezuelensis, camundongos deficientes na produção de IgM (MT-/-) e seus controles selvagens (WT) foram comparativamente avaliados durante a infecção primária e secundária por esse nematódeo. Embora a eliminação do parasito tenha sido tardia nos animais MT-/-, esses foram capazes de controlar a infecção primária e a re-infecção, sugerindo que linfócitos B e/ou anticorpos participam do mecanismo protetor contra infecções por S. venezuelensis, mas não são essenciais para o mesmo. Nos camundongos selvagens infectados, a concentração sérica de IgE e a reatividade relativa da IgM e IgG1 aumentam aos 10 dias de infecção, coincidindo com a redução na carga parasitária. Como esperado, a infecção por S. venezuelensis não induziu produção de IgM nos camundongos MT-/-, porém, houve uma pequena produção de IgG1 e IgE em alguns camundongos deficientes infectados. A transferência de imunoglobulinas do soro de camundongos WT para MT-/- em diferentes pontos no curso da infecção por S. venezuelensis restaurou a cinética de eliminação do parasito nos animais deficientes. Esses dados indicam a participação da imunoglobulina no processo de eliminação do parasito. Também foi avaliado o efeito da ausência da produção de IgM no estabelecimento da resposta imune induzida pela infecção por S. venezuelensis. A redução no amadurecimento de linfócitos B nos camundongos MT-/- foi indiretamente confirmada através do menor número de linfócitos e maior proporção de células CD4+ recuperadas do linfonodo mesentérico (MLN) desses animais. Essa redução de linfócitos B resultou em menor número de linfócitos produtores de IL-4 no MLN, sugerindo que essas células são fonte importante dessa citocina no início da infecção. Além disso, no MLN dos camundongos MT-/- a infecção induziu maior número de células CD4+ produtoras de IFN- e menor número de células Treg quando comparado aos animais WT infectados, porém não houve diferença no número de células CD4+ produtoras de IL-4 e IL-10 entre os grupos experimentais. A produção de citocinas no intestino delgado, sítio da infecção, dos animais WT e MT-/- infectados foi semelhante no início da infecção. Porém, no final da infecção primária e início da re-infecção, a produção dessas citocinas foi maior nos…

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Made available in DSpace on 2019-08-13T17:20:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_de_mestrado_de_pedro_coura_filho.pdf: 2764461 bytes, checksum: c111f62c480614b3d55a7f43e7107e20 (MD5) Previous issue date: 9

Um programa de controle da esquistossomose foi desenvolvido entre 1974 e 1987 em Peri-Peri, área de endemicidade média. Foram realizadas aplicações trimestrais de, moluscicida (niclosamida) na coleção hídrica da região e tratamento específico (oxamniquine) anual, por via oral, dos indivíduos que eliminavam ovos de Schistossoma mansoni nas fezes (método Kato-Katz). De 1974 a 1984 as medidas de controle foram realizadas pela equipe do Centro de Pesquisas René Ranchou (CPqRR-FIOCRUZ). Neste período a prevalência de indivíduos infectados baixou de 43,7 para 15,2%, a incidência anual de 20,3 para 8,2%, a média geométrica do número de ovos por grama de fezes de 281 +- 4,53 para 49,70 +-3,00, a percentagem de indivíduos com a forma hepatoesplênica (HE) de 5,6 para 0,0%, o índice de infecção dos caramujos (Biomphalaria glabrata) de 14,3 para 1,5% (ocorrência em focos isolados) e, em média, 72,3% dos residentes e 50,0% dos infectados na área foram examinados e tratados pelo CPqRR. Em 1984, as medidas foram incluídas na rede básica de saúde local. Entre 1984 e 1987, com a municipalização das medidas, a prevalência passou de 15,2 para 4,4%, a incidência de 8,2 para 1,0%, a média geométrica do número de ovos de 49,70 +- 3,00 para 135,64 +-2,94, o índice de caramujos infectados pelo S. mansoni continuou em torno de 1,5% e em média 80,1% dos residentes e 100,0% dos infectados foram examinados coproparasitologicamente e tratados, respectivamente. Apesar dos resultados obtidos nesta área, a municipalização de programa de controle da endemia só deve ser incentivado em áreas endêmicas onde ocorre a decisão política local, recuros (técnico e humano) e supervisão técnica adequada no nível estadual.

A shistosomiasis control program was developed during the period between 1984/87 in Peri-Peri MG. Trimontly, application of molluscicide (niclosamide) was done in the water collection and the individuals which were eliminating Schistosoma mansoni eggs in the feces (KATO-KATZ method) were treated with oxamniquine yearly. From 1974 to 1984 the control measures were done by the Centro de Pesquisas René Ranchou (CPqRR-FIOCRUZ) satff. During this period, the prevalence of infected people decreased from 43.5 to 15.3%, the anual incidence from 20.3 to 8.2%, the geometric mean of the number of eggs per gram of feces from 281.30 +-4.53 to 49.70 +- 3.00, the hepatosplenic form (HE) cases from 5.6 to 0.0%, the infection in B. globrata snails from 14.3 to 1.50% and, 72.3% of the residents and 50.0% of infected people in the area were examined and treated by the CPqRR satff. In 1984 the measures were included in the local health basic network. Between 1984 and 1987, with the municipalization of the measures, the prevalence turned from 15.2 to 4.4% the incidence from 8.2 to 1.0%, the geometric mean of the number of…

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Made available in DSpace on 2019-08-12T19:48:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_de_mestrado_de_henrique_leonardo_guerra.pdf: 2352766 bytes, checksum: 06f3beb5d8cf6956c8c1d9ca3b19f1b9 (MD5) Previous issue date: 5

Um estudo cross-seccional da esquistossomose mansoni foi desenvolvido em São José do Acácio (município de Engenheiro Caldas, Minas Gerais) com o objetivo de avaliar a distribuição dos indicadores da esquistossomose (prevalência, intensidade da infecção e distribuição de formas clinicas) na população, descrever os padrões de contatos com éguas naturais desta população e determinar os fatores de risco para infecção pelo Schistosoma mansoni nesta área endêmica. A população elegível para o estudo foi constituída por todos os residentes na zona urbana do distrito de São José do Acácio. A população total da localidade era de 766 indivíduos, dos quais 678 (88,5%) foram submetidos ao exame de fezes, 627 (81,9%) ao exame clinico e 746 (97,4%) a pesquisa sócio-demográfica. A infecção pelo S.mansoni foi determinada através de um exame de fezes pelo método KATO/KATZ. A pesquisa sócio-demográfica e de contato com águasnaturais foi feita de forma duplo-cego, através de entrevista, utilizando-se questionários padronizados. Para a pesquisa de fatores de risco, as características sócio-demográficas e os motivos de contato com águas naturais, entre os que eliminavam ovos de S.mansoni nas fezes (casos), foram comparadas as dos que não apresentavam estes ovos ao exame de fezes (controles). A prevalência da infecção foi de 26,2%, a média geométrica de ovos foi 60,3 (IC 95% = 4,4 -826,3) por grama de fezes e 2,4% dos infectados apresentavam esplenomegalia. Cinqüenta e um por cento da população estudada relataram pelo menos um contato com águas naturais nos 60 dias que antecederam a entrevista: 34% para atravessar córregos, 25% para tomar banho e/ou nadar, 17% para pescar, 17% para trabalhar na lavoura, 4% para retirar areia, 2% para lavar roupa e 1% para buscar água para o domicilio e/ou lavar vasilhas. As seguintes variáveis apresentaram associações independentes com a infecção: idade (Odds Ratios ajustados pela regressão logística = 3,0, 12,1 e 4,2 para as faixas etárias de 10-14, 15-34 e 35 ou mais, respectivamente), ausência de fonte de água (cisterna) no domicilio (OR = 2,8), sexo masculino (OR = 2,6) e contatos com águas naturais para nadar e/ou tomar banho (OR = 1,9 e 2,3 para freqüência semanal e diária, respectivamente) e para pescar (OR = 1,2 e 4,6 para freqüência semanal e diária, respectivamente). Verificou-se que a ausência de cisterna no domicilio era o fator de risco mais importante para infecção pelo S.mansoni na área estudada (Risco atribuível = 0, 2488), seguida pelos contatos para nadar e/ou tomar banho (RA = 0, 1526 e 0,0599 para freqüência semanal e diária respectivamente) e pescar (RA = 0,0289 e 0,0886 para freqüência semanal e diária, respectivamente) . Isto indica que as medidas de prevenção da infecção pelo S. mansoni nesta área endêmica deveriam priorizar a expansão das…

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Made available in DSpace on 2019-08-12T18:34:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_michael_waisberg_e_anexos.pdf: 19900491 bytes, checksum: ad0c5e2c551b76c4d60e25bce726dfbe (MD5) Previous issue date: 6

O trematódeo parasita Schistosoma mansoni é um dos principais agentes causadores daEsquistossomose, uma doença que afeta aproximadamente 200 milhões de pessoas,principalmente em países em desenvolvimento. Uma vez que a maior parte da patologiacausada é associada com os ovos produzidos pelas fêmeas, conhecer os mecanismosenvolvidos na oogenêse e maturação sexual é um passo importante em direção aodescobrimento de novos alvos terapêuticos para tratamento farmacológico efetivo dessaparasitose. Para estudar os transcritos de S. mansoni associados com a maturação sexual,ovoposição e efeitos do sexo do hospedeiro, nós comparamos a expressão gênica deparasitos sexualmente maduros e imaturos provenientes de hospedeiros do sexomasculino e do sexo feminino usando microarranjos de DNA. Nossos resultados mostramque 265 transcritos são diferencialmente expressos em fêmeas adultas e 53 em machosadultos quando vermes maduros e imaturos são comparados. Dos genes diferencialmenteexpressos, 55% são expressos em níveis mais elevados em fêmeas pareadas enquanto os45% restantes são mais expressos em fêmeas não pareadas, e 56.6% são expressos emníveis mais elevados em machos pareados enquanto os 43.4% são mais expressos emparasitos imaturos. Os resultados também mostram que o sexo do hospedeiro causaexpressão gênica diferencial de 11 genes em parasitos fêmeas e de 134 em parasitosmachos. Dos genes diferencialmente expressos em fêmeas e relacionados ao sexo dohospedeiro, 10 foram mais expressos em fêmeas provenientes de camundongos machos.Dos 134 genes diferencialmente expressos em parasitos machos, 79 (59%) foram maisexpressos em parasitos de camundongos fêmeas, sugerindo que existe uma comunicaçãoentre o hospedeiro e o parasito e que esta é mais frequente quando eles são de sexos14opostos. Uma grande variedade de transcritos associados ao sexo do hospedeiro e àmaturação foram identificados, portanto permitindo a aquisição de novas informaçõessobre a comunicação entre parasitos de sexos opostos, assim como informações sobre acomunicação entre hormônios do hospedeiro e esquistossomas.

The parasitic trematode Schistosoma mansoni is one of the major causative agents ofSchistosomiasis, a disease that affects approximately 200 million people, mostly indeveloping countries. Since much of the pathology is associated with eggs laid by thefemale worm, understanding the mechanisms involved in oogenesis and sexualmaturation is an important step towards the discovery of new targets for effective drugtherapy. In order to study gene transcripts associated with sexual maturation, ovipositionand host sex effect we compared the gene expression profiles of sexually mature andimmature parasites from both male and female mice using DNA microarrays. Our resultsshow that 265 transcripts are differentially expressed in adult females…

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Made available in DSpace on 2019-08-11T07:17:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_caroline.pdf: 940836 bytes, checksum: 37f3a777c7229392184bdcf0713074f1 (MD5) Previous issue date: 17

Alterações funcionais pulmonares e sintomas pulmonares têm sido descrito em pacientes infectados por helmintos com ciclo pulmonar. Previamente foi demonstrado que a infecção com nematódeo Strongyloides venezuelensis induz um significante aumento na hiperreatividade brônquica em ratos infectados. O objetivo do presente estudo foi testar a hipótese que a broncodilatação durante a fase de migração da larva pelo pulmão favorece o ciclo parasitário e o numerode vermes que alcança o intestino. Para este propósito, ratos infectados com S. venezuelensis foram tratados com salbutamol durante as primeiras 48 horas após a infecção. A dose de salbutamol utilizada (0.25 mg/mL por 10 min a cada 4 horas) preveniu mudanças na função pulmonar durante a migração parasitária. Isto foi acompanhado por um aumento de parasitos nos pulmões e intestino. Em seguida investigamos os mecanismos da hiperreatividade brônquica e observamos que IL-13 não é essencial para essa alteraçãofuncional pulmonar, mas é importante para produção de ovos no intestino. Por outro lado, as fibras nervosas sensoriais sensíveis a capsaicina mostram relevante papel na hiperreatividade brônquica independente da inflamação pulmonar.

Alterations in lung function and pulmonary symptoms have been described in patients infected with helminthes with a lung cycle. We have previously shown that infection with the nematode Strongyloides venezuelensis induced a significant increase in airway hyperreactivity in infected rats. The aim of the present study was to test the hypothesis that bronchodilation during the lung phase of parasite migration would favor completion of the life cycle and infection indices. For this purpose, Strongyloides venezuelensis infected rats were treated with salbutamol during the first 48 h after the nematode infection. At the dose used (0.25 mg/mL for 10 min every 4 h), treatment with salbutamol preventedchanges in lung function during the parasite migration. This was accompanied by a significant increase in parasite burden, as assessed in the lung and the small intestine. We also investigated the mechanisms of airway hyperresponsiveness and observed that IL-13 does not have effect on this lung alteration. On the other hand, sensory C fibers have an important role in the airway hyperresponsiveness independent of lung inflammation

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Made available in DSpace on 2019-08-13T23:44:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_de_doutorado_luciene_barbosa___cultivo_prim_rio_do__rg_o_hematopoi_tico__de_moluscos_do_g_ner.pdf: 7225952 bytes, checksum: 7a1458ec4cd556225b7c1dc2bbee018a (MD5) Previous issue date: 18

ResumoPela primeira vez conseguiu-se o cultivo primário do órgão hematopoiético de caramujos do gênero Biomphalaria.O objetivo geral desse trabalho foi obter cultura primária de células do órgão hematopóietico (APO) de caramujos B. glabrata e B. tenagophila ( linhagens Cabo Frio, suscetível e Taim resistente ao Schistosoma. Mansoni) e caracterizá-las funcional e morfologicamente. A cultura primária de tecido hematopoiético de Biomphalaria é original e através desta será possível obter as células hematopoiéticas em grandes quantidades e em meio definido. Esta nova metodologia permitirá estudar a morfogêneses destas células, sua ultraestrutura, composição e comportamento frente a vários estímulos, inclusive frente a esporocistos.Três tipos celulares morfologicamente distintos, nomeados de tipo I, II, e,III, cresceram na cultura. As células tipo I que predominam na cultura celular,são arredondadas com núcleo grande para o tamanho do citoplasma. As células tipo II possuem relativamente mais citoplasma que o tipo I. A presença de pseudópodes, também foi observada. O último tipo celular, denominado tipo III são refringentes e com núcleo não definido e menos abumdante, que as outras. Divisão celular atípica foi observada, com núcleo duplicando sem citocinese.Nas culturas realizadas com Apo de caramujos infectados (após 24 horas de infecção) encontramos os mesmos tipos celulares encontrados nas culturas de Apo sem infecção, ou seja, tipos I, II e III. Não observamos nada de diferente em relação às culturas de caramujos não infectados.Em todos os experimentos em que as células da cultura foram colocadas em contato com Zimosan foi observado a dispersão das células em direção a essas partículas.Em contato com LPS,foi observada com 72 horas nas culturas a presença de um envoltório celular que se assemelha a uma cápsula e células tipo III. As células de B. tenagophila de Cabo Frio apresentaram uma melhor resposta ao antígeno. Um fato interessante observado em todas as culturas realizadas com caramujos do gênero Biomphalaria foi a transformação das células tipo I em células tipo III, com 7 dias ou mais. Entretanto, quando as células da cultura foram colocadas em contato com SEA ou LPS, as células tipo III surgem em 48 ou 72 horas respectivamente.Não houve alterações celulares frente a miracídios, com todas as linhagens testadas. Fato que permite a inferência que os miracídios, ao contrário dos esporocistos não estimulamas células hemocitárias.As células de todas as espécies estudadas foram positivas para as lectinasWGA, LPL, PNA. B. glabrata não teve células positivas para Com A, entretanto as duas linhagens de B. tenagophila estudadas apresentaram positividade para esta lectina.Nas células de todas as linhagens estudadas foi possível a…

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Made available in DSpace on 2019-08-14T00:15:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_cintia_ajp_2009.pdf: 7454750 bytes, checksum: 38aa490932ba3898300676a0829abbe4 (MD5) Previous issue date: 31

As espécies Biomphalaria glabrata, B. tenagophila e B. straminea são Planorbideos de água doce com importância médica relevante no Brasil, pois são os hospedeiros intermediários naturais de Schistosoma mansoni. Biomphalaria tenagophila oriunda da reseva ecológica doTaim (RS), é uma linhagem completamente resistente a infecção pelo parasito, sendo capaz de destruií-lo poucas horas após a penetração do miracídio no interior do molusco, embora o mecanismo de lesão não sejam conhecido. Apesar dos trabalhos mostrarem que, entre oselementos do sistema interno de defesa dos moluscos, os hemócitos são os principais efetores no processo de eliminação do parasito, trabalhos preliminares demonstraram que a inoculação da fração acelular da hemolinfa de B. tenagophila Taim resistente resulta no aumento da resistência de B. tenagophila Cabo Frio suscetível a infecção pelo S. mansoni, indicado que fatores solúveis da hemolinfa também participam do mecanismo de proteção da resposta protetora desenvolvida pelo molusco. Neste trabalho foi possível confirmar a participação da fração acelular da hemolinfa de B. tenagophila Taim na destruição de esporocistos de S. mansoni em sistema de cultivo do parasito in vitro. Neste sistema, a adição de hemolinfa acelular, especialmente a de Taim, às culturas de esporocisto de S. mansoni resulta em aumento da mortalidade dos esporocistos quando comparado às culturas de esporocistos contendo apenas meio CBSS suplementado ou meio e hemolinfa acelular de B. glabrata. Alem da ação direta sobre esporocistos, a acombinação da fração acelular de Taim com os hemócitos de B.tenagophila de Cabo Frio aumenta significativamente a mortalidade dos esporocistos e o efeito é espécie-especifico. Assim, os dados aqui apresentados indicam que ahemolinfa acelular de caramujos da linhagem Taim atua diretamente na destruição dos esporocistos provocando lesão de tegumento do parasito que permitiu a penetração do XIV marcador fluorescente, Hoechst 33258, e indiretamente auxiliando os granulócitos noreconhecimento do parasito. O mecanismo pelo qual a fração acelular da hemolinfa de B .tenagophila Taim destroe o parasito, sem a aprticipação dos hemócitos, não está definido na literatura. Há evidências da presença de atividade de proteases na hemolinfa de Biomphalaria, embora nenhum estudo tenha sido conduzido para evidenciar a participação de aividade protease na interação entre B.tenagophila infectado com S. mansoni. Neste trabalho também foi avaliado a participação de proteases presentes na hemolinfa de B.tenagophila Taim e sua associação no processo de destruição dos esporocistos de S. mansoni. Nososo dados mostram atividade proteólitca, especialmente serino- e cisteino-protease na hemolinfa de todas as linhagens de caramujos testadas neste trabalho experiemental, porém a atividade encontrada na hemolinfa…

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Made available in DSpace on 2019-08-11T20:59:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dias__s.r.c._2011.pdf: 2279732 bytes, checksum: b8902b168fe30d9a25a113453da7f423 (MD5) Previous issue date: 1

Este trabalho teve como objetivo avaliar, no hamster, os efeitos imuno-parasitológicos da administração de fármacos imunomoduladores na infecção por Ancylostoma ceylanicum. Foram avaliadas quatro classes de drogas (imunossupressores, anticorpos anti-linfocitários, anti-inflamatórios e anti-histamínicos). Entre os imunosspressores, foram testadas a ciclosporina A (CsA) e a prednisolona. Os resultados mostraram que o tratamento com CsA, não interfere na ancilostomíase experimental. Já o tratamento com prednisolona alterou a regulação do sistema imune, afetando diretamente a integridade intestinal e a postura de ovos de A. ceylanicum. O tratamento com anticorpos anti-CD3, não alterou o quadro de infecção por A. ceylanicum em hamsters; no entanto, quando associado à prednisolona, observou-se que o anticorpo específico ameniza o quadro de inflamação. Não obtivemos sucesso em mostrar as prostaglandinas como mediadores inflamatórios de importância na ancilostomíase. Não foram observadas diferenças em aspectos parasitológicos e imunológicos entre animais tratados ou não com ácido acetilsalicílico, diclofenaco ou etoricoxibe e infectados com A. ceylanicum. Os animais tratados com drogas anti-histamínicas (loratadina e ranitidina) apresentaram sinais clínicos graves e foram sacrificados após 24 dias de infecção. Observamos um aumento na eliminação de ovos e o número de eosinófilos e neutrófilos periféricos nos animais tratados com a combinação de drogas. Mostramos que fármacos imunossupressores são drogas que, não necessariamente suprimem a resposta efetora do organismo Th1 ou Th2 mas são responsáveis por favorecer a regulação do processo de resposta imune efetora. Portanto, a imunorregulação exacerbada da resposta do organismo leva a um desequilíbrio na infecção por A. ceylanicum no intestino, levando a quadros exacerbados de inflamação intestinal e conseqüente prejuízo ao desenvolvimento dos vermes adultos e à postura de ovos. O aumento da inflamação intestinal, decorrente do excesso de regulação da resposta imune, associado à diminuição do número de células caliciformes é responsável pelo aumento da perda de mucosa intestinal. Neste trabalho, mostramos um comportamento inverso entre o número de células caliciformes e inflamação intestinal: quanto mais células caliciformes, menor inflamação tecidual. Dessa forma, as células caliciformes estariam associadas à proteção da mucosa intestinal na infecção por A. ceylanicum.

This study aimed to evaluate, the effects of immunomodulatory drugs upon the immune response and parasitological patterns of hamsters infected with Ancylostoma ceylanicum. Four classes of drugs (immunosuppressants, anti-lymphocyte, anti-inflammatory andantihistamines drugs) were used in this study. Among the imunossupressors cyclosporin A (CsA) and prednisolone were tested. The results showed that…

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Made available in DSpace on 2019-08-14T01:58:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 doutorado_339_tulio_santos_set2000.pdf: 2945306 bytes, checksum: 43b3f443ae71619d7948517532a77a9c (MD5) Previous issue date: 27

Schistosoma mansoni é um trematódeo digenético que causa a esquistossomose, doença parasitária que constitui um importante problema de saúde pública no Brasil e em muitos outros países do mundo. O Projeto Genoma de S. mansoni teve início em 1992 como uma iniciativa brasileira que visa à descoberta de novos genes do parasita para o desenvolvimento de novas drogas e vacinas. No início do programa, centenas de Etiquetas de Sequência Transcritas (ESTs) foram geradas a partir de uma biblioteca de cDNA de vermes adultos. Entretanto, S. mansoni tem um complexo ciclo de vida o que tornou necessário a expansão do programa de descoberta de novos genes para outros estágios de desenvolvimento do parasita. No presente trabalho, oito bibliotecas de diferentes estágios do desenvolvimento do parasita, todas construídas utilizando-se o sistema ZapII, foram excisadas em massa para a obtenção de moldes de cDNA de fita dupla para que fosse possível a geração de grandes números de ESTs a partir de cada uma delas. A qualidade dos transcritos das bibliotecas excisadas foi então avaliada. Ao menos 30 colônias de cada biblioteca foram selecionadas para avaliação do tamanho médio dos insertos por PCR. A maior parte deles tinha um tamanho médio maior do que 500 pb. Na maior parte das bibliotecas menos 20% dos clones eram de sequências não informativas e mais de 50% deles eram de novos genes. Quando se considera apenas os genes presentes em mais de uma biblioteca, um total de 466 genes únicos foi obtido, o que corresponde a 427 genes novos de S. mansoni. Dos genes únicos, 20,2% foram identificados com base na sua homologia com genes de outros organismos, 8,3% eram genes já conhecidos do parasita e 71,5% do total era de genes desconhecidos. Após estas avaliações iniciais, nossos esforços foram direcionados para a cercária, a forma larvária do parasita que infecta o homem e outros vertebrados. Duas bibliotecas de cDNA de cercárias de S. mansoni foram examinadas e sequências parciais foram obtidas de 957 clones selecionados ao acaso. Baseado em buscas por homologia, 551 (57,6%) das ESTs geradas não tinham homólogos nas bases de dados públicas enquanto que 308 (32,2%) foram identificadas totalizando 859 ESTs. As 98 restantes (10,2%) eram ESTs não informativas (RNA ribossomal e sequências mitocondriais não codificantes). Através de análises de clusters, fomos capazes de identificar 453 genes diferentes. Cento e dezenove genes identificados foram agrupados em 11 categorias funcionais onde genes associados com o metabolismo de energia foram os mais abundantes (13%) e diversos. A diversidade e a abundância de genes associados com a maquinaria de transcrição e tradução e com funções regulatórias e de sinalização celular também foram marcantes. Um transcrito de paramiosina foi identificado indicando que este gene não é expresso…

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Made available in DSpace on 2019-08-12T21:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tesevivianevasconcelos.pdf: 5042189 bytes, checksum: 296468e2f0f339abe56c62381f9adb6e (MD5) Previous issue date: 30

Resumo Angiostrongylus vasorum  é um nematóide parasito cujas formas adultas podem ser encontradas no sistema circulatório de cães domésticos e canídeos silvestre s. Cães infectados por A. vasorum podem apresentar diversas manifestações clínicas podendo levar o animal ao óbito. Os testes padronizados para o diagnóstico sorológico utilizando antígeno bruto de parasito adulto de  A. vasorum não são considerados ideais. A identificação e purificação de proteínas espécie-específica é de grande importância para obter maiores índices de sensibilidade e especificidade nos testes de diagnóstico. Neste estudo foram utilizadas amostras de soro de 20 cães infectados experimentalmente com larvas de terceiro  estádio (L3) e amostras de soro de 60 cães infectados naturalmente por outros helmintos gastrointestinais para a separação e identificação das proteínas espécie-especificas . Immunoblotting revelou reatividade para. IgG, IgM, IgA e IgE contra proteínas de A. vasorum  com peso molecular de 18 a 209 KDa. As proteínas de 51,63,92 e 209 KDa não foram reconhecidas por anticorpos IgG presentes no soro de cães naturalmente infectados por outros helmintos. Anticorpos específicos anti-A. vasorum foram adsorvidos por imunoafinidade e acoplados em resima Sepharose proteína A para a purificação de proteínas específicas. A proteína de 51 KDa foi obtida. O teste de Elisa demonstrou alta reatividade espécie-específicas com soro de cães experimentalmente  infectados por A. vasorum obtendo um índice de 100% de sensibilidade e especificidade.

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Made available in DSpace on 2019-08-09T17:27:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tesedoutorado.pdf: 953923 bytes, checksum: 7b867ac6001b5c206dff00eb600b785a (MD5) Previous issue date: 9

No período de maio de 2003 a abril de 2006, foram pesquisadas a dinâmica de populações de Lymnaea columella e sua taxa de infecção natural por Fasciola hepatica em uma várzea no município de Itajubá, Minas Gerais. Uma criação do molusco foi estabelecida no laboratório a partir de posturas dos espécimes coletados, visando a manutenção do ciclo do parasito e a realização de infecções experimentais. Testes de suscetibilidade foram realizados para verificar a influência de diversos fatores: o efeito da variação do tamanho da concha, do número de miracídios utilizados para a infecção, a eficiência de associações simpátricas e alopátricas do helminto com o hospedeiro intermediário, a suscetibilidade de moluscos provenientes de cinco localidades diferentes (Itajubá, MG, Jaboticatubas, MG, Rio Doce, MG, Pelotas, Rio Grande do Sul, e Fortaleza, CE) e a suscetibilidade de moluscos expostos a miracídios obtidos a partir de ovos provenientes de hospedeiros bovinos e coelhos. Foi verificado se o molusco Physa marmorata proveniente de Itajubá se infecta experimentalmente com F. hepatica. Foi observado um padrão na variação de populações de L. columella. As populações mostraram um aumento entre os meses de junho e outubro, e uma diminuição nos meses seguintes. A taxa média de infecção natural de L. columella com F. hepatica foi de 1,7%, sendo que o mês de maior prevalência foi dezembro de 2004 (18,8%). Moluscos com menor tamanho de concha apresentaram maior suscetibilidade à infecção por F. hepatica. Não foi observada uma relação entre o número de miracídios e o sucesso da infecção, utilizando-se de 1 a 4 miracídios. Foram encontradas diferenças entre as suscetibilidades de moluscos provenientes de diversas localidades, sendo que os moluscos de Jaboticatubas, MG, apresentaram a maior suscetibilidade entre os moluscos testados, e os moluscos de Pelotas, RS, a menor. Associações alopátricas foram mais eficientes em moluscos de Pelotas, mas menos eficientes nos de Itajubá. Não foram encontradas formas larvárias de F. hepatica nos espécimes de P. marmorata expostos a miracídios do trematódeo. O ciclo da Fasciola hepatica foi fechado em laboratório em coelhos. Os moluscos infectados com miracídios provenientes de hospedeiros bovinos apresentaram maior número de positivos que os infectados com miracídios provenientes de coelhos, mas a média do número de cercarias e rédias obtida foi menor.

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Made available in DSpace on 2019-08-10T11:20:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 doutorado_thales_augusto_bar_ante_parasitologia_ufmg_2006.pdf: 7175322 bytes, checksum: 9be207e1ceff39142e43aaccf802ff5a (MD5) Previous issue date: 13

RESUMOAngiostrongylus vasorum é um nematóide parasito de canídeos domésticos e silvestres, cuja forma adulta pode ser encontrada no ventrículo direito, artérias pulmonares e ramificações. O ciclo envolve uma fase no ambiente e a participação de caramujos aquáticos e terrestres como hospedeiros intermediários. No presente trabalho objetivou-se determinar os locais de penetração e a via migratória de A. vasorum em Biomphalaria glabrata e avaliar a reação perilarvar, em diferentes pontos da infecção, especificando a composição celular envolvida. Os aspectos inerentes à relação parasito-hospedeiro, tanto no que tange aos mecanismos envolvidos na penetração, como aqueles relacionados à emergência de larvas infectantes (L3) para o ambiente. Também foi elucidada a via migratória que pode ser descrita de duas maneiras distintas, dependendo da via de penetração das larvas de primeiro estádio (L1). À análise dos cortes histológicos, verificou-se que a infecção ocorre pela penetração de L1 pelas partes moles dos moluscos, atingindo a camada fibromuscular da região cefalopodal, onde completam o desenvolvimento até L3. Alternativamente, pode ocorrer a ingestão de L1, que necessariamente penetra na mucosa intestinal, podendo atingir as vísceras quer pela penetração direta ou carreadas pela hemolinfa. Verificou-se ainda que o desenvolvimento até L3 pode ocorrer em diversos órgãos e tecidos do molusco, e estes processos (infecção e desenvolvimento) são diretamente influenciados pela temperatura durante a infecção e manutenção dos moluscos. Pode-se verificar que a partir de 4h ocorrem alterações significativas na composição celular da hemolinfa, em resposta a formação de uma reação perilarvar e constituição do granuloma, com acentuada celularidade em uma das faces da larva, e se inicia às 5h, ficando bem caracterizado aos 20 dias após infecção. A partir dos 30 dias após a infecção tem início um processo de degeneração do granuloma perilarvar e o aparecimento de larvas livres nas cavidades do molusco 60 dias após a infecção.