Micror ganismos endo fítico s, aqueles que vivem no s tecidos de plantas vivas, são relativamente pouco estudados e são fontes po tenciais de molécu las que podem ser utilizadas na med icina, agricultura e indústria. O ob jetivo desse trabalho foi detectar a presença de sub stâncias com atividade antimicrobiana p roduzid as por fungo s endo fíticos isolad os de plantas p resentes em fragmento s florestais naturais, Ipu cas, no Cerrado do estad o do Tocantins. Para isso foram coletadas amostras de folhas de Calophyllum brasiliense, Vochysia sp. e Sclerolobium sp., presentes nas Ipucas, para o isolamento dos fungos. Os mo rfotipos isolados for am depositados na coleção de fungos do Laboratório de Ecologia e Biotecnolo gia de Levedu ras do Dep artamento d e Microbio logia da Universidad e Feder al de Minas Gerais. Os fungos foram cultivado s em microplacas de 2 4 poços e a obtenção dos extratos fo i realizad a utilizando a extração com metano l. Para a detecção atividade antimicro biana foi u tilizad a a técnica d e d ifusão em disco par a o s seguintes microrganismo s alvos: Candida albicans ATCC 18804, C. krusei ATCC 2159, Escherichia coli ATCC 25922 e Staphylococcus aureus ATCC 12600. Para o fungo Cladosporium sphaero spermum CCT 1740 foi utilizada uma suspensão de esporos que foi borrifada em um papel filtro com os extratos previamente aplicado s. Para a identificação dos isolados ativos fo i realizado o seqüenciamento d a região transcrita interna (ITS) do DNA ribossomal nuclear. Foram co letadas amostras de folhas de 281 espécimes de plantas, e, a partir destas, foram isolado s 121 fungos endofíticos. Destes fungos fo ram produ zidos 436 extr atos, dos quais 42 (9,06%) apresentaram atividade antimicrobiana para um ou mais microrganismosalvo s. Esses extratos correspondem a 33 isolados distinto s de fungo s, representand o 27,27% do total de microrganismo s testados. Dentre os extratos ativos, 19 (45 %) apr esentaram atividad e co ntra C. sphaerophorum, 11 (26 %) contra C. albicans, 10 (24%) contra C. kru sei e ap enas dois ( 5%) extratos foram ativos co ntra S. aureus. Nenhum extratos foi cap az de inibir E. coli. Seis isolado s ativos fo ram id entificado s pelo seqüenciamento d a região ITS do DNA ribosso mal. As espécies encontradas foram Giberella fugikuroi, Curvularia aff. sp ., C. eragrostides, Pseudallescheria boydii e Pseudocercospora aff luza rdii. A análise dos resu ltad os obtidos indica que os fungos endofítico s das três plantas estudadas de Ipucas podem representar u ma fonte po tencial de substâncias bioativas com atividade antimicrob iana.

Endop hytes are microo rganisms that live inside plant tissues without causing symp toms o f disease. They are relatively poorly studied as source of new bioactive mo lecules that could be use in medicine, agricultu re and industr y. The pu rpose of this wor k was to screen faonrt im icrobial activity the endop hytic fungi isolated from plants found in natural forest fragments, ip ucas, in the state of Tocantins, Brazil. Endop hytic fungi were isolated from…

Advisors/Committee Members: Carlos Augusto Rosa, Luiz Henrique Rosa, Carlos Augusto Rosa, Aristotoles Goes Neto, Patricia Silva Cisalpino.

Esse trabalho teve como objetivo caracterizar a comunidade de leveduras que coloniza as flores de Heliconia psittacorum (Heliconiaceae). As flores foram coletadas próximas a Cachoeira da Formiga, que se localiza no Parque Estadual do Jalapão (estado do Tocantins), uma das maiores reservas do bioma Cerrado no Brasil. Vinte e cinco flores de H. psittacorum foram coletadas, sendo obtidos 229 isolados de leveduras. Os isolados foram agrupados de acordo com o perfil fisiológico e molecular. Um isolado de cada grupo foi submetido ao sequenciamento da região gênica D1/D2 do gene do rRNA. As leveduras foram identificadas como pertencentes a 20 espécies, sendo nove espécies de ascomicetos e onze de basidiomicetos. O gênero mais freqüente foi Candida, com 50,64% do total de isolados, sendo Candida flosculorum a espécie com o maior número de isolados. Essa espécie parece estar intimamente relacionada com flores de Heliconia, uma vez que já foi isolada em estudos com outras duas espécies desse gênero de planta. Quatro espécies novas de leveduras foram encontradas. Candida sp. 1 pertence ao clado Wickerhamiella, sendo filogeneticamente próxima de C. drosophilae e de C. jalaponensis. Candida sp. 2 é uma espécie basal no clado Metchnikowia, sendo filogeneticamente próxima de C. saopaulonensis. Candida sp. 3 é filogeneticamente próxima de C. asparagi com a qual forma um clado juntamente com C. fructus. Candida sp. 4 pertence ao clado das Wickerhamomyces, sendo filogeneticamente próxima de Wickerhamomyces pijperi. Duas outras espécies, Cryptococcus sp. (sequencia das regiões D1/D2 e ITS do rRNA idênticas a linhagem CBS 8369, número de acesso no Genbank AF444705) e Candida nymphaea (sequencia das regiões D1/D2 e ITS do rRNA idênticas a llinhagem 05-7-186T, número de acesso no GenBank FJ537069), já foram isoladas de outras plantas, porém ainda não foram descritas. A comunidade de leveduras isolada de flores de H. psittacorum a presenta um amplo perfil fisiológico, com a assimilação de uma grande variedade de fontes de carbono e com a predominância de espécies osmotolerantes, o que pode estar relacionado com a alta concentração de açúcares nos nectários. Muitas espécies dessa comunidade de leveduras utilizam nitrato e nitrito como única fonte de nitrogênio e poucas são capazes de fermentar glicose e crescer à 37ºC. A comunidade de leveduras associada com H. psittacorum apresentou alto índice de diversidade, com um valor muito parecido com aquele encontrado para a comunidade de leveduras de flores de H. velloziana provenientes de fragmentos de Mata Atlântica. O presente trabalho mostra que flores do bioma Cerrado podem constituir uma rica fonte de novas espécies de leveduras. Mais estudos são necessários para a melhor caracterização das comunidades que colonizam esses habitats efêmeros.

This study aimed to characterize the yeast community colonizing Heliconia psittacorum (Heliconiaceae) flowers. These flowers were collected near Formiga waterfall, located at the Parque Estadual do Jalapão (state of Tocantins), one of the largest…

Advisors/Committee Members: Carlos Augusto Rosa, Carlos Augusto Rosa, Allen Norton Hagler, Fernanda Badotti, Luiz Henrique Rosa.

As doenças negligenciadas, o câncer e as doenças infecciosas constituem um importante problema de saúde para todo o mundo. Neste contexto, os fungos endofíticos da planta Piptadenia adiantoides foram selecionados para o isolamento de substâncias bioativas contra Leishmaniose, doença de Chagas, câncer, paracoccidioidomicose e doenças infecciosas causadas por fungos e bactérias. As linhagens de fungos endofíticos isolados desta planta foram ativas contra formas amastigotas de Leishmania (Leishmania) amazonensis e de Trypanosoma cruzi, sendo capazes de inibir a proliferação de três linhagens de células tumorais humanas (UACC-62, MCF-7 e TK-10). Os quatro fungos selecionados, foram identificados até o nível de gênero por meio de suas características macro e micro morfológicas e também pelo sequenciamento da região inter gênica (ITS) do rDNA. Os isolados UFMGCB-540, 551, 554 e 555 foram identificados como Bipolaris sp., Fusarium sp., Bipolaris sp., e Cochliobolus sp. A partir do extrato do fungo Cochliobolus sp. foi obtido as substâncias cochlioquinona A e isocochlioquinona A que foram ativas contra formas amastigotas like de Leishmania (Leishmania) amazonensis. O extrato do fungo endofítico Fusarium sp. foi fracionado por cromatografia em co-corrente de alta velocidade e dois tricotecenos foram obtidos a partir da purificação das frações em cromatografia liquida de alta eficiência. Os tricotecenos 8-n-pentanoyl-neosolaniol e a T2 toxina foram ativos contra onze isolados de Paracoccidioides brasiliensis e uma linhagem de Candida albicans. No entanto, os dois compostos foram 100 vezes menos ativo contra esta levedura. Os dois fungos identificados como Bipolaris sp. apresentaram atividade biológica contra L. (L.) amazonensis, inibiram a enzima tripanotiona redutase e foram ativos contra quatro isolados de P. brasiliensis. Além disso, quando avaliados em cromatografia líquida de alta eficiência, as duas linhagens de Bipolaris sp. apresentaram diferentes perfis químicos. Este trabalho corrobora o potencial dos fungos endofíticos como fonte promissora de substâncias bioativas que, no caso dos fungos Cochliobolus sp. e Fusarium sp., forneceram substâncias potencialmente úteis para o desenvolvimento de novas drogas para doenças negligenciadas. Além disso, os fungos Bipolaris sp. apresentaram grande potencial para isolamento de novas substâncias bioativas contra as doenças negligenciadas e o câncer. Advisors/Committee Members: Carlos Leomar Zani, Carlos Augusto Rosa, Luiz Henrique Rosa, Carlos Leomar Zani, Jovita Eugenia Gazzinelli Cruz Madeira, Vera Lucia dos Santos, Jacqueline Aparecida Takahashi, Gisela L. da Costa.