Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária

A maioria das neoplasias mamárias na espécie felina é maligna e muito agressiva, traduzindo-se num elevado poder invasivo e capacidade de metastização. Por conseguinte, tem havido vários tentativas para usar a quimioterapia como adjuvante à cirurgia, de modo a prolongar a sobrevivência destes animais. Todavia, a eficácia desta terapêutica ainda não está completamente estabelecida. Deste modo este estudo tem como objetivo avaliar o benefício da quimioterapia como complemento da cirurgia. Este estudo retrospetivo incidiu na análise de 46 animais (grupo 1 - gatas tratadas cirurgicamente, n=32; grupo 2 - gatas tratadas com cirurgia e quimioterapia com doxorrubicina, n=14) com carcinomas mamários, diagnosticados no Laboratório de Anatomia Patológica da FMV-UL, tendo sido comparadas as diferenças entre os dois grupos de tratamento no que diz respeito ao tempo de sobrevida e ao intervalo livre de doença. Adicionalmente avaliou-se a influência de alguns fatores no tempo de sobrevida e no intervalo livre de doença das gatas pertencentes ao grupo 2. Foram avaliadas as diferenças entre os dois grupos das variáveis clínicas e histopatológicas, nos dois grupos. Em relação ao tempo de sobrevida, o grupo 1 apresentou um valor de mediana de 292 dias face aos 776 dias pertencentes aos animais do grupo 2 (p= 0,053). Quanto ao intervalo livre de doença, obtiveram-se os valores de 292 dias e 1199 dias para os grupos 1 e 2, respetivamente (p= 0,200). Comparando os dois grupos em relação ao tempo de sobrevida, tendo em conta os diversos fatores analisados, não se verificaram diferenças significativas à exceção do subgrupo da raça Europeu Comum (p=0,022) e do subgrupo com presença de necrose (p= 0,043). Relativamente ao intervalo livre de doença, ao comparar os dois grupos, também não se verificaram diferenças significativas exceto no subgrupo de idade < 10 anos (p=0,025) e no subgrupo de tumores com ausência de necrose (p=0,023). Não foram encontradas outras diferenças significativas quer na avaliação dos diferentes fatores no tempo de sobrevida e no intervalo livre de doença, quer no estudo das variáveis clínicas e histopatológicas. O uso da quimioterapia adjuvante com doxorrubicina apresenta neste estudo um resultado benéfico, necessitando no entanto de investigação adicional, nomeadamente de estudos prospetivos.

ABSTRACT - CLINICAL PATHOLOGY IN CATS WITH BREAST TUMORS UNDERGOING CHEMOTHERAPY WITH DOXORUBICIN - Most mammary tumors in feline species are malignant and very aggressive, resulting in highly metastatic and invasive tumors. Therefore, various attempts have been made to use adjuvant chemotherapy following surgery in order to prolong the survival of these animals. However, the effectiveness of this treatment is not yet very well established. Hence, this study aims to evaluate the benefit of adjuvant chemotherapy compared to surgery alone. This retrospective study focused on the analysis of 46 animals (group 1 - cats treated surgically, n = 32 ; group 2 - cats…

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária

Os tumores mamários apresentam uma elevada prevalência em cadelas e constituem uma importante entidade clínica nesta espécie. O papel do sistema imunitário no desenvolvimento tumoral tem sido largamente estudado, porém, o seu valor prognóstico ainda não está estabelecido. Neste trabalho foi realizado o estudo da resposta inflamatória associada aos tumores e investigada a sua associação com parâmetros de caráter prognóstico. Colheram-se 49 massas da região mamária a partir das quais se selecionaram 41 tumores mamários. Nestes, identificaram-se diferentes populações celulares inflamatórias (linfócitos, neutrófilos, macrófagos e mastócitos). O infiltrado linfoide foi quantificado em ausente (48,78%), escasso (16,66%), moderado (26,83%) e abundante (7,32%) e a sua distribuição foi caracterizada. Em 13 carcinomas efetuou-se a fenotipagem linfocitária B/T, recorrendo a imunohistoquímica e utilizando os anticorpos: PAX5 (Leica-PA0552) e CD3 (Dako-A0452). Os resultados foram avaliados pela percentagem e densidade de células marcadas como positivas. Não se verificaram correlações entre as duas populações linfocitárias identificadas. No conjunto dos tumores analisados, foi verificado um valor médio superior de células positivas a anti-PAX5. Foram obtidas fortes associações entre a percentagem e a densidade de células positivas para cada imunomarcador. Não se verificaram associações com parâmetros prognósticos, sendo necessária mais investigação para compreensão do papel da resposta inflamatória nestes tumores.

ABSTRACT - Study of the inflammatory response in canine mammary tumours - Mammary gland tumours exhibit a high prevalence in bitches and are regarded as an important clinical entity in this species. The role of immune system in tumorigenesis has been widely studied however, its prognostic value is not yet established. In this study, tumour-associated inflammatory response was studied and its association with prognostic parameters was investigated. Forty-one mammary tumours were selected to study from 49 mammary masses collected. In the selected tumours different inflammatory cell populations were identified (lymphocytes, neutrophils, macrophages and mast cells). Lymphoid infiltrate was quantified as follows: absent (48,78%), scarce (16,66%), mild (26,83%) and abundant (7,32%). Its distribution was also characterized. B and T-cell phenotyping was performed in 13 carcinomas by immunohistochemistry using two antibodies: Pax5 (Leica-PA0552) and CD3 (Dako-A0452). Results were evaluated through the percentage and density of positive cells. There was no statistically significant correlation between the identified lymphocyte populations. Regarding lymphocyte density, a superior mean value of anti-PAX5 positive cells was verified in the whole group of studied tumours. Strong associations were observed between the percentage and the density of positive cells for each of the immunomarkers. There were no statistically significant associations with prognostic parameters.…

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária

Os tumores mamários têm sido alvo de vários estudos, não só por serem uma das neoplasias mais frequentes na cadela e na gata, como também pela sua semelhança aos tumores da mulher. Pela sua grande diversidade morfológica constituem um desafio e incentivam o desenvolvimento de novos meios de diagnóstico, tratamento e indicadores de prognóstico. Na presente dissertação foi realizado um estudo com 10 cadelas e 2 gatas com tumores mamários, sujeitos a análise histopatológica após mastectomia, no período decorrido entre Setembro de 2010 e Janeiro de 2011. O objectivo era caracterizar a ocorrência desta patologia, comparando os resultados com os de um estudo retrospectivo de 49 meses, de forma a identificar parâmetros com interesse na sua prevenção. Verificou-se que estes tumores surgem com maior frequência na cadela e 82% dos mesmos são malignos. A média de idades ao seu aparecimento é de 10,78 anos para a cadela e 16 anos para a gata. As mamas inguinais foram as mais afectadas na cadela e o tipo histológico mais comum foi o túbulo-papilífero. É aconselhável apostar na prevenção recorrendo à ovariohisterectomia precoce.

ABSTRACT - CLINICAL AND ANATOMOPATHOLOGIC STUDY OF MAMMARY TUMORS IN THE BITCH AND THE QUEEN - Mammary tumours have been the topic of several studies, not only for being one of the most frequent in the bitch and queen, but also for its resemblance to the mammary women tumours. Their high morphological diversity constitutes a challenge and a stimulus to the development of new diagnostic, treatment and prognostic tools. Here the results of a histopathological analysis after mastectomy of ten dogs and two cats affected by mammary tumours are presented. This study was performed between September of 2010 and January of 2011. The aim of this work was to characterize the occurrence of this disease and to compare the results with those of a retrospective study of 49 months in order to identify potential relevant prevention parameters. These tumours arise more frequently in the bitch, in which 82% are malignant. The average age at onset is 10.8 years for the bitch and 16 years for the queen. The inguinal glands were the most affected in the dog and the tubulopapillary type the most common in both species under study. It is advisable to promote the prevention based on early ovariohysterectomy.

Tese de Doutoramento em Ciências Veterinárias na Especialidade de Ciências Biológicas e Biomédicas

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Considering the scarce data available in feline mammary carcinoma (FMC) and despite its importance in veterinary clinical practice, this thesis emerges in order to increase the knowledge of this tumor type, especially the FMC-HER2 positive. In the first two studies, the protocols for detection and quantification of the fHER2 and Ki-67 biomarkers were optimized and validated. These studies demonstrated that, in cats, the incidence of fHER2 overexpression were similar to women (about 30%), although no gene amplification was detected. It was also demonstrated that high levels of Ki-67 index were associated with a worse prognosis. Using a panel of protein biomarkers, the FMC were divided into six different groups that demonstrated prognostic value, similarly to what is described in women. In fact, cats with triple negative basal-like or HER2-positive subtypes were associated with shorter overall survival, contrasting with cats presenting luminal A tumors. Moreover, these studies also indicated that luminal B and triple negative basal-like subtypes are the most common in cats. When the metastatic lesions were evaluated, a marked loss of receptor expression was found, which was associated with an increase of the triple negative basal-like subtype, highlighting the importance of immunophenotyping all lesions (primary and metastatic) in cats. Considering these results, the development of diagnostic methodologies that allows the continuous follow-up of the patients would be very useful. Therefore, the last study presented in this thesis evaluates the fHER2 serum levels in cats with FMC using two different immunoassays (ELISA and dot blot). The serum levels of fHER2 were significantly associated with the fHER2 in tissue samples of FMC (assessed by IHC). This is consistent to what is described for humans and suggests that serum quantification could be an important tool for monitoring cats after the surgery. In sum, the results presented herein provide new diagnostic and prognostic tools for veterinary oncology. Considering the high prevalence and similarities with the human counterpart, cat can also represent a potential animal model for the study of luminal B and triple negative subtypes. Considering fHER2-positive FMC more studies are required in order to determine the aetiology of the protein overexpression.

RESUMO - Os tumores mamários felinos (TMF) são umas das neoplasias mais comuns em Oncologia Felina, com uma incidência que pode atingir os 40%, pelo que assumem um papel relevante na prática clínica veterinária. Estes tumores apresentam habitualmente uma etiologia maligna (carcinomas) e um comportamento agressivo, estando associados a um prognóstico reservado. Atualmente, existem poucas opções terapêuticas que permitam aumentar a qualidade e a esperança média de vida dos animais afectados por esta neoplasia. Assim, estudos que permitam uma melhor caracterização dos tumores, identificando…

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária

Com o objetivo de identificar parasitas e doenças parasitárias de pinípedes que vivem sob cuidados humanos em Portugal, realizou-se um estudo sobre parasitoses cardiopulmonares e gastrointestinais na coleção de pinípedes pertencente ao Zoomarine – Mundo Aquático S.A., que se situa no Algarve. No total, foram colhidas 19 amostras sanguíneas e 79 amostras fecais de 20 indivíduos de três espécies: foca-comum (Phoca vitulina) (n=6), foca-cinzenta (Halichoerus grypus) (n=2) e leão-marinho-californiano (Zalophus californianus) (n=6) e de uma subespécie, otária-sul-africana (Arctocephalus pusillus pusillus) (n=6). As amostras sanguíneas foram analisadas utilizando o teste rápido de antigénio WITNESS®Dirofilaria e a técnica de Knott modificada. Para as amostras fecais utilizaram-se as técnicas de McMaster, Flutuação de Willis, Sedimentação em meio saturado, Técnica de Baermann modificada e esfregaços fecais corados pela técnica de Ziehl-Neelsen. O teste rápido foi positivo em duas focas-comuns e detetaram-se microfilárias correspondentes a D. immitis numa otária-sul-africana. As análises fecais, na sua totalidade, foram consideradas negativas. Realizou-se também a identificação morfológica de nemátodes encontrados em necrópsias de duas otárias-sul-africanas e seu exame histopatológico correspondente. Os vermes adultos encontrados no coração e artéria pulmonar foram identificados como D. immitis, tornando-se este trabalho, no conhecimento da autora, o primeiro registo em A. p. pusillus a nível mundial e também o primeiro registo da infeção por este nemátode em pinípedes em Portugal. Atendendo a que o Algarve é considerado uma região endémica para este parasita e sendo a Dirofilariose uma doença re-emergente nesta e noutras zonas do País, é importante dar uma continuidade a este e outros estudos sobre parasitas transmissíveis por vetores, para melhor compreender os efeitos desta e outras parasitoses em pinípedes em ambiente zoológico.

ABSTRACT - Cardiopulmonary and Gastrointestinal Parasites in Pinnipeds in a Zoological Context - In order to identify parasites and parasitic diseases of pinnipeds that live under human care in Portugal, we performed a study on cardiopulmonary and gastrointestinal parasites in the pinniped group belonging to Zoomarine – Mundo Aquático S.A., which is located in the Algarve. In total, 19 blood samples and 79 fecal samples were collected from 20 individuals from three species: common seal (Phoca vitulina) (n=6), grey seal (Halichoerus grypus) (n=2) and California sea lion (Zalophus californianus) (n=6) and from one subspecies, South African fur seal (Arctocephalus pusillus pusillus) (n=6). Blood samples were tested using a Dirofilaria immitis commercial antigen test (WITNESS®Dirofilaria) and modified Knott's technique. Fecal samples were tested using McMaster technique, Willis Flotation, Sedimentation, modified Baermann technique and fecal smears stained by Ziehl-Neelsen technique. Two samples from common seals tested positive in the…

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária

A eletrocussão é uma das mais importantes causas de mortalidade de aves de rapina e do seu ingresso nos centros de recuperação de animais selvagens. Trata-se de uma temática amplamente estudada no âmbito da biologia da conservação mas pouco abordada em medicina veterinária. O principal objetivo deste trabalho consistiu na identificação de alterações resultantes de eletrocussão ao exame de necropsia e histopatológico. Para isso, foram realizadas necropsias a 29 aves de rapina, que foram divididas em 2 grupos, um de aves eletrocutadas (n = 17) e outro de aves não eletrocutadas (n = 12), por forma a averiguar se existiriam diferenças significativas nas alterações encontradas entre os dois grupos. Ao exame externo, foi identificada a presença de pele e penas queimadas, necrose de tecidos moles e a presença de fraturas, verificando-se uma associação estatística significativa (p <0,05) entre estas alterações e a eletrocussão. A nível do exame interno predominaram alterações de natureza vascular e inflamatória, não tendo sido observadas diferenças significativas entre os grupos. Uma possível explicação para estes resultados prende-se com a natureza inespecífica dos achados, que são semelhantes em aves vítimas de eletrocussão e trauma. Como tal, neste trabalho foram encontradas alterações compatíveis com eletrocussão já descritas na literatura, contudo, devido ao seu cariz inespecífico, não foi possível a sua distinção de outras causas de morte, como o trauma. Justifica-se continuar a investigação da presença de alterações resultantes de eletrocussão, particularmente ao exame interno, com vista a uma melhor compreensão dos mecanismos fisiopatológicos de lesão elétrica.

ABSTRACT - ANATOMOPATHOLOGICAL FINDINGS IN BIRDS OF PREY – COMPARATIVE STUDY BETWEEN ELECTROCUTION AND OTHER ADMISSION CAUSES IN WILDLIFE REHABILITATION CENTRES - Electrocution is one of the main causes of mortality of birds of prey and their admission into wildlife rehabilitation centres. This thematic is the focus of extensive research in the scope of wildlife conservation biology but there is scarce information in the field of veterinary medicine. The main purpose of this work was to identify, at necropsy and histopathological exam, lesions possibly caused by. For that, 29 birds of prey were divided into 2 groups, one of electrocuted raptors (n = 17) and the other of non-electrocuted raptors (n =12), with the aim of determining if there were significant differences between the findings of both groups. At necropsy, external findings such as the presence of burnt feathers/skin, soft tissue necrosis and presence of fractures/luxations had a significant statistical association (p <0,05) with electrocution. As for the internal examination, there was a predominance of vascular and inflammatory lesions and there were no significant statistical differences between both groups. One possible justification for this is that the findings of electrocution are non-specific and therefore very similar to those…

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Apresenta-se um estudo sobre os casos de neoplasias oculares, em cães e gatos, analisados pelo Laboratório de Anatomia Patológica da Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Técnica de Lisboa (FMV-UTL), entre 2001 e 2012. Este estudo pretende contribuir para o conhecimento da prevalência das neoplasias oculares em cães e gatos na região de Lisboa, auxiliando no diagnóstico e na terapêutica de futuros casos de neoplasias oculares. A população total estudada foi de 173 cães e de 59 gatos. Foram analisadas 192 neoplasias oculares caninas e 65 felinas, sendo a neoplasia ocular a unidade estatística. Analisou-se estatisticamente parâmetros como: raça, sexo, idade, estrutura ocular afetada, diagnóstico anatomopatológico e terapêutica instituída. O estudo estatístico foi efetuado nos programas R-Statistics® e Microsoft Office Excel 2007®. Os cães de raça indeterminada (25,8%) e os gatos da raça Europeu Comum (76,9%) foram os mais afetados. No caso das raças caninas puras, as mais afetadas foram a Retriever do Labrador (15,2%), a Caniche (12,6%) e a Cocker Spaniel (6,4%). No caso dos gatos, as raças Persa (7,7%) e Siamesa (6,2%) foram as raças puras representadas. A idade média dos animais afetados foi de 10,5 ± 3,7 anos (mínima de 1 ano e máxima de 19 anos). Nos cães, o epitelioma, o adenoma e o melanoma foram as neoplasias mais observadas com prevalências de, respetivamente, 25,0%, 19,3% e 14,1%. As estruturas mais atingidas foram as glândulas de Meibom (41,7%), as pálpebras (21,4%) e a órbita (5,7%). O epitelioma (20,8%) e o adenoma (15,1%) das glândulas de Meibom foram as neoplasias mais frequentes nos cães. Nos gatos, as neoplasias mais frequentemente diagnosticadas foram o carcinoma (35,4%), o melanoma maligno (21,5%) e o linfoma maligno (16,9%). O globo ocular (21,5%), a íris (18,5%) e as pálpebras (20,0%) foram as estruturas mais atingidas. O melanoma difuso da íris e o carcinoma palpebral de células escamosas foram as neoplasias mais encontradas em gatos, ambas perfazendo 12,3%. A exérese da neoplasia, com preservação do globo ocular, foi o tratamento mais realizado em cães (70,8%). Tanto a exérese da massa como a enucleação foram os tratamentos mais efetuados nos gatos (30,8%). A exenteração foi o procedimento menos frequente em ambas as espécies, todavia nos gatos apresentou uma incidência maior (13,8%) do que nos cães (2,1%). Em conclusão, os resultados obtidos apontam para prevalências elevadas de neoplasias em estruturas oculares específicas, o que deve ser tido em conta no diagnóstico diferencial de doenças oculares em cães e gatos.

ABSTRACT - OCULAR TUMORS IN DOGS AND CATS – RETROSPECTIVE STUDY 2001-2012 -A study on cases of ocular tumours in dogs and cats is presented. For that purpose, the records of the Pathology Laboratory of the Faculty of Veterinary Medicine of the Lisbon Technical University were reviewed from 2001 to 2012. This study aimed to contribute to the knowledge of the prevalence of ocular tumours in dogs and cats in the…

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária

A hiperplasia quística do endométrio (HQE) é a afecção mais frequente do útero, estando associada a infertilidade em cadelas de idade mais avançada. Apesar do mecanismo que leva a esta alteração ainda não ser claro, pensa-se que a estimulação estrogénica seguida por um longo período de dominância progestagénica possa estar envolvida. O objectivo deste estudo foi avaliar os índices de apoptose e proliferação celular em úteros com HQE, e compará-los com os mesmos índices obtidos em úteros sem HQE, na mesma fase do ciclo. Adicionalmente, avaliou-se o efeito da presença de quistos ováricos nos índices de proliferação e apoptose do endométrio. No estudo realizado verificamos que a apoptose foi superior nas glândulas basais na fase de Estro e fim de Diestro na HQE e inferior no epitélio luminal em fim de Diestro com associação de quisto folicular na HQE em relação ao útero sem HQE. A proliferação celular foi superior nas glândulas basais e estroma e inferior no epitélio luminal no fim de Diestro nos úteros com HQE em relação aos sem HQE. Observaram-se igualmente aumentos na proliferação entre úteros sem HQE de cadelas com quistos ováricos, nas células das criptas e no estroma no início e meio de Diestro, respectivamente e diminuição da proliferação nas glândulas basais no início de diestro. Verificou-se adicionalmente o aparecimento de “ilhas glandulares”, com diminuição do índice de apoptose, que hipoteticamente poderão participar na génese da HQE. O presente estudo mostrou que alterações nos padrões normais de proliferação e de apoptose celular no endométrio da cadela poderão estar envolvidos na patogenia da hiperplasia quística do endométrio.

ABSTRACT - APOPTOSIS AND CELLULAR PROLIFERATION IN THE CYSTIC ENDOMETRIAL HYPERPLASIA OF THE BITCH - Cystic endometrial hyperplasia (CEH) is the most frequent disease of the uterus, usually associated with infertility in older bitches. Although the mechanism that leads to this disease is not entirely clear, it is thought that an estrogenic stimulation followed by a long period of progestagenic dominance may be involved. The aim of this study was to evaluate the indexes of apoptosis and cellular proliferation in uterus with CEH and compare them with the respective indexes in uterus without CEH, in the same stage of the estrous cycle. Additionally, it was evaluated the effect of the ovarian cysts in the indexes of endometrial apoptosis and cellular proliferation. The study revealed that the apoptosis indexes increased in the basal glands in oestrus and late diestrus and decreased in the luminal epithelium in late diestrus in HQE compared with uterus without HQE. The cellular proliferation increased in the basal glands and stromal cells and decreased in the luminal epithelium in late diestrus in uterus with HQE. An increase in proliferation was also observed between uterus with ovarian cysts, in the crypts for early diestrus and stromal cells in mid diestrus. The proliferation decreased significantly in the basal glands…

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O linfoma canino é um dos tumores malignos com maior prevalência no cão, sendo o linfoma difuso de células B grandes o subtipo mais comum. A topoisomerase IIα, proteína nuclear multifuncional, participa nos mecanismos de proliferação celular, constituindo um importante alvo terapêutico em tumores do sistema hematopoiético. Embora vários artigos publicados demonstrem que a expressão de topoisomerase IIα é um fator de prognóstico em humanos com linfoma não-Hodgkin, a sua relevância no linfoma canino é desconhecida. Foi objetivo deste estudo avaliar a expressão de topoisomerase IIα em linfomas B caninos e o seu valor prognóstico. Foram analisados 12 casos de linfoma difuso de células B grandes com recurso à técnica de imunohistoquímica, após otimização do protocolo. Procedeu-se à contagem celular, dividindo-se a intensidade de imunomarcação em três graus (intensa, moderada e nula). Correlacionaram-se os níveis de expressão de topoisomerase IIα com o marcador de proliferação Ki-67 e com o tempo de sobrevivência mas, devido ao reduzido número de casos estudados, não foram obtidos valores estatisticamente significativos. Este estudo permitiu otimizar o processo de imunomarcação e de quantificação da topoisomerase IIα em linfomas caninos. De futuro, devem ser realizados mais trabalhos que permitam aferir a validade da expressão desta enzima como fator prognóstico, neste tipo de tumores.

ABSTRACT - Topoisomerase IIα expression analysis in canine diffuse large B-cell lymphoma - Canine lymphomas are one of the most common neoplasms in dogs, with the diffuse large B-cell lymphoma being the most common subtype. Topoisomerase IIα is a multifunctional nuclear protein and it plays an essential role in cellular proliferation. It is also an important therapeutic target in haematopoietic tumors. Although several reports showed that expression levels of topoisomerase IIα could be a predictive factor in human non-Hodgkin lymphoma, its importance in canine lymphoma is still unknown. The aims of this study were to evaluate the expression of topoisomerase IIα in canine B-cell lymphomas and to validate its prognostic value. Twelve cases of canine diffuse large B-cell lymphoma were analysed, using the immunohistochemical technique, after optimization of the protocol. Cell counting was performed and the observed immunostaining was divided according to an intensity scale. Correlation levels between topoisomerase IIα expression, Ki-67 proliferation index and survival analysis were performed. Due to the small number of analysed cases, no statistically significant results were obtained. This study allowed the assessment of topoisomerase IIα immunostaining and quantification methods in canine lymphomas. Further studies must be performed in order to assess the predictive value of topoisomerase IIα expression levels in this type of tumors.

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À semelhança do que é a realidade no universo da Medicina humana, a identificação de parâmetros relevantes a nível de prognóstico constitui uma área de investimento considerável na investigação do cancro mamário canino. Este trabalho pretende caracterizar tumores mamários caninos quanto às características epidemiológicas, clinicopatológicas e imunofenotípicas, avaliando o seu valor prognóstico pela investigação de associações significativas ou tendenciais entre si e incluindo as que dizem respeito aos estudos de sobrevivência [análise do tempo de sobrevivência (TS) e do tempo livre de doença (TLD)]. Pretende verificar também, em termos temporais concretos, como as diferenças em cada uma das características se traduz em termos de prognóstico. Os dados foram obtidos a partir de uma amostra de 41 cadelas que apresentavam tumores mamários. Os tumores foram analisados por avaliação histopatológica, pela avaliação da expressão de marcadores moleculares (Ki-67, RP, HER-2 e CK5/6) através de técnica imunohistoquímica e pelo estabelecimento de sua respetiva classificação molecular. Em termos epidemiológicos a nossa amostra mostrou-se perfeitamente concordante com a descrita em estudos anteriores. Em termos associativos foi possível concluir, a nível estatisticamente significativo, do pior prognóstico do maior tamanho tumoral, da metastização regional, do maior estadio tumoral TNM, da infiltração de células linfocíticas, dos tipos histopatológicos considerados de maior malignidade, do maior grau histológico de malignidade e da ausência de diferenciação mesenquimatosa. A expressão de Ki-67 como indicador de proliferação revelou-se de valor prognóstico importante, pela associação (estatisticamente significativa) da sua maior expressão às características anteriormente descritas como indicativas de pior prognóstico em si: o tamanho tumoral, o grau de malignidade, a necrose intratumoral, a metastização regional e, em termos epidemiológicos, a cadelas de raça indeterminada. O valor cut-off de 25% para o Ki-67 surgiu como o mais apropriado para o estudo do seu valor prognóstico (quando comparado com os cut-off alternativos de 20% e 16,43%-mediana) pelo número e significância de associações conseguidas. A maior expressão de RP surgiu associada significativamente aos tumores de cadelas inteiras e cadelas de raça indeterminada, assim como a tumores de tipo histológico simples e complexos e graus I e II de malignidade. Verificou-se uma sobre-expressão do marcador HER-2 em 19,4% dos tumores analisados, com uma maior frequência destes em carcinomas simples e de grau histológico III com infiltração linfocítica, não se chegando no entanto a associações estatisticamente significativas As CK5/6 tiveram expressão positiva quase ubiquitária, sendo os carcinomas de células escamosas o tipo histológico com uma maior percentagem de marcação. Dentro das associações estatisticamente significativas, no que diz respeito aos subtipos moleculares de acordo com o sistema de classificação…

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Os tumores mamários são a segunda neoplasia mais comum no Cão, sendo a mais frequente na cadela, representando assim uma afeção de enorme importância em Medicina Veterinária. Recentemente, devido aos avanços na área da Biologia Molecular e à introdução de novos tratamentos no combate a esta doença na Mulher, aumentou o interesse na investigação e no desenvolvimento de conhecimento sobre os diferentes subtipos moleculares, em especial, os tumores que sobrexpressam HER-2 (HER-2+), na cadela. Na Mulher, os tumores que sobrexpressam HER-2 representam 20% a 30% da totalidade dos tumores mamários malignos e estão associados a um crescimento agressivo e prognóstico reservado. Na cadela, a percentagem de tumores HER-2+ parece variar entre os 8,3% e os 40%, mas a influência da sobrexpressão deste recetor no prognóstico ainda não está totalmente esclarecida devido à falta de uniformização da técnica de imunohistoquímica (IHQ) em tecidos caninos. Assim, este estudo teve como objetivo, a otimização da deteção de HER-2 nesta espécie, o esclarecimento do cenário epidemiológico dos tumores mamários caninos (TMC) HER-2+ e, com isto, a descrição de um putativo modelo biológico para o estudo de tumores mamários HER-2+ da Mulher. Utilizando a técnica de imunohistoquímica, foram testados quatro anticorpos (CB11, 4B5, TAB250 e SP3) e diferentes protocolos de recuperação antigénica. Apenas os anticorpos que reconhecem o domínio intracelular detetaram o recetor HER-2 da cadela. Foi identificada na amostra em estudo, uma sobrexpressão de HER-2 entre 19% e 40,5% dos TMC, dependendo do anticorpo. Não houve relação entre a sobrexpressão do recetor HER-2, o grau de malignidade, o tipo histológico do tumor ou outros indicadores de mau prognóstico. Uma vez que foi identificada sobrexpressão de HER-2 e, implicitamente, reatividade cruzada dos anticorpos anti-HER-2 humano com o recetor homólogo do Cão, conclui-se que a cadela poderá vir a ser utilizada como modelo biológico em estudos de Oncologia Comparada. Este facto irá contribuir para que se aprofunde o conhecimento nesta doença e que se apliquem novas abordagens terapêuticas no tratamento dos tumores mamários caninos em Medicina Veterinária.

Abstract - EVALUATION OF HER -2 EXPRESSION IN CANINE MAMMARY CARCINOMA - Mammary tumours are the second most common neoplasm in Dog and the commonest tumour in the female dog, thus representing a disease with major importance in Veterinary Medicine. Recently, due to new insights in the Molecular Biology field and the introduction of new treatment options for cancer in Woman, the interest in the investigation and development of the knowledge about the molecular subtypes, especially HER-2 overexpressing tumours in the female dog, increased. Regarding woman, the HER-2 overexpressing tumours represent 20% to 30% of all breast cancer and are correlated with aggressive behaviour and poor prognosis. As for female dogs, the percentage of HER-2+ tumours seems to range between 8.3% and 40%, but the…

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária

Hoje em dia os animais exóticos são mantidos cada vez mais como animais de estimação, sendo um dos principais estímulos iatrotrópicos a presença de nódulos cutâneos. Assim, a presente dissertação encontra-se baseada em informações clínicas, análises citológicas e histopatológicas de nódulos cutâneos em animais exóticos. Nesta dissertação é apresentado um estudo retrospectivo desde 1997 a 2011 onde foram consultados os resultados de 12638 análises citológicas e 25781 análises histológicas. Nas primeiras, apenas 142 análises pertencem a animais exóticos (1%), sendo que dentro destas, 70% pertencem a nódulos cutâneos. Nas análises histopatológicas, 1496 análises (6%) pertencem a animais exóticos, sendo que nestas 9% dizem respeito a análises de nódulos cutâneos. São ainda apresentados 19 casos clínicos perfazendo um total de 21 análises histopatológicas de nódulos cutâneos e, em dois destes casos, também incluem análise citológica. Os casos clínicos foram agrupados consoante o resultado anátomo-patológico obtido e foi apresentada a história clínica do animal. O estudo retrospectivo permitiu concluir que o número de análises anátomo-patológicas de animais exóticos não parece ter aumentando ao longo dos anos, não acompanhando a tendência crescente destas espécies como animais de companhia.

ABSTRACT - Pathologic characteristics of cutaneous nodules in exotic animals - Today exotic animals are increasingly kept as pets and one of the most frequent iatrotopic stimulus is the presence of skin nodules. This dissertation is based on clinical information and the analysis of cytological and histological cutaneous nodules in exotic animals. We performed a retrospective study from 1997 to 2011 where 12638 cytological and 25781 histological results were reviewed. In the former, only 142 analysis belong to exotic animals (1%), and within these, 70% are from skin nodules. Among histopathology cases, 1496 analysis (6%) came from exotic animals and of these, 9% were from skin nodules. In the fourth part of this dissertation, 19 clinical cases with a total of 21 histopathological analyses of skin nodules are presented, of which two cases, also underwent cytological analysis. Clinical cases were grouped according to pathological results obtained and the medical history of the animal is also presented. This retrospective study allows to conclude that the number of anatomic-pathologic analyses from exotic animals has not increased over the years.