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You searched for +publisher:"Universidad de Chile" +contributor:("Corsini, Gino"). Showing records 1 – 3 of 3 total matches.

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Universidad de Chile

1. Ferrer Silva, Alonso Andrés. Purificación, caracterización bioquímica y evaluación de la citotoxicidad del peptido antimicrobiano gicina A .

Degree: 2011, Universidad de Chile

Las bacteriocinas son péptidos antimicrobianos de síntesis ribosomal producidos por microorganismos, principalmente del dominio bacteria. Las bacteriocinas producidas por bacterias Gram positivo o Gram negativo, presentan una actividad tóxica sobre especies bacterianas estrechamente relacionadas con la bacteria productora. Para ejercer su acción antimicrobiana las bacteriocinas utilizan receptores específicos localizados exclusivamente en la bacteria blanco, por lo tanto raramente se observa actividad citotóxica sobre células eucariontes. No obstante, algunas bacteriocinas inhiben específicamente el crecimiento de líneas celulares neoplásicas. Debido a estas propiedades, las bacteriocinas tienen una potencial aplicación biotecnológica por su posible uso como alternativa a los tratamientos con antibióticos tradicionales, o como nuevos antibióticos contra patógenos multirresistentes, como preservantes o desinfectantes en la industria alimenticia, y en el área biomédica como antineoplásicos para combatir algunos tipos de cáncer. En nuestro laboratorio encontramos un nuevo compuesto antimicrobiano del tipo bacteriocina producido por la cepa de Pseudomonas aeruginosa O400, al que hemos denominado gicina A. Este compuesto es capaz de inhibir, selectivamente, el crecimiento de bacterias Gram positivo. Debido a que no existen informes en la literatura de bacteriocinas producidas por bacterias Gram negativo que presenten actividad antimicrobiana solamente sobre bacterias Gram positivo, el estudio del mecanismo de acción y las propiedades bioquímicas de gicina A constituye un valioso aporte en la búsqueda de nuevas sustancias antimicrobianas. El objetivo general de esta tesis fue “Purificar, caracterizar bioquímicamente, y evaluar tanto el mecanismo de acción antibacteriano de gicina A, como su toxicidad in vitro sobre líneas celulares eucariontes”. Para lograr este objetivo se realizó la purificación de gicina A mediante cromatografías en columnas hidrofóbicas y HPLC. Mediante electroforesis de proteínas y espectrometría de masas se determinó que esta proteína tiene una masa molecular de 7925 Da. La evaluación de sus propiedades bioquímicas demostró que la actividad de gicina A es estable a un amplio rango de temperaturas, conserva su actividad al ser solubilizada en una amplia gama de solventes y presenta una mayor actividad al ser solubilizada a un pH neutro. Por otra parte empleado gicina A purificada se confirmó que esta posee una actividad antibacteriana selectiva por bacterias Gram positivo. Estudios de alteración de la cinética de crecimiento de la bacteria blanco y ensayos de microscopía de fluorescencia indicaron que gicina A posee un efecto bactericida sobre bacterias Gram positivo y que este efecto es producido por una permeabilización en la membrana celular. La evaluación de la citotoxicidad in vitro de gicina A sobre células eucariontes mostró que esta bacteriocina ejerce una leve toxicidad en las líneas de origen tumoral, sin embargo no se observó efecto citotóxico sobre las… Advisors/Committee Members: Corsini, Gino (advisor).

Subjects/Keywords: Bacteriocinas; Pseudomonas aeruginosa

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APA (6th Edition):

Ferrer Silva, A. A. (2011). Purificación, caracterización bioquímica y evaluación de la citotoxicidad del peptido antimicrobiano gicina A . (Thesis). Universidad de Chile. Retrieved from http://www.repositorio.uchile.cl/handle/2250/112039

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Chicago Manual of Style (16th Edition):

Ferrer Silva, Alonso Andrés. “Purificación, caracterización bioquímica y evaluación de la citotoxicidad del peptido antimicrobiano gicina A .” 2011. Thesis, Universidad de Chile. Accessed October 16, 2019. http://www.repositorio.uchile.cl/handle/2250/112039.

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MLA Handbook (7th Edition):

Ferrer Silva, Alonso Andrés. “Purificación, caracterización bioquímica y evaluación de la citotoxicidad del peptido antimicrobiano gicina A .” 2011. Web. 16 Oct 2019.

Vancouver:

Ferrer Silva AA. Purificación, caracterización bioquímica y evaluación de la citotoxicidad del peptido antimicrobiano gicina A . [Internet] [Thesis]. Universidad de Chile; 2011. [cited 2019 Oct 16]. Available from: http://www.repositorio.uchile.cl/handle/2250/112039.

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Council of Science Editors:

Ferrer Silva AA. Purificación, caracterización bioquímica y evaluación de la citotoxicidad del peptido antimicrobiano gicina A . [Thesis]. Universidad de Chile; 2011. Available from: http://www.repositorio.uchile.cl/handle/2250/112039

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Universidad de Chile

2. Navarro Pérez, Myriam Andrea. Generación de cepas recombinantes de pseudomonas para la producción de etanol .

Degree: 2012, Universidad de Chile

Los problemas ambientales y la disminución de las reservas de petróleo han reiniciado la búsqueda de combustibles alternativos a los combustibles fósiles. El etanol se presenta como una alternativa sustentable para resolver esta problemática. En la naturaleza existen microorganismos silvestres productores de etanol, tales como la bacteria Zymomonas mobilis y la levadura Saccharomyces cerevisiae. Si bien estos dos microorganismos son altamente eficientes en la generación de etanol, sólo son capaces de utilizar azúcares de 6 carbonos, limitando la producción industrial de etanol solo a materias primas que contengan hexosas. En los residuos lignocelulósicos se encuentra una gran reserva de hidratos de carbono almacenada como polímeros de glucosa (celulosa) o azúcares de 5 carbonos como xilosa y arabinosa. Para el aprovechamiento de pentosas disponibles en esta materia prima se han modificado estos microorganismos, mediante la introducción de los genes de las enzimas necesarias para metabolizar arabinosa y xilosa o se han incorporado los genes de las enzimas de la ruta etanológica de Z. mobilis, piruvato descarboxilasa (pdc) y alcohol deshidrogenasa II (adhB) a bacterias capaces de utilizar pentosas, como Escherichia coli, Klebsiella oxycota, Lactobacillus plantarum, Lactococcus lactis y Bacillus subtilis. El género Pseudomonas, principalmente Pseudomonas aeruginosa, posee muchas de las características necesarias para la producción industrial de etanol, es una versátil bacteria Gram negativo, capaz de adaptarse y sobrevivir bajo amplio rango de condiciones ambientales y al igual que Z. mobilis asimila azúcares por la ruta de Entner-Doudoroff, además posee una toleracia a etanol mayor que bacterias E. coli recombinantes utilizadas en la producción de etanol. El objetivo general de este trabajo es la construcción de un operón productor de etanol para la expresión de los genes pdc y adhB de la ruta etanologénica de Z. mobilis en P. aeruginosa PAO1. El diseño del operón artificial incluyó los siguientes elementos genéticos: el promotor del operón inducible arabinosa (PBAD), sitio de unión a ribosoma (RBS), gen pdc, gen adhB y un terminador transcripcional para P. aeruginosa. Las primeras etapas para la construcción del operon pet, contemplaron la realización de 2 construcciones genéticas mediante PCR. La primera comprende la mínima región codificante del gen pdc y una región adaptadora de 33 pb (adp), la segunda corresponde a la unión de adp2 (secuencia que contiene una zona complementaria a adp y un sitio de unión a ribosoma) con la mínima región codificante del gen adhB y un terminador transcripcional específico para Pseudomonas. Los análisis de restricción, PCR y secuenciación mostraron la obtención de un fragmento 1740 pb correspondiente al producto pdc-adp, un fragmento de 1247 pb para el producto adp2- adhB-term. Para los productos de PCR de la fusión de las construcciones pdc-adp con adp2- adhB-term se obtuvieron amplicones inespecíficos de tamaños superiores e inferiores al tamaño… Advisors/Committee Members: Corsini, Gino (advisor).

Subjects/Keywords: Alcohol; Pseudomonas; Combustibles biodiesel; Pseudomonas aeruginosa

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APA (6th Edition):

Navarro Pérez, M. A. (2012). Generación de cepas recombinantes de pseudomonas para la producción de etanol . (Thesis). Universidad de Chile. Retrieved from http://www.repositorio.uchile.cl/handle/2250/113568

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Chicago Manual of Style (16th Edition):

Navarro Pérez, Myriam Andrea. “Generación de cepas recombinantes de pseudomonas para la producción de etanol .” 2012. Thesis, Universidad de Chile. Accessed October 16, 2019. http://www.repositorio.uchile.cl/handle/2250/113568.

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MLA Handbook (7th Edition):

Navarro Pérez, Myriam Andrea. “Generación de cepas recombinantes de pseudomonas para la producción de etanol .” 2012. Web. 16 Oct 2019.

Vancouver:

Navarro Pérez MA. Generación de cepas recombinantes de pseudomonas para la producción de etanol . [Internet] [Thesis]. Universidad de Chile; 2012. [cited 2019 Oct 16]. Available from: http://www.repositorio.uchile.cl/handle/2250/113568.

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Council of Science Editors:

Navarro Pérez MA. Generación de cepas recombinantes de pseudomonas para la producción de etanol . [Thesis]. Universidad de Chile; 2012. Available from: http://www.repositorio.uchile.cl/handle/2250/113568

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Universidad de Chile

3. Saavedra Noriega, José Miguel. Mecanismos de interacción entre la microcina 24 y su célula bacteriana blanco .

Degree: 2009, Universidad de Chile

Las microcinas son un grupo de bacteriocinas de bajo peso molecular (inferior a 10 kDa), producidas principalmente por miembros de la familia Enterobacteriaceae, que inhiben el crecimiento de otras bacterias estrechamente relacionadas con la cepa productora. Estas proteínas son resistentes a condiciones adversas como temperatura y pH extremos, resisten incluso a ciertas proteasas, son solubles en metanol y no son inducibles por el sistema SOS. De todas las microcinas conocidas, la microcina 24 es una de las menos estudiadas. Según la secuencia publicada en GenBank, la microcina 24 se sintetiza como una pre-proteína de 90 aminoácidos que contiene en su extremo amino terminal una señal de exportación, que es cortado en un motivo de doble glicina al ser exportada. La proteína madura (exportada) contiene 74 residuos y posee una masa teórica de 7527 Da. El mecanismo de acción de la microcina 24 no se conoce bien. Carlson y cols. en 2001 publicaron que posiblemente el blanco de acción de esta bacteriocina se encuentra en el citoplasma, sin embargo estudios preliminares de nuestro grupo revelan que el blanco de acción de la microcina 24 es la membrana citoplasmática. En este trabajo se planteó como objetivo caracterizar la expresión de la microcina 24 e identificar el mecanismo de acción por el cual genera la muerte bacteriana. Para caracterizar la expresión de la microcina 24 se analizó el sobrenadante de un cultivo de E. coli MC1061pGOB18, en diferentes etapas de crecimiento, en búsqueda de actividad antimicrobiana. Se determinó que la microcina 24 comienza a producirse en fase exponencial de crecimiento. Un análisis transcripcional mediante RT-PCR permitió observar que la microcina 24 se transcribe junto con su inmunidad en una sola unidad bicistrónica, lo que le permite a la cepa productora regular la expresión de la microcina 24, de manera tal que no resulte tóxica para sí misma. La purificación de esta microcina se realizó a partir del sobrenadante de un cultivo productor de microcina 24, en un sistema de cromatografía hidrofóbica en fase inversa utilizando como matriz sólida una columna de Sed-Pack C18 y diferentes concentraciones de metanol como eluyente. Las diferentes fracciones obtenidas fueron evaluadas en búsqueda de actividad antimicrobiana mediante ensayos de actividad en placa. La microcina presente en las fracciones que exhibieron actividad fueron re-purificadas mediante HPLC con columna Sed-Pack C8 como matriz sólida y acetonitrilo 40% como eluyente. Esta microcina purificada se sometió a un análisis mediante espectrometría de masa, encontrándose que la microcina 24 posee una masa experimental de 7274 Da, presentando una diferencia de 253 Da menos que la masa teórica deducida. Esta diferencia se debe a un error en la secuencia publicada en Genbank, la que fue detectada al secuenciar el sistema productor completo. La corrección de la secuencia permite deducir una masa teórica de 7293 Da, que se asemeja más al valor experimental. No sólo en la secuencia de la microcina se descubrió errores, también se… Advisors/Committee Members: Seelenfreund Hirsch, Daniela (advisor), Corsini, Gino (advisor), Tello Reyes, Mario César (advisor).

Subjects/Keywords: Bioquímica; Bacteriocinas

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APA (6th Edition):

Saavedra Noriega, J. M. (2009). Mecanismos de interacción entre la microcina 24 y su célula bacteriana blanco . (Thesis). Universidad de Chile. Retrieved from http://www.tesis.uchile.cl/tesis/uchile/2009/qf-saavedra_m/html/index-frames.html

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Chicago Manual of Style (16th Edition):

Saavedra Noriega, José Miguel. “Mecanismos de interacción entre la microcina 24 y su célula bacteriana blanco .” 2009. Thesis, Universidad de Chile. Accessed October 16, 2019. http://www.tesis.uchile.cl/tesis/uchile/2009/qf-saavedra_m/html/index-frames.html.

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Saavedra Noriega, José Miguel. “Mecanismos de interacción entre la microcina 24 y su célula bacteriana blanco .” 2009. Web. 16 Oct 2019.

Vancouver:

Saavedra Noriega JM. Mecanismos de interacción entre la microcina 24 y su célula bacteriana blanco . [Internet] [Thesis]. Universidad de Chile; 2009. [cited 2019 Oct 16]. Available from: http://www.tesis.uchile.cl/tesis/uchile/2009/qf-saavedra_m/html/index-frames.html.

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Saavedra Noriega JM. Mecanismos de interacción entre la microcina 24 y su célula bacteriana blanco . [Thesis]. Universidad de Chile; 2009. Available from: http://www.tesis.uchile.cl/tesis/uchile/2009/qf-saavedra_m/html/index-frames.html

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